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改良透射电镜方法观察小鼠ICSI胚胎核仁超微结构: 2011年; 小鼠植入前胚胎的发育过程中,核仁经历从简单到复杂、从致密结构到网状结构的变化。对核仁超微结构的观察有助于揭示早期胚胎发育过程中核仁结构的动态变化及其特定阶段的功能。但由于核仁结构微小,数目较少,并且在胚胎中只处于卵裂球细胞核的内部,难以定位,因而给核仁的超微结构观察带来很大的困难。本实验探索了透射电镜观察小鼠植入前胚胎核仁的方法:先用琼脂对小鼠胚胎进行预包埋,在经过常规的透射电镜样品制备流程后,将整个胚胎先切成半薄切片;经过甲苯胺蓝染色后,选取含核仁结构的切片进行重包埋;最后再对回收来的半薄切片进行超薄切片,醋酸铀染色后上电镜观察;最终成功获得小鼠胚胎植入前发育不同时期核仁清晰的透射电镜图像。; 郑重胡丽丽文刚张宝东雷蕾; 关键词：小鼠胚胎核仁透射电镜

不同浓度异氟醚对小鼠肺表面活性蛋白A表达的影响: 2012年; 目的探讨异氟醚对小鼠肺表面活性蛋白A表达的影响。方法将雄性昆明小鼠随机分为5组,吸入空气组、吸入1.0MAC异氟醚5min组、吸入3.0MAC异氟醚5min组、吸入1.0MAC异氟醚2h组、吸入3.0MAC异氟醚2h组;RT-PCR方法检测小鼠肺内SP-A mRNA的表达;免疫组化方法检测小鼠肺内SP-A蛋白的表达。结果吸入异氟醚5min对小鼠肺内SP-A表达无影响,吸入异氟醚2h能降低小鼠肺内SP-A表达,而且随吸入浓度升高,SP-A表达呈负相关。结论吸入高浓度异氟醚长时间能够降低小鼠肺内SP-A的表达。; 韩芳王丽霞单智焱王振东刘春佳雷蕾; 关键词：异氟醚肺表面活性蛋白A 小鼠

七氟醚对小鼠肺表面活性蛋白的影响被引量：1: 2012年; 目的探讨七氟醚对小鼠肺表面活性蛋白的影响。方法将雄性昆明小鼠随机分为4组,吸入空气组、吸入1.0MAC七氟醚2h组、吸入2.0MAC七氟醚2h组、吸入3.0MAC七氟醚2h组;RT-PCR方法检测了吸入不同浓度七氟醚2h小鼠肺内表面活性蛋白A和B(SP-A、SP-B)mRNA的表达;免疫组化方法检测吸入不同浓度小鼠肺内SP-A、SP-B蛋白的表达。结果吸入七氟醚2h能降低小鼠肺内SP-A和SP-B表达,而且随吸入浓度升高,SP-A、SP-B表达呈负相关。结论长时间吸入高浓度七氟醚能够降低小鼠肺内SP-A和SP-B表达。; 王丽霞韩芳单智焱王振东刘春佳雷蕾; 关键词：七氟醚小鼠

小鼠胚胎致密化起始的调控机制被引量：4: 2009年; 植入前小鼠胚胎的发育事件包括第一次卵裂、胚胎基因组激活、桑椹胚致密、囊胚形成。小鼠受精卵胚胎的致密化发生在8-细胞阶段晚期,致密过程中,胚胎卵裂球本身以及卵裂球之间发生了一系列的变化。这些变化包括卵裂球微绒毛以及胞质成分的极性化分布,卵裂球之间形成特殊的胞间连接。致密化是哺乳动物胚胎发育过程中的第一个细胞分化事件,即导致了内细胞团以及滋养外胚层的产生。植入后,内细胞团将发育成为胚体,滋养外胚层将发育成为胎盘等胚外组织。细胞粘附分子E-cadherin介导的胞间粘附起始了致密化。卵裂球发生粘附所需的组分在致密前已经存在,但是直至8-细胞阶段晚期连接复合体才表现出明显的粘附活性。敲除E-cadherin基因,发现母源性的E-cadherin足以介导致密。E-cadherin介导的胞间粘附是细胞粘附的第一步。文章综述了E-cadherin介导胞间粘附的具体过程以及蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)调控该过程的相关机制。; 李超波胡丽丽王振东钟淑琦雷蕾; 关键词：胚胎致密化细胞粘附蛋白激酶C

