美国中华医学基金(99698)
- 作品数：10 被引量：50H指数：5
- 相关作者：张广森裴敏飞李斌戴崇文夏梦更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅二医院江西医学院南昌市第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 选择性COX-2抑制剂celecoxib对K562细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用和分子机制被引量：22
- 2004年
- 环氧化酶 (cyclooxygenase,COX)家系被显示与恶性肿瘤的增殖和凋亡耐受有关 ,COX 2可作为恶性肿瘤治疗和预防的重要分子靶标 .应用COX 2特异抑制剂———celecoxib ,观察了药物对人慢性粒细胞白血病急变细胞株———K5 6 2细胞的增殖抑制和凋亡诱导效应 .结果证明 ,celecoxib能够有效地抑制K5 6 2细胞增殖 (台盼蓝染色 ,MTT试验及集落形成抑制试验证实 ) ,并呈一定的剂量依赖性 .Celecoxib抑制K5 6 2细胞增殖的IC50 为 4 6 μmol/L .通过DNAladder胶电泳和流式细胞仪检测 ,凋亡细胞的AO/EB染色等方法证明celecoxib能够诱导K5 6 2细胞凋亡 ,这一效应与Caspase 3蛋白表达上调和裂解激活有关 ,当阻断Caspase 3的活性 ,celecoxib诱导的K5 6 2细胞凋亡明显受抑 .利用RT PCR分析技术及蛋白质印迹 ,证明K5 6 2细胞存在COX 2mRNA和COX 2蛋白表达 ;而且 ,K5 6 2细胞COX 2蛋白表达可被IL 1β诱导性刺激 ,从而确认K5 6 2细胞为COX 2表达阳性细胞 ;celecoxib在较高浓度 (80～16 0 μmol/L)既可抑制K5 6 2细胞COX 2mRNA表达 ,也可下调COX 2蛋白质表达 ,提示celecoxib抗K5 6 2白血病细胞活性与COX 2的抑制相关 ,其抗白血病的分子机制部分涉及到COX
- 张广森刘定胜
- 吲哚美辛抑制髓系白血病细胞增殖机制的研究被引量：7
- 2004年
- 目的 探讨吲哚美辛 (IN)抗慢性髓系白血病 (CML)细胞增殖的作用机制。方法 用MTT法分析IN对慢性髓系白血病细胞系K5 6 2及CML患者骨髓细胞活力的影响 ;Westernblot分析CML细胞信号转导和转录活化蛋白 (STAT) 1、STAT5表达 ;免疫共沉淀 /Westernblot分析IN干预后CML细胞磷酸化的STAT1(p STAT1)和STAT5 (p STAT5 )表达 ,间接免疫荧光技术观察p STAT1和p STAT5在CML细胞中的分布及变化 ;Westernblot检测IN干预前后Bcl XL 及环氧化酶 2 (COX 2 )蛋白的表达。结果 IN可显著抑制CML细胞活力 ;4 0 0 μmol/LIN作用 72h ,CML细胞抑制率为 86 % ;0～ 4 0 0 μmol/LIN呈剂量反应性抑制p STAT1、p STAT5表达 ;p STAT主要呈散点状分布于胞核中 ;Bcl XL 蛋白呈IN浓度依赖性表达下调 ;K5 6 2细胞存在COX 2蛋白表达 ,IN可抑制COX 2蛋白表达。结论 IN可明显抑制CML细胞增殖 ;其机制可能与药物抑制STAT/Bcl XL 信号转导途径有关 ;K5 6 2细胞存在COX 2蛋白表达 ,IN的抗白血病细胞增殖效应可能是通过COX 2依赖性途径实现的。
- 张广森扶云碧夏梦
- 关键词：CMLSTAT1细胞增殖COX-2蛋白细胞信号转导
- 赛莱昔布对K562细胞的增殖抑制作用与细胞G_1/S期受阻及细胞周期蛋白表达的相关性被引量：6
- 2005年
- 刘定胜张广森
- 关键词：K562细胞增殖抑制作用细胞周期蛋白抗肿瘤作用
- 高嗜酸性粒细胞综合征FIP1L1-PDGFRA融合基因和转录活化因子5蛋白检测被引量：7
- 2004年
