国家自然科学基金(30870522)
- 作品数：7 被引量：59H指数：4
- 相关作者：王华芹张海燕邓娓娓都镇先刘宝琴更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院右江民族医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科技厅科技攻关项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰腺癌细胞凋亡伴随胱天蛋白酶依赖性BAG3蛋白剪切的研究被引量：6
- 2011年
- 目的:前期研究表明,蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡时伴随抗凋亡蛋白BAG3的剪切。本研究探讨BAG3蛋白剪切是否为细胞凋亡伴随的普遍现象。方法:选取人胰腺癌细胞SW1990和PANC1,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132单独或与z-VAD联合处理组、星形孢菌素(STS)单独或与z-VAD联合处理组、依托泊苷单独或与z-VAD联合处理组、TNFα单独或与z-VAD联合处理组以及紫外线单独照射或与z-VAD联合处理组;利用蛋白质印迹法检测各组细胞中BAG3蛋白的剪切情况;利用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:与甲状腺癌细胞类似,蛋白酶体抑制剂MG132诱导胰腺癌细胞凋亡的同时,伴随BAG3蛋白的剪切;其他凋亡诱导剂如依托泊苷、星形孢菌素和紫外线照射在诱导胰腺癌细胞凋亡的同时,也可诱导BAG3蛋白剪切体的出现;而广谱胱天蛋白酶抑制剂z-VAD可以完全抑制BAG3蛋白的剪切。结论:胱天蛋白酶依赖性BAG3蛋白的剪切可能是细胞凋亡时的普遍现象,BAG3可能为胱天蛋白酶作用底物。
- 高雁艳刘宝琴牛小芳庄颖王华芹
- 关键词：胰腺肿瘤半胱氨酸内肽酶类细胞凋亡剪切
- Caspase介导的BAG3剪切在MG132诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨Bcl-2相关抗凋亡基因3(BAG3)在蛋白酶体抑制剂MG132诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法:根据对蛋白酶体抑制剂敏感程度高低,选取2种人甲状腺未分化癌细胞系FRO和ARO,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组、Pancaspase抑制剂Z-VAD-FMK处理组及MG132+Z-VAD-FMK联合组,按不同时段处理细胞;利用实时定量RT-PCR法检测各组细胞BAG3 mRNA表达及MG132诱导其表达时效性,蛋白质印迹法检测各组细胞BAG3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:与空白对照组相比,在MG132诱导作用下,2种细胞中BAG3 mRNA表达呈相似程度的增加,具有浓度依赖效应(ARO:F=278.93,P=0.000;FRO:F=410.56,P=0.000),并随作用时间呈现时效性(ARO:F=198.67,P=0.000;FRO:F=174.43,P=0.000);在ARO细胞中,BAG3蛋白表达也呈剂量依赖诱导效应,但各浓度组间细胞凋亡率差异无统计学意义,P>0.05;而在FRO细胞中,随MG132浓度增加,发现大量40×103BAG3剪切片断,其细胞凋亡率亦随之增加,呈剂量依赖效应,在MG132+Z-VAD-FMK联合组中BAG3蛋白显著增加,40×103BAG3剪切片断消失。结论:蛋白酶体抑制剂MG132可诱导上调2种甲状腺癌细胞中BAG3基因表达,在蛋白酶体抑制剂敏感细胞中,随着细胞凋亡增加出现BAG3蛋白的剪切,这一效应可能依赖Caspase介导完成。
- 解继胜贾雪欢张海燕都镇先邓娓娓刘国良
- 关键词：基因,BCL-2半胱氨酸蛋白酶抑制剂细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 微小RNA干扰Bcl-2相关抗凋亡基因2抑制蛋白酶体抑制剂对甲状腺癌细胞凋亡诱导作用的研究被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨微小RNA干扰Bcl-2相关抗凋亡基因2(BAG2)对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用的影响。方法:选取人甲状腺未分化癌细胞系FRO,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组、特异性siBAG2组和随机序列核酸siRNA组;利用微小RNA干扰技术降低BAG2的表达;采用RT-PCR法、蛋白质印迹法分别检测各组细胞BAG2mR-NA及蛋白表达;采用分光光度法测定Caspases-3活性;采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:与空白对照组相比,MG132显著增加FRO细胞系中BAG2基因表达水平(P<0.01),并呈时间依赖效应;与空白对照组和随机序列核酸siR-NA组相比,siBAG2处理组中BAG2mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),其凋亡率及Caspases-3活性显著降低,P<0.01。结论:蛋白酶体抑制剂能够上调甲状腺未分化癌细胞系FRO中BAG2基因的表达水平,siBAG2具有特异性降低BAG2基因表达的作用,同时抑制蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用。
