国家自然科学基金(30500193)
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
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- CCK-8对KLH免疫小鼠脾细胞Th1／Th2平衡的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对Th1/Th2平衡的调节作用。方法:给予BALB/c小鼠钥孔戚血蓝蛋白(KLH)免疫同时体内给予不同剂量的CCK-8,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其脾细胞培养上清中Th1型细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)水平,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测脾细胞中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5 mRNA表达;ELISA法检测血清中Th1型抗KLH抗体IgG2a和Th2型抗KLH抗体IgG1水平。结果:①KLH免疫使小鼠脾细胞分泌Th1/Th2型细胞因子水平明显增高,mRNA表达增高,KLH免疫同时给予CCK-8可使脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-2含量进一步增加和IFN-γ、IL-2 mRNA表达增高,而使IL-4、IL-5含量降低,IL-4、IL-5 mRNA表达减低和降低IL-4/IFN-γ比值。②KLH免疫小鼠血清中IgG2a、IgG1发生不同程度增高,CCK-8可使其血清中IgG1水平减低而使IgG2a水平增高。结论:CCK-8可促进KLH免疫小鼠体内Th1反应,使Th2优势反应向Th1方向转变。
- 宋宁李淑瑾丛斌魏春华丛军倪志宇马春玲姚玉霞于峰
- 关键词：胆囊收缩素TH1/TH2
- CCK-8对LPS作用下巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激功能的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对LPS活化的巨噬细胞B7．1和B7．2表达及其协同刺激功能的影响。方法用CCK-8（10^-12～10^-6）mol·L^-1和（或）脂多糖（LPS）孵育小鼠腹腔巨噬细胞，采用流式细胞术分析细胞表面B7．1和B7．2含量的变化，用免疫磁珠从小鼠脾细胞分离CD4^＋T细胞，按4：1数量比与腹腔巨噬细胞[预先用LPS、CCK-8和（或）抗B7．1抗体、抗B7．2抗体、CCK1R拮抗剂CR1409、CCK2R拮抗剂CR2945孵育24h]共同体外培养，同时加入ConA5mg·L^-1，采用^3H参入法测定CD4^＋T细胞增殖反映巨噬细胞的协同刺激活性。结果CCK-8可以下调LPS诱导的巨噬细胞的B7．1和B7．2表达，抑制LPS活化的巨噬细胞的协同刺激活性。CCK-8的作用呈剂量依赖性，最大效应剂量在（10^-7-10^-9）mol·L^-1之间。CR1409及CR2945均能逆转CCK-8的上述作用，且CR1409的作用较CR2945更明显。抗B7．1抗体和抗B7．2抗体可减轻LPS活化的巨噬细胞协同刺激活性。结论CCK-8通过下调LPS诱导的巨噬细胞B7．1和B7．2表达而抑制其协同刺激活性，该作用由CCK1R及CCK2R介导，其中CCK1R起主要介导作用。
- 张风华李淑瑾丛斌张正茂朱桂军马春玲丛军刘宁倪志宇付丽红
- 关键词：CCK-8B7.1B7.2LPS巨噬细胞
- CCK-8上调小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2表达并增强其协同刺激活性被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对静息巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激功能的影响。方法:用CCK-8(10-12-10-6mol/L)孵育小鼠腹腔巨噬细胞一定时间,采用流式细胞术分析细胞表面B7.1和B7.2含量的变化。用免疫磁珠从小鼠脾细胞分离CD4+T细胞,按4∶1数量比与腹腔巨噬细胞(预先用CCK-8和/或抗B7.1抗体、抗B7.2抗体、CCK1R拮抗剂CR1409、CCK2R拮抗剂CR2945孵育24 h)共同体外培养,同时加入ConA 5 mg/L,采用[3H]掺入法测定CD4+T细胞增殖反映巨噬细胞的协同刺激活性。结果:CCK-8可上调静息巨噬细胞B7.1及B7.2的表达,并增强巨噬细胞的协同刺激活性。CCK-8的作用呈剂量依赖性,最大效应剂量是在10-9-10-7mol/L之间。抗B7.2抗体可减轻CCK-8增强巨噬细胞协同刺激活性的作用,CR1409及CR2945均能逆转CCK-8的上述作用,且CR1409的作用较CR2945更明显。结论:CCK-8通过上调巨噬细胞B7.2表达而增强其协同刺激活性,该作用由CCK1R及CCK2R介导,其中CCK1R起主要介导作用。
- 张风华李淑瑾丛斌张正茂朱桂军马春玲丛军刘宁倪志宇付丽红
- 关键词：巨噬细胞胆囊收缩素
- 钥孔戚血蓝蛋白诱导Balb/C小鼠脾细胞Th1/Th2失衡(英文)
- 2008年
