国家自然科学基金(30500012)
- 作品数：7 被引量：3H指数：1
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- 幽门螺杆菌对人胃癌细胞株AGS侵袭力的影响
- 2009年
- 背景:幽门螺杆菌(H.pylori)为人类胃癌的Ⅰ类致癌原,但其在胃癌演进中的作用仍未完全阐明。目的:体外观察H.pylori对人胃癌细胞株AGS侵袭力的影响。方法:将AGS细胞与H.pylori标准菌株NCTC11637共培养72 h,光学显微镜观察12～72 h时细胞形态变化,扫描电镜观察24 h时细胞形态变化。侵袭小室实验检测共培养24 h后AGS细胞的侵袭力。结果:AGS细胞与H.pylori共培养12 h后,细胞渐出现变形,伪足增多、伸长,24 h和48 h时细胞间相互离散,伸出细长伪足,呈"蜂鸟"表型,60 h和72 h时细胞出现空泡样变,死亡逐渐增多;扫描电镜下可见H.pylori黏附于AGS细胞表面,细胞变形明显,伸出细长伪足。侵袭小室实验显示与H.pylori共培养24 h的AGS细胞,每200倍视野下穿膜细胞数显著高于PBS对照组(130.4±11.5对87.1±9.3,P<0.01)。结论:H.pylori感染可影响人胃癌细胞株AGS的细胞形态,增加细胞侵袭力。
- 樊丽琳房殿春刘开云兰春慧
- 关键词：胃肿瘤肿瘤侵润
- 幽门螺杆菌对胃癌细胞线粒体外膜电压依赖阴离子通道的影响
- 2009年
- 目的观察幽门螺杆菌(HP)作用于胃癌细胞后VDAC1、VDAC2和VDAC3 mRNA的表达变化,探讨HP通过线粒体途径致凋亡的分子机制。方法HP分别作用于胃癌细胞,0、12、24、48h后收集细胞,提取RNA,应用RT-PCR检测各时相点VDAC1、VDAC2和VDAC3 mRNA表达的变化。结果HP与胃癌细胞共培养12h后,VDAC1、VDAC2和VDAC3 mRNA的表达均增加,24、48h仍呈上升趋势。各时相点的表达量明显高于对照组(P<0.05)。结论HP可能通过上调VDAC基因的表达,使线粒体膜通透性改变,引发凋亡。
- 兰春慧房殿春陈东风刘重阳樊丽琳
- 关键词：幽门螺杆菌胃癌线粒体凋亡
- 幽门螺杆菌重组空泡细胞毒素A片段对人胃腺癌AGS细胞腺嘌呤核苷酸转移酶1基因表达的影响
- 2010年
- 目的探讨幽门螺杆菌(HP)重组空泡细胞毒素A(VacA)片段对人胃腺癌AGS细胞腺嘌呤核苷酸转移酶1(ANT1)基因表达的影响。方法HPVacA基因片段重组质粒转染AGS细胞后,分别于0、24、48、72 h收集细胞,提取总RNA和总蛋白,应用逆转录聚合酶链式反应和蛋白印迹法检测各时相点ANT1基因的mRNA和蛋白表达变化。结果重组VacA基因片段质粒转染AGS细胞后,ANT1基因mRNA和蛋白表达均随时间呈逐渐升高趋势,各时相点的表达量明显高于对照组(P<0.05)。结论HP可能通过上调ANT1基因的表达,使线粒体膜通透性改变,引起细胞凋亡。
- 黄增荣王建华兰春慧
- 关键词：幽门螺杆菌细胞凋亡
- H.pylori对胃癌细胞线粒体外膜蛋白VDAC1表达的影响
- 2009年
- 目的观察幽门螺杆菌(H.pylori)作用于胃癌细胞后线粒体外膜蛋白VDAC1 mRNA及蛋白的表达变化,探讨H.pylori通过线粒体途径致凋亡的分子机制。方法H.pylori分别作用于胃癌细胞0、12、24、48 h后,收集细胞,应用RT-PCR和Western blot法检测各时相点VDAC1 mRNA和蛋白表达变化。结果H.pylori与胃癌细胞共培养12 h后,VDAC1 mRNA及蛋白的表达增加,24 h增加更明显,48 h达到高峰。VDAC1 mRNA及蛋白各时相点的表达量明显高于对照组(P<0.05)。结论H.pylori可能通过上调胃癌细胞线粒体外膜蛋白VDAC1 mRNA及蛋白的表达,引起线粒体外膜通透性改变,导致凋亡发生。
- 兰春慧孟庆庄房殿春黄增荣樊丽琳