- 都镇先张海燕邓娓娓王华芹
- 关键词：甲状腺肿瘤蛋白酶体抑制剂
- DJ-1在甲状腺癌中的表达及意义被引量：5
- 2010年
- 目的探讨癌基因DJ-1在甲状腺癌中的表达效应及其意义。方法采用免疫组织化学方法 (SABC法)检测74例甲状腺癌和10例正常甲状腺组织中DJ-1蛋白的表达,分析DJ-1蛋白在正常甲状腺组织与甲状腺癌之间的表达差异,以及4种甲状腺癌病理类型间的表达差异。结果 DJ-1在正常甲状腺组织中未见表达,而在甲状腺癌中呈显著表达(94.6%);33例乳头状癌中DJ-1全部呈阳性表达(100.0%),19例滤泡癌中有17例呈阳性表达(89.5%),13例髓样癌中有12例呈阳性表达(92.3%),9例未分化癌中有8例呈阳性表达(88.9%)。DJ-1表达水平在甲状腺癌不同病理类型间比较未见统计学差异(P>0.05)。结论癌基因DJ-1特异性表达于甲状腺癌组织中,可能参与甲状腺癌的发生,但与其发展及预后无关。
- 李海张海燕都镇先邓娓娓
- 关键词：甲状腺癌DJ-1癌基因
- 衣霉素抑制细胞周期蛋白D1表达而强化TRAIL诱发凋亡的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合衣霉素促甲状腺未分化癌细胞株凋亡的作用机制。方法通过单用TRAIL(TRAIL组)、衣霉素(衣霉素组)、联合用药组(TRAIL+衣霉素组)对多种甲状腺未分化癌细胞株进行作用,并以正常甲状腺上皮细胞株HTori-3作对照,利用流式细胞仪分析各组细胞周期变化及各组细胞凋亡状态;采用蛋白印迹杂交法检测衣霉素处理前后各组细胞细胞周期蛋白D1蛋白表达水平;利用微小RNA干扰技术及质粒转染技术探讨细胞周期蛋白D1对依霉素增敏TRAIL效应的影响。结果 TRAIL与衣霉素单用对甲状腺癌细胞均无明显杀伤作用,最高细胞凋亡率分别为10.68%、10.14%;联合用药组细胞凋亡率最大达54.77%,与TRAIL组和衣霉素组相比,具有统计学差异(P<0.05)。与对照组相比,衣霉素组和联合用药组细胞周期蛋白D1水平明显降低。微小RNA干扰可以特异性下调细胞周期蛋白D1进而增加ARO细胞对TRAIL的敏感性;而细胞周期蛋白D1过表达ARO细胞中细胞凋亡率降低22.7%。结论在体外单用TRAIL对甲状腺癌细胞增殖无明显抑制作用,衣霉素明显增加肿瘤细胞对TRAIL敏感性,其增敏机制至少部分与下调细胞周期蛋白D1水平有关。
- 解继胜张海燕都镇先邓娓娓王华芹
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体衣霉素
- 内质网应激与未折叠蛋白反应的研究进展被引量：40
- 2010年
- 目的:总结内质网应激与未折叠蛋白反应的国内外研究进展,阐述其分子机制和内质网应激相关性的细胞存活及凋亡途径。方法:应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,以"内质网应激、未折叠蛋白反应、凋亡"为关键词,检索1990-01-2010-01相关内质网应激与未折叠蛋白反应等文献,最后纳入分析24篇。结果:内质网是真核细胞中重要的细胞器,是新合成跨膜蛋白和分泌蛋白折叠与成熟的加工厂。未折叠或错误折叠蛋白在内质网大量蓄积可以导致内质网应激,激活未折叠蛋白反应。未折叠蛋白反应是一种保守性细胞自我保护性措施,通过促进内质网对蓄积在网腔内的错误折叠或未折叠蛋白质的处理,使细胞功能恢复正常并使之存活;但是,过强或者持续时间过久的内质网应激可引起细胞凋亡。结论:内质网应激与未折叠蛋白反应的分子机制已比较清楚,但仍存在问题需进一步研究。
- 刘宝琴王华芹
- 关键词：内质网应激未折叠蛋白反应细胞凋亡
- Bcl-2相关抗凋亡基因3对蛋白酶体抑制剂抗肿瘤作用影响的观察被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨Bcl-2相关抗凋亡基因3(Bcl-2-associated athanogene3,BAG3)在蛋白酶体抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡中的作用。方法:选取不同组织来源的人肿瘤细胞系,分别设空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组、衣霉素处理组及特异性siBAG3、随机序列核酸si RNA和错位型siBAG3组;利用实时定量RT-PCR法检测各组细胞BAG3及葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)mRNA表达;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡。结果:与空白对照组相比,MG132能显著增加有关细胞BAG3基因表达水平(P<0.01);而衣霉素处理组细胞BAG3表达变化差异无统计学意义,P>0.05,但明显增加GRP78表达(P<0.01);siBAG3组细胞BAG3表达水平显著低于随机序列核酸si RNA和si mut-BAG3组(P<0.01),siBAG3组细胞凋亡率差异有统计学意义,P<0.01。结论:BAG3是影响蛋白酶体抑制剂凋亡效应的一类破坏因子,下调其表达有望增加蛋白酶体抑制剂抗肿瘤活性。
- 张海燕高雁艳刘宝琴邓娓娓刘国良王华芹
- 关键词：基因,BCL-2酶抑制剂