小鼠胎儿成纤维细胞及胚胎干细胞转绿色荧光蛋白基因的研究被引量：1: 2008年; 目的检测用增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)转染的小鼠胎儿成纤维细胞及小鼠胚胎干细胞的转染效率及EGFP的表达情况。方法电穿孔法将EGFP转入胎儿成纤维细胞及胚胎干细胞,G418筛选,荧光显微镜观察转染效率及绿色荧光蛋白表达情况。结果胚胎干细胞的转染率高于成纤维细胞,转染后的两种细胞经药物筛选均有绿色荧光蛋白表达。结论电穿孔转染细胞的方法简单、效率高,是一种较为理想的基因转染方法,经药物筛选后的两种细胞均可用于核移植,为转基因克隆动物的研究奠定了基础。; 阎晓飞徐燕宁申景岭单智焱关娜钟淑琦金连弘雷蕾; 关键词：电穿孔转基因成纤维细胞胚胎干细胞

小鼠植入前胚胎致密化与囊胚形成的分子调控被引量：1: 2011年; 哺乳动物胚胎植入前的发育中致密化和囊胚形成分别标志着第一次、第二次细胞分化(即细胞命运决定)的起始,是胚胎正常发育的必要条件。因此对影响致密化和囊胚形成的蛋白及调节因子的研究尤为重要。本文探讨了与致密化相关的细胞黏附蛋白、连接蛋白、细胞骨架等分子和囊胚形成相关的紧密连接蛋白、钠钾三磷酸腺苷激酶等分子的一系列调控,以及致密化和囊胚形成在细胞命运决定中的重要作用。; 王振东郑重胡丽丽刘忠华雷蕾; 关键词：植入前胚胎致密化

Reelin信号通路在大脑新皮质形成中的作用被引量：2: 2010年; 人类大脑皮层发育过程中,大量神经细胞从靠近脑室的增殖区产生并向软脑膜方向迁移,最终形成与人类许多高级功能相关的6层大脑新皮质结构,Reelin-Dab1信号通路在神经细胞迁移中起到了关键的作用。Reelin结合于迁移细胞膜上的极低密度脂蛋白受体(very lowlipoprotein recep-tor,VLDLR)和载脂蛋白E受体2(apolipoprotein E receptor2,ApoER2),磷酸化胞浆内的衔接蛋白disabled1(Dab1),继而与下游信号分子如细胞骨架蛋白等相互作用,指导皮层神经元的正确迁移和定位。本篇综述讨论了Reelin-Dab1信号通路在人类新皮质形成过程中的作用及近几年的研究新进展。; 程琳孙瑞珍单智焱申景岭金连弘雷蕾; 关键词：新皮质 REELIN

胚胎干细胞与四倍体互补产生转基因小鼠: 2009年; 目的将四倍体胚胎补偿技术与转基因相结合,构建基因打靶载体转化的胚胎干细胞(ESCs),获得小概率的同源重组事件,进而直接得到所要的突变品系。方法通过电穿孔的方法将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒转入ESCs,用G418筛选获得EGFP-ESCs。另外,通过电融合获得四倍体囊胚细胞,显微注射法将19～21个EGFP-ESCs注入每个四倍体囊胚腔,分别移植到假孕2.5d雌鼠子宫或假孕0.5d的输卵管内。结果获得稳定表达的EGFP-ESCs,染色体数目正常(2n=40条);四倍体细胞融合率为95.07%,囊胚发育率为95%;共获得410个重构囊胚;移植后未得到出生小鼠,但共观察到了151个着床位点,子宫移植的着床率为29.41%,输卵管移植的着床率为64.37%,获得的胚胎中EGFP蛋白有散在的表达。结论稳定表达的EGFP-ESCs参与到了转基因胎鼠的发育中;本实验中输卵管移植的着床率高于子宫移植的着床率。; 徐燕宁关娜单智焱申景岭金连弘雷蕾; 关键词：胚胎干细胞转基因小鼠

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