广东省科技厅科技计划项目(2008B030301084)
- 作品数：7 被引量：5H指数：1
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- SnoN蛋白在慢性同种移植肾病大鼠肾组织中的表达及作用被引量：1
- 2011年
- 目的:观察Smad核转录共抑因子(SnoN蛋白)在慢性移植肾病(CAN)大鼠肾组织的表达及其与CAN大鼠肾脏功能改变、病理学改变、Smad泛素化调节因子2(Smurf2)之间的关系,探讨SnoN蛋白在CAN中的作用。方法:实验组采用近交系大鼠的同种异基因动物间的左肾原位移植,雄性F344大鼠40只为供体,雄性LEW大鼠40只为受体,移植手术后第10天行右肾切除术,对照组采用单肾切除术的雄性大鼠25只。分别于4周、8周、12周、16周及24周处死大鼠,做肾功能、移植肾组织学检测,并借助免疫组织化学与免疫印迹、逆转录-多聚酶联反应方法检测肾组织中snoN蛋白、snoNmRNA的表达;免疫组织化学与免疫印迹方法检测肾组织smurf2的表达,免疫印迹方法检测肾组织p-smad2/3蛋白的表达水平,逆转录-多聚酶联反应方法检测肾组织TGF-β1mRNA的表达。结果:移植组大鼠尿蛋白定量、血清肌酐水平于移植后16周时显著增高,24周时更为显著。snoN蛋白在移植组逐渐降低,24周时降至最低,为对照组的13%。snoNmRNA在移植组和对照组差异无统计学意义;p-smad2/3、smurf2在移植后随疾病进展逐渐升高,24周时达高峰。免疫组织化学结果显示snoN蛋白表达部位、表达时相与smurf2是一致的。相关分析显示,肾移植大鼠snoN蛋白表达水平与24h尿蛋白定量、血清肌酐水平、肾间质纤维化程度呈负相关(P<0.05,P<0.01)。与smad2/3、smurf2水平呈显著负相关(P<0.01)。结论:SnoN蛋白表达下调在CAN发病机制中起作用,同时Smurf2介导SnoN蛋白降解可能参与了这个过程。
- 贾宁王汉刘耿容张桦周文英
- 关键词：慢性移植肾病SNONSMURF2
- 慢性肾脏病患者血清脂肪细胞因子水平及其作用的研究被引量：3
- 2009年
- 目的检测慢性肾脏病(CKD)患者血清脂联素(ADPN)、抵抗素(Res)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,探讨CKD患者血清脂肪细胞因子水平的变化及其作用。方法选择CKD患者104例,分为肾病组、肾炎组、肾衰非透析组、腹膜透析组和血液透析组。另设健康对照组。用ELISA方法检测上述各项指标,比较各组间的差别。结果①CKD患者血清ADPN水平在肾病组[(22.40±6.02)mg/L]、肾炎组[(12.41±4.01)mg/L]、肾衰非透析组[(15.88±4.94)mg/L]、腹膜透析组[(14.55±3.51)mg/L]和血液透析组[(14.26±4.54)mg/L]均显著升高(与对照组[(4.95±2.19)mg/L]相比,P<0.01),并以肾病组升高为著;②患者的血清Res水平在肾衰非透析组[(9.95±2.65)μg/L]、腹膜透析组[(10.9±2.55)μg/L]和血液透析组[(10.52±4.77)μg/L]均显著升高(与对照组[(4.60±1.47)μg/L]和肾病组[(5.80±2.16)μg/L]、肾炎组[(5.57±1.24)μg/L]患者相比,P<0.01);③CKD患者的血清ADPN水平与Res、尿蛋白量呈正相关(P<0.05),与血白蛋白水平呈负相关(P<0.01);血清Res水平与TNF-α、hs-CRP、血肌酐呈正相关(P<0.01),与肾小球滤过率呈负相关(P<0.01)。结论CKD患者的血清ADPN、Res水平显著升高,并与尿蛋白量、炎性因子和肾小球滤过率等因素有关。ADPN和Res在CKD患者动脉粥样硬化的启动和发展中可能起一定作用。
- 张桦贾宁郭军利张慧涛汪悠悠朱晔周文英
