重庆市教委科研基金(040208)
- 作品数:20 被引量:52H指数:5
- 相关作者:朱勇张永亮杨金宏孔卫青艾均文更多>>
- 相关机构:西南大学周口师范学院中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金:重庆市教委科研基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 槲皮素和硫脲对桑尺蠖多酚氧化酶的抑制作用被引量:2
- 2011年
- 多酚氧化酶在昆虫的变态发育和免疫防御中起着非常重要的作用。为开发以该酶为靶标的新型害虫抑制剂提供理论依据,以桑尺蠖(Phthonandria atrineata)五龄幼虫为材料提取多酚氧化酶,探讨了槲皮素和硫脲对该酶的抑制作用。结果表明,槲皮素只改变桑尺蠖多酚氧化酶的米氏常数,不改变其最大反应速度;而硫脲只改变其最大反应速度,不改变米氏常数,因此,它们分别属于桑尺蠖多酚氧化酶的竞争性和非竞争性抑制剂。
- 张永亮朱勇
- 关键词:桑尺蠖多酚氧化酶槲皮素硫脲
- 桑尺蠖多酚氧化酶的纯化及其部分生物化学性质被引量:4
- 2007年
- 经硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤等步骤,使桑尺蠖Phthonandria atrineata(Butler)多酚氧化酶纯化,纯化倍数为6.28倍.该酶对焦性没食子酸、邻苯二酚和L-多巴的Km值分别为9.64 mmol/L、6.82 mmol/L和4.30 mmol/L.这种多酚氧化酶在pH=7.0,37℃时活性最高.利用多种氧化酶抑制剂对该酶活性的抑制结果表明,所用抑制剂对其均有不同程度的抑制作用.此外,该酶对EDTA和金属离子比较敏感.
- 张永亮曾媛琴贾永红柳照应艾均文朱勇
- 关键词:桑尺蠖多酚氧化酶纯化抑制剂
- 野桑蚕多酚氧化酶分离纯化的试验初报被引量:5
- 2009年
- 多酚氧化酶是昆虫初生新表皮硬化过程中的关键性酶。为有利于研究野桑蚕(Bombyxmandarina)多酚氧化酶的功能与性质,探讨了野桑蚕多酚氧化酶的分离纯化方法。以野桑蚕5龄幼虫为材料,用磷酸盐缓冲液浸提多酚氧化酶粗提液,再经40%饱和度硫酸铵沉淀、透析及Sephadex G-100凝胶过滤进一步分离纯化,得到了部分纯化的多酚氧化酶,其酶纯化倍数为57.14倍±0.19倍,酶得率为10.17%±0.18%,酶比活力为(10 166.67±66.16)U/mg。采用该试验方法可有效分离纯化野桑蚕多酚氧化酶。
- 张永亮朱勇
- 关键词:野桑蚕多酚氧化酶纯化
- 固化茧丝的丝胶稳定性检测和染色性试验被引量:1
- 2009年
- 固化茧丝的丝胶稳定性及染色性直接关系丝胶固着丝绸产品的市场开发前景。通过测定丝胶溶失率、耐洗涤性能和上染率及红外光谱,研究了固化茧丝的丝胶稳定性及适用的染料和部分染色工艺条件。检测结果表明固化茧丝的丝胶溶失率比普通茧丝低,丝胶性能稳定,90℃条件下固化茧丝的丝胶溶失率只有1.6%;红外光谱显示固化茧丝的分子结构发生了一定改变;活性染料和酸性染料对固化茧丝的上染试验显示酸性染料的上染率高于活性染料,但其染色均匀性不及活性染料,活性染料和酸性染料对固化茧丝的最高上染率分别为67.9%、68.5%;适宜固化茧丝纤维上染的温度为70℃,用酸性染料上染固化茧丝不宜采用强酸性浴。
- 成国涛徐水冉瑞龙王万平
- 关键词:丝胶稳定性染色性能染料染色温度
- 桑尺蠖多酚氧化酶的分离纯化被引量:3
- 2010年
- 多酚氧化酶是昆虫初生新表皮硬化过程中的关键酶。为了研究桑尺蠖(Phthonandria atrineata)多酚氧化酶的功能与性质,探讨了桑尺蠖多酚氧化酶的分离纯化方法。以桑尺蠖五龄幼虫为材料,用磷酸盐缓冲液提取多酚氧化酶粗提液,再经80%饱和度硫酸铵沉淀、透析及SephadexG-100凝胶过滤进一步分离纯化,得到了部分纯化的多酚氧化酶,其酶纯化倍数为6.28倍,酶得率为3.34%,酶比活力为812.8 U/mg。
- 张永亮朱勇
- 关键词:桑尺蠖多酚氧化酶纯化
- 家蚕变态期酚氧化酶原基因PPO1的表达谱分析被引量:7