- 目的 确定高嗜酸性粒细胞综合征 (HES)患者是否存在FIP1L1 PDGFRA融合基因 ,分析该融合基因与HES临床表型之间的关系 ;观察并揭示信号转导及转录活化因子 5 (STAT5)在HES患者粒细胞中的表达及意义。方法 HES根据Chusid标准诊断 ,抽提患者粒细胞总RNA并逆转录为cDNA ,再用筑巢式聚合酶链反应扩增目的基因 ;对阳性PCR产物进行直接核苷酸测序 ;用Western印迹技术对HES患者粒细胞中的STAT5进行检测。结果 4例HES中的 3例存在异常的FIP1L1 PDGFRA融合基因 ,融合基因在PDGFRA基因上的断裂点均位于 12号外显子 ;而在FIP1L1基因上的断点易变 ,分别位于 8a号外显子 ,8a号内含子和 8号外显子。具有FIP1L1重排者似乎容易出现心脏受累并发症。有FIP1L1 PDGFRA融合基因的 3例HES患者STAT5的表达显著上调 ,而 1例FIP1L1 PDGFRA阴性者则无STAT5表达。结论 FIP1L1 PDGFRA融合基因对于HES具有普遍性意义 ,FIP1L1 PDGFRA基因鉴定不仅可作为HES诊断的分子标志和格列卫治疗的分子靶标 ;而且 。
- 张广森李斌裴敏飞戴崇文郑文莉申建凯
- 关键词：HES高嗜酸性粒细胞综合征转录活化因子STAT内含子
- Celecoxib对羟基脲抗K562细胞增殖作用的增敏效应和机制被引量：3
- 2004年
- 目的 :确定celecoxib对羟基脲的抗K5 6 2细胞增殖作用是否存在增敏效应并探讨其分子机制。方法 :用低剂量celecoxib(4 0 μmol/L)、羟基脲 (10mmol/L)以及二者合用分别干预K5 6 2细胞 ,用MTT试验、DNA裂解片段分析、Western印迹及RT PCR技术分析药物对K5 6 2细胞增殖、凋亡的影响和机制。结果 :4 0 μmol/Lcelecoxib与10mmol/L羟基脲共同干预K5 6 2细胞 ,较之单用低剂量的Celecoxib或羟基脲抑制K5 6 2细胞增殖活力和诱导细胞凋亡效应更明显。Celecoxib联合羟基脲可明显抑制K5 6 2细胞环氧化酶 2 (COX 2 )蛋白和mRNA表达。结论 :Cele coxib对羟基脲的抗K5 6 2细胞增殖作用具有增敏效应 ,其机制可能与药物下调K5 6 2细胞COX
- 刘定胜张广森
- 关键词：羟基脲增殖作用RT-PCR技术
- 高嗜酸性粒细胞综合征患者粒细胞JAK/STAT信号转导途径的激活及对甲磺酸伊马替尼的治疗反应被引量：8
- 2005年
- 目的确定高嗜酸性粒细胞综合征(HES)是否存在Janus酪氨酸激酶/信号传导与转录激活因子(JAK/STAT)信号途径的激活;进一步揭示HES的发病机制,并动态观察1例HES患者对甲磺酸伊马替尼(格列卫)治疗的临床反应及JAK/STAT蛋白质和FIP1L1 PDGFRA融合基因的变化。方法用Western印迹技术检测4例HES患者(3例FIP1L1 PDGRA阳性, 1例阴性),患者粒细胞中JAK2、STAT3及磷酸化STAT5(P STAT5)蛋白质表达水平;对1例FIP1L1 PDGFRA融合基因阳性的HES患者口服小剂量格列卫治疗,用逆转录(RT) 筑巢聚合酶链反应(PCR)及Western印迹技术动态检测格列卫治疗前、治疗后10、30、60d患者粒细胞的FIP1L1 PDGFRA融合基因及JAK2、STAT3、STAT5及P STAT5的表达。结果FIP1L1 PDGFRA融合基因阳性的3例HES患者均有JAK2,STAT3及P STAT5蛋白质表达的显著上调;而1例FIP1L1 PDGFRA阴性的HES患者上述蛋白表达几乎阴性。其中1例FIP1L1 PDGFRA( +)的HES患者服用小剂量格列卫治疗后,达到持续性血液学缓解(血象及嗜酸性粒细胞比例恢复正常,症状体征消失);服药30d后FIP1L1 PDGFRA融合基因的表达量明显减低, 60d后融合基因表达阴性;JAK2、STAT3、STAT5及P STAT5蛋白质表达呈时间依赖性下调, 60d后表达均阴性。结论HES患者粒细胞存在JAK/STAT信号途径的过?