- 关键词：脂联素抵抗素炎症慢性肾脏病
- 大鼠慢性同种移植肾病肾组织中Smad7的表达及意义
- 2011年
- 目的研究大鼠慢性同种移植肾病肾组织中Smad7的表达及意义。方法制作原位肾移植大鼠模型，分别于4周、8周、12周、16周及24周处死大鼠，检测24h尿蛋白定量、肾功能；移植肾组织标本切片行光镜检测；免疫组织化学与免疫印迹、逆转录-多聚酶链反应方法检测肾组织中Smad7蛋白、Smad7mRNA的表达；免疫印迹方法检测肾组织p-smad2／3蛋白的表达水平，逆转录-多聚酶链反应方法检测肾组织转化生长因子-81mRNA的表达。结果移植组大鼠尿蛋白定量、血清肌酐水平于移植后16周时显著增高，24周时更为显著。Smad7蛋白在移植组逐渐降低，24周时降至最低，为对照组的15％。Smad7mRNA在移植后4周即升高，随着移植时间逐渐延长，24周时为对照组的2．73倍（P〈0．01）；p-smad2／3在移植后随疾病进展逐渐升高，24周时达高峰。免疫组织化学结果显示Smad7主要表达在小管间质。相关分析显示，肾移植大鼠Smad7蛋白表达水平与24h尿蛋白定量、血清肌酐水平、肾间质纤维化程度呈负相关（P〈0．05，P〈O．01）。结论Smad7蛋白表达下调在慢性同种移植肾病发病机制中起重要作用。
- 贾宁王汉郑晶张桦
- 关键词：转化生长因子
- 粉防己碱对转化生长因子-β1诱导的人近端小管上皮细胞转分化的干预作用及机制
- 2011年
- 目的探讨粉防己碱(tetrandrine,Tet)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的拮抗效应及其机制。方法体外培养的HK-2随机分为正常对照组、Tet组(100ng/ml)、TGF-β1(5ng/ml)组和TGF-β1(5ng/ml)+Tet(100ng/ml)组。Westernblot法检测细胞中TβRI蛋白、SnoN蛋白水平、Smad7蛋白水平和Smad2/3磷酸化水平的改变;半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察细胞中TβRI mRNA、Smad7 mRNA、SnoN mRNA表达的改变。免疫荧光检测间充质细胞标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果 Tet能抑制TGF-β1诱导α-SMA的表达,显著上调SnoN mRNA和蛋白的表达(P<0.01);Tet对TβRI表达、Smad2/3的磷酸化及Smad7的表达没有影响。结论 Tet能抑制人近端小管上皮细胞转分化,其机制与Tet上调SnoN表达有关。
- 贾宁王汉郑晶张桦
- 关键词：上皮细胞转化生长因子Β1粉防己碱
- 慢性同种移植肾病大鼠肾组织中Smurf 2的表达及作用
- 2011年
- 目的观察Smad泛素化调节因子-2(Smurf 2)在慢性移植肾病(CAN)大鼠肾组织的表达及其与CAN大鼠肾脏功能改变、病理学改变之间的关系,探讨Smurf 2在CAN中的作用。方法实验组采用近交系大鼠的同种异基因动物间的左肾原位移植,雄性F344大鼠40只为供体,雄性LEW大鼠40只为受体,移植手术后第10天行右肾切除术,对照组采用单肾切除术的雄性大鼠25只。分别于4、8、12、16周及24周处死大鼠,做肾功能、移植肾组织学检测,并借助免疫印迹、逆转录-多聚酶联反应方法检测肾组织中Smurf 2 mRNA、Smurf 2蛋白的表达。结果移植组大鼠尿蛋白定量、血清肌酐水平于移植后16周时显著增高,24周时更为显著。Smurf 2 mRNA、Smurf 2蛋白在移植后随疾病进展逐渐升高,24周时达高峰。相关分析显示,肾移植大鼠Smurf 2表达水平与24 h尿蛋白定量、血清肌酐水平、肾间质纤维化程度呈正相关(P<0.05,P<0.01)。结论 Smurf 2在CAN发病机制中起作用。