- 关键词：幽门螺杆菌凋亡胃癌细胞线粒体
- 线粒体内膜蛋白ANT在幽门螺杆菌致胃癌细胞凋亡中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的观察H.pylori作用于胃癌细胞后线粒体内膜蛋白ANT1、ANT2和ANT3 mRNA的表达变化,探讨H.pylori致胃癌细胞凋亡的分子机制。方法H.pylori分别作用于胃癌细胞0、12、24、48 h后收集细胞,提取RNA,应用RT-PCR检测各时相点ANT1、ANT2和ANT3 mRNA表达的变化。结果H.pylori与胃癌细胞共培养12 h后,ANT1和ANT3 mRNA的表达增加,24 h增加更明显,48 h达到高峰。各时相点的表达量明显高于0 h(P<0.05)。ANT2的表达较弱,与0 h相比无明显差异(P>0.05)。结论H.pylori可能通过影响线粒体内膜蛋白ANTmRNA的表达,改变线粒体膜通透性,诱发细胞凋亡。
- 兰春慧房殿春樊丽琳黄增荣
- 关键词：幽门螺杆菌胃癌细胞线粒体凋亡
- 幽门螺杆菌空泡毒素P58亚单位在酵母系统中的表达
- 2009年
- 【目的】构建幽门螺杆菌空泡毒素(VacA)P58亚单位酵母双杂交诱饵表达载体,为应用酵母双杂交系统筛选与空泡毒素P58亚单位相互作用的蛋白奠定基础。【方法】采用PCR方法,从幽门螺杆菌s1/m1型标准毒株NCT11637基因组中扩增空泡毒素P58亚单位,经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后克隆入经同样酶切处理的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,构建pGBKT7-VacA P58重组质粒,并将其转化E.coliDH5α,提取质粒经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切、测序鉴定正确后,转化入宿主酵母菌AH109,色氨酸(Trp)缺陷压力筛选,对阳性转化酵母菌扩大培养,提取总蛋白进行Western-blot鉴定,同时检测重组蛋白有无毒性、渗漏和自激活活性。【结果】成功扩增长度为1202bp的空泡毒素P58片段,重组质粒pGBKT7-VacA P58经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切可得到1202bp大小的片段,测序结果显示扩增产物序列与参考序列完全匹配。重组质粒pGBKT7-VacA P58成功地转化至酵母细胞AH109中。表达的诱饵蛋白无毒性、无渗漏及无自激活活性,Western-blot分析证实酵母菌AH109细胞正确表达了重组蛋白。【结论】成功构建了幽门螺杆菌空泡毒素P58亚单位酵母诱饵表达载体,其可在酵母菌系统中成功表达,且表达产物正确。
- 黄增荣王建华兰春慧
- 关键词：幽门螺杆菌酵母双杂交空泡毒素
- H.pylori对胃癌细胞线粒体膜蛋白ANT1表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察幽门螺杆菌(H.pylori,HP)作用于胃癌细胞后线粒体膜蛋白ANT1 mRNA及蛋白的表达变化,探讨H.pylori致胃癌的分子机制。方法HP分别作用于胃癌细胞0、12、24、48h后,收集细胞,应用RT-PCR和Western blot法检测各时相点ANT1基因和蛋白表达变化。结果HP与胃癌细胞共培养12h后,ANT1 mRNA的表达增加,24h增加更明显,48h达到高峰。各时相点的表达量明显高于对照组(P<0.05)。ANT1蛋白表达在各时相点均增加,明显高于对照组(P<0.05)。结论HP可上调胃癌细胞线粒体膜蛋白ANT1 mRNA及蛋白的表达,影响线粒体膜通透性改变,这可能是HP通过线粒体途径诱发凋亡的分子靶点之一。
- 兰春慧陈东风房殿春黄增荣
- 关键词：幽门螺杆菌凋亡胃癌细胞线粒体