- 李斌张广森戴崇文裴敏飞
- 关键词：HES格列卫信号途径蛋白质表达信号转导途径
- 吲哚美辛诱导的HL-60白血病细胞凋亡与JNK信号转导途径活化被引量：3
- 2003年
- 目的 :观察吲哚美辛对HL 6 0白血病细胞增殖的抑制作用及细胞凋亡的诱导作用 ,了解C JunN 末端激酶 (JNK)信号转导途径在介导吲哚美辛诱导的HL 6 0细胞凋亡中的活化状态 ,揭示吲哚美辛诱导HL 6 0细胞凋亡的分子机制。方法 :以台盼蓝染色检测药物干预后的HL 6 0细胞活力 ;分析HL 6 0细胞的增殖能力 ;DNA梯状胶电泳及吖啶橙 /溴化乙锭染色形态学分析鉴定细胞凋亡 ;Western印迹检测凋亡信号蛋白caspase 9, 3和PARP的裂解激活以及JNK信号途径蛋白质MEK4 ,JNK ,P JNK ,P C Jun的表达及活化状态。结果 :2 0 0～ 4 0 0 μmol的吲哚美辛能够显著抑制HL 6 0细胞增殖和诱导HL 6 0白血病细胞凋亡 ,并呈浓度和时间依赖性 ;HL 6 0细胞凋亡伴有caspase 9,3和PARP的表达上调及裂解激活 ;MEK4蛋白表达呈浓度依赖性上调 ;磷酸化JNK和磷酸化C Jun呈浓度依赖性上调。结论 :吲哚美辛可抑制HL 6 0细胞增殖和诱导细胞凋亡 ;JNK信号途径活化介导了吲哚美辛诱导的凋亡。JNK途径的活化导致了下游caspase途径的活化。
- 张广森刘定胜夏梦王兆一
- 关键词：HL-60细胞凋亡
- 急性白血病视网膜母细胞瘤相关蛋白46基因和蛋白表达谱的变化及意义
- 2005年
- 目的探讨急性白血病(AL)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)视网膜母细胞瘤相关蛋白46(RbAp46)蛋白和基因表达状态,揭示RbAp46表达与AL类型及预后的可能联系。方法用Western印迹技术检测46例AL患者BMMNCRbAp46蛋白表达量;用RTPCR方法扩增22例AL患者BMMNCRbAp46mRNA的表达并进行半定量检测;用间接免疫荧光技术观察RbAp46蛋白在BMMNC的表达和分布。结果①AL患者BMMNC存在RbAp46蛋白和mRNA表达,表达强度与白血病类型无关。②肿瘤重度负荷组的AL患者BMMNC表达RbAp46蛋白的平均吸光度(A)值为93.4±37.2,明显低于肿瘤轻度负荷组的127.2±15.8(P<0.05)。③难治性白血病患者BMMNCRbAp46蛋白表达的平均A值为87.1±33.8,明显低于非难治性白血病组的126.6±21.2(P<0.05)。④肿瘤重度负荷组AL患者BMMNCRbAp46mRNA的相对表达量为0.19±0.08,明显低于肿瘤轻度负荷组的0.31±0.12(P<0.05)。⑤AL和对照组患者BMMNC均存在RbAp46蛋白的原位表达;RbAp46蛋白主要分布在细胞核中。结论AL患者BMMNC存在RbAp46蛋白和mRNA表达,该表达在肿瘤负荷重的AL和难治性白血病患者显著降低,提示RbAp46可能是白血病细胞生长的抑制基因。
- 周吉成张广森
- 关键词：表达量相关蛋白难治性白血病视网膜母细胞瘤基因细胞核
- 多重PCRSSCP快速检测因子Ⅸ基因突变被引量：1
- 2002年
- 曹星玉陈方平解勤之蹇在伏王光平
- 关键词：血友病B
- 双色荧光原位杂交检测c-erbB-2基因扩增及应用
- 2000年
- 张广森肖乐陈永恒周见远张新民
- 关键词：胃癌C-ERBB-2基因基因扩增双色荧光原位杂交