- 贾宁郑晶王汉周文英
- 关键词：慢性移植肾病
- 终末期肾脏病患者血清抵抗素水平的变化及意义
- 2008年
- 目的检测终末期肾脏病(ESRD)透析和非透析患者血清抵抗素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及血清白蛋白、血脂、肾功能水平,探讨ESRD患者血清抵抗素水平的变化及与各影响因素的关系。方法选择ESRD患者60例,分为3组:肾衰非透析组(18例)、血液透析组(22例)和腹膜透析组(20例),另设正常对照组(20例)。用ELISA方法检测血清抵抗素、TNF-α和hs-CRP,同时常规测定血肌酐(SCr)、血清白蛋白、血总胆固醇和甘油三酯。比较各组间的差别。结果(1)患者血清抵抗素水平在肾衰非透析组[(9.95±2.65)mg/L]、血液透析组[(10.52±4.77)mg/L]和腹膜透析组[(10.90±2.55)mg/L]均显著升高,与对照组[(4.60±1.47)mg/L]相比,差异有统计学意义(P<0.01),但三组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)ESRD患者血清抵抗素水平与TNF-α(r=0.539)、hs-CRP(r=0.406)、SCr(r=0.340)呈正相关(P<0.01),与肾小球滤过率(GFR)呈负相关(r=-0.807,P<0.01)。结论在终末期肾脏病,无论血液透析、腹膜透析还是非透析患者,其血清抵抗素水平均明显升高,并与TNF-α、CRP、GFR等因素有关。抵抗素可能对ESRD患者的亚临床炎症起一定作用。
- 张桦贾宁郭军利张慧涛汪悠悠
- 关键词：肾功能衰竭持续不卧床抵抗素
- Smad核转录共抑因子在人近端小管上皮细胞转分化中的表达及作用被引量：1
- 2011年
- 目的:观察Smad核转录共抑因子(SnoN)在TGF-β1致人近端小管上皮细胞转分化过程中的表达,探讨SnoN蛋白对TGF-β1所致的小管上皮细胞转分化的作用。方法:体外培养的人近端小管上皮细胞(HK-2),随机分为正常对照组、TGF-β1(5ng/ml)组和TGF-β1(5ng/ml)+MG-132(5μmol/ml)组。Western-blot检测细胞中SnoN蛋白水平的改变和Smad2/3磷酸化水平的改变;半定量RT-PCR方法观察细胞中SnoN mRNA表达的改变。免疫荧光检测间充质细胞标记物α-SMA的表达。结果:Western-blot的结果显示:(1)TGF-β1作用于细胞,SnoN蛋白表达迅速减少,10min为对照组的38%,并呈时间依赖进行性减少,60min较0min降低89%(P<0.01),24h有所恢复但仍较0min明显降低(P<0.01);TGF-β1+MG-132组中SnoN蛋白表达与对照组差异无统计学意义,与TGF-β1组相比,SnoN蛋白水平明显上调。(2)半定量RT-PCR显示:TGF-β1作用于细胞后,与SnoN蛋白表达不同,SnoN mRNA迅速升高,60min其表达增高近1倍(与0min比较,P<0.01);TGF-β1+MG-132组中SnoNmRNA的表达与TGF-β1组差异无统计学意义。(3)TGF-β1诱导细胞10min即可引发Smad2/3磷酸化(与0min比较,P<0.01),随着作用时间的延长,细胞中磷酸化的Smad2/3蛋白表达水平逐渐升高,TGF-β1+MG-132组中,Smad2/3磷酸化蛋白的表达减少80%(P<0.01)。(4)TGF-β1作用于细胞24h后免疫荧光检测到重新表达的α-SMA,TGF-β1+MG-132组α-SMA的表达被抑制。结论:TGF-β1可诱导SnoNmRNA表达上调,但SnoN蛋白的表达遭遇泛素系统的降解显著减少,SnoN蛋白水平的下调可能是TGF-β1导致小管上皮细胞纤维化作用的必要条件。
- 贾宁王汉吴小漫张桦
- 关键词：近端小管上皮细胞转化生长因子-ΒSNON
