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温州市科技计划项目(Y20090097)
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小鼠PMX-IRES-Wnt5a逆转录病毒载体的构建及在3T3细胞中的表达
2012年
目的构建小鼠Wnt-5a逆转录病毒载体,观察Wnt-5a在3T3细胞的表达情况。方法采用同源重组技术将小鼠Wnt-5a插入逆转录病毒载体PMX-IRES-GFP,构建PMX-IRES-Wnt5a重组质粒,利用脂质体转染3T3细胞,RT-PCR检测Wnt-5a mRNA表达情况,Western-Bloting检测Wnt-5a蛋白表达情况。结果经限制性内切酶证实成功构建了携带Wnt-5a基因的逆转录病毒载体PMX-IRES-Wnt5a,RT-PCR检测结果显示Wnt-5a在转染的3T3细胞的表达明显增高。结论成功构建Wnt-5a逆转录病毒载体,并能在3T3细胞成功表达Wnt-5a。
严春
刘彩霞
闫绍荣
李强
林森
吴文兵
吴礼峰
陈炯
关键词:
WNT-5A
逆转录病毒载体
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