- 2008年
- 酚氧化酶在昆虫的变态发育和免疫防御机制中起着非常重要的作用。利用GenBank上登录的家蚕酚氧化酶原基因PPO1的cDNA序列设计正反向特异引物,通过半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测了家蚕变态期(从5龄第3天到化蛾)雌、雄个体酚氧化酶原基因PPO1的转录活性。家蚕雌性变态期的PPO1基因仅在5龄第4天和上蔟第0、12、24、36、48、60小时及第3、4、5、6、8、10天有表达,其中上蔟第48小时和上蔟第3天的表达量最高;而在雄性家蚕变态期,该基因仅在5龄第4、5、6天及上蔟第36、48小时与第3、5、9、10天和蛾期有表达,其中上蔟第5天的表达量最高。家蚕PPO1基因的转录表达具有时空特异性,推测其在家蚕雌、雄个体变态发育的不同时期中执行不同的功能。
- 张永亮朱勇
- 关键词:家蚕表达谱变态期
- 家蚕和野桑蚕酚氧化酶原基因的组织表达差异比较被引量:12
- 2009年
- 酚氧化酶在昆虫体液免疫反应中起着非常重要的作用。根据GenBank中登录的家蚕和野桑蚕酚氧化酶原基因cDNA序列设计特异引物,用半定量RT-PCR方法检测了家蚕和野桑蚕各组织中酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)的表达谱,发现该基因在家蚕和野桑蚕组织中的表达差异较大,且具有明显的组织特异性。家蚕PPO1基因只在血液中被检出有很高的表达,而野桑蚕PPO1基因在血液和头部中均有表达,且在血液中的表达量最高;PPO2基因在家蚕组织中的表达量从高至低顺序为血液、脂肪体、卵巢、头部、表皮、精巢、中肠和丝腺,而在野桑蚕组织中的表达量从高至低顺序为血液、头部、中肠、表皮、精巢、卵巢和脂肪体,在丝腺中没有被检出有表达。推测可能是由于起源于野桑蚕的家蚕在长期的驯化及人工选择过程中引起了酚氧化酶原基因功能的变化。
- 张永亮朱勇
- 关键词:家蚕野桑蚕组织表达谱半定量RT-PCR
- 野桑蚕酚氧化酶原基因cDNA的分子克隆及其特征(英文)被引量:2
- 2008年
- 酚氧化酶在昆虫的免疫防御机制中起着重要作用。利用RT-PCR和RACE方法,克隆了野桑蚕酚氧化酶原基因,获得了其cDNA序列。该序列长2 134 bp,含有一个2 082 bp的完整开放阅读框,编码一个由693个氨基酸残基组成的蛋白质。推导的氨基酸序列与其他鳞翅目昆虫PPO2基因相应氨基酸序列有较高的同源性,该序列具有它们的PPO基因所共有的典型特征。组织特异性表达分析表明了该基因在野桑蚕5龄幼虫的血细胞、体壁、头部、精巢、卵巢、脂肪体和中肠等组织及其不同的发育阶段均有表达。这些结果为进一步研究野桑蚕酚氧化酶原基因的功能提供了分子基础。
- 张永亮黄重李志清张春冬朱勇
- 关键词:野桑蚕克隆
- 家蚕含染色质域基因Bm-msl3的克隆和转录活性检测
- 2007年
- 染色质域是从酵母到哺乳动物的真核生物中普遍存在的一个保守的基因元件,参与染色质重组和基因表达调节。根据NCB I登录的果蝇和人的MSL3序列以及家蚕的基因组与EST数据库克隆了家蚕含染色质域的基因Bm-msl3(GenBank登陆号:DQ887343)。该基因mRNA序列全长2 356 bp,在2 168 bp处有1个AAATATTA加尾信号,基因的编码区长1 665 bp,包括13个外显子。推定的蛋白质编码554个氨基酸,序列的N端含有一个保守染色质域。RT-PCR检测表明该基因在所调查的家蚕发育时期和组织中均有表达。
- 孔卫青杨金宏艾均文朱勇
- 关键词:家蚕转录活性
- 几种抑制剂和金属离子对桑尺蠖多酚氧化酶活性的影响(英文)
- 2011年
- 为给开发环境友好型生物杀虫剂奠定基础,采用分光光度法检测了几种抑制剂和金属离子对桑尺蠖(Phthonandria atrineata)多酚氧化酶活性的影响。结果表明:槲皮素和硫脲对该酶的抑制浓度(IC50)分别为0.036 mmol/L和0.12 mmol/L,Cu2+和Zn2+对该酶有强烈的抑制作用,而Ca2+和Mg2+有激活作用。
- 张永亮朱勇
- 关键词:桑尺蠖多酚氧化酶抑制剂金属离子