- 背景:建立具有一定特征的、稳定的、可重复性强的Th1/Th2失衡动物模型是研究Th1/Th2失衡机制的重要基础。目的:分析钥孔戚血蓝蛋白诱导Balb/C小鼠脾细胞Th1/Th2失衡的特点。设计:随机对照探索性实验。单位:河北医科大学基础医学院河北省法医学实验室。材料:实验于2005-09/2007-02在河北医科大学基础医学院河北省法医学实验室完成。实验选用Balb/c小鼠,对动物处置方法符合动物伦理学要求。方法:①以钥孔戚血蓝蛋白+完全弗氏佐剂免疫Balb/C小鼠,分离脾细胞,细胞因子分泌高峰点测定实验分为3组,分别为钥孔戚血蓝蛋白6.25,12.5,25mg/kg组;不同免疫剂量和免疫次数实验分为7组,分别为钥孔戚血蓝蛋白6.25,12.5,25mg/kg组,6.25,12.5,25mg/kg二次免疫组及对照组。主要观察指标:以酶联免疫吸附法检测小鼠脾细胞培养上清中Th1型细胞因子γ-干扰素、白细胞介素2、白细胞介素12p40及Th2型细胞因子白细胞介素4、白细胞介素5的分泌量及血清中Th1型抗体IgG2a和Th2型抗体IgG1水平。结果:①钥孔戚血蓝蛋白免疫使小鼠出现脾肿大,脾细胞计数增高。②体外同种抗原再刺激使免疫小鼠脾细胞培养上清中4种细胞因子浓度增高,其中白细胞介素2分泌量于24h即明显增高,48h达高峰;白细胞介素4、γ-干扰素和白细胞介素5在24h轻度增高,以后逐渐上升,96h达高峰。各时间点培养上清中白细胞介素12p40含量均较低,与对照组无明显差异。③不同剂量单次或二次免疫均可致4种细胞因子不同程度增高,白细胞介素4/γ-干扰素比值增高,其中12.5mg/kg钥孔戚血蓝蛋白二次免疫组细胞因子分泌量明显高于其他各组(P<0.01)。④钥孔戚血蓝蛋白免疫小鼠血清IgG1,IgG2a水平发生不同程度增高,其中IgG1增高更为明显。结论:钥孔戚血蓝蛋白加完全弗氏佐剂可诱导Balb/C小鼠脾细胞发生Th2型优势反应。
- 宋宁李淑瑾丛斌魏春华丛军倪志宇马春玲姚玉霞于峰
- 关键词：淋巴细胞亚群移植免疫
- 钥孔戚血蓝蛋白诱导Balb/c小鼠脾细胞Th1/Th2失衡的研究
- 2008年
- 目的探讨钥孔戚血蓝蛋白(KLH)诱导Balb/c小鼠脾细胞Th1/Th2失衡的特点,为药物干预Th1/Th2失衡奠定基础。方法以KLH(完全弗氏佐剂(CFA)免疫Balb/C小鼠并分离其脾细胞,ELISA法检测脾细胞上清中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12p40和Th2型细胞因子IL-4、IL-5,以及血清Th1型抗体IgG2a和Th2型抗体IgG1水平。结果①免疫小鼠出现脾肿大、脾细胞计数升高。②免疫小鼠脾细胞IL-2于24 h明显升高,48 h达高峰;IL-4、IFN-γ和IL-5于24 h轻度升高,96 h达高峰;各时间点IL-12p40均较低。③不同剂量基础或强化免疫均可致细胞因子升高,IL-4/IFN-γ升高。④免疫小鼠血清IgG1、IgG2a升高,以IgG1明显。结论KLH+CFA可诱导Balb/c小鼠脾细胞发生Th2型优势反应。
- 宋宁李淑瑾丛斌魏春华丛军倪志宇
- 关键词：BALB/C小鼠TH1/TH2
- CCK-8对内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7．1和B7．2表达及协同刺激功能的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2表达及其协同刺激活性的影响。方法:将BALB/c小鼠随机分组(n=4),分别腹腔注射生理盐水(0.2-0.3 mL/mouse),LPS(100μg/mouse)和/或CCK-8(5 nmol/mouse)及CR1409(100μg/mouse)、CR2945(100μg/mouse)。12 h后收集并纯化腹腔巨噬细胞。采用流式细胞术分析细胞表面B7.1和B7.2含量的变化。用免疫磁珠从小鼠脾细胞分离CD4+T细胞,按4∶1数量比与上述处理的腹腔巨噬细胞共同体外培养,同时加入ConA5 mg/L,采用[3H]掺入法测定CD4+T细胞增殖,反映巨噬细胞的协同刺激活性。结果:整体应用CCK-8作用小鼠腹腔巨噬细胞,与对照组相比,CCK-8可上调静息小鼠腹腔巨噬细胞B7.2的表达,而对B7.1的表达则无影响;并且CCK-8使CD4+T细胞[3H]-TdR的掺入率升高,即促进其增殖,增强巨噬细胞的协同刺激活性。CCK-8降低LPS活化的内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2的表达并且降低CD4+T细胞的[3H]-TdR掺入率,即抑制其增殖,抑制其协同刺激活性。CR1409及CR2945均能逆转CCK-8的上述作用,且CR1409的作用较CR2945更明显。结论:CCK-8通过上调巨噬细胞B7.2表达而增强其协同刺激活性;并且降低LPS活化的内毒素血症小鼠腹腔巨噬细胞B7.1和B7.2的表达,抑制其协同刺激活性。该作用由CCK1R及CCK2R共同介导,其中CCK1R起主要介导作用。
- 张风华李淑瑾丛斌张正茂朱桂军丛军马春玲倪志宇付丽红
- 关键词：胆囊收缩素内毒素血症
- 八肽胆囊收缩素对经钥孔戚血蓝蛋白免疫小鼠T淋巴细胞亚群的影响被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对经钥孔戚血蓝蛋白(KLH)免疫小鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法:雌性BALB/c小鼠KLH免疫同时分别给予不同剂量CCK-8。流式细胞法检测小鼠外周血及脾细胞中CD4+、CD8+T细胞阳性百分率;RT-PCR法检测脾细胞中Th1型细胞因子IFN-γ、Th2型细胞因子IL-4 mRNA表达;ELISA法检测其培养上清中IFN-γ、IL-4水平;HE染色观察小鼠肺组织病理变化。结果:CCK-8下调KLH免疫小鼠外周血及脾细胞中上升的CD4+、CD8+T细胞阳性百分率,降低CD4+/CD8+比值;进一步提高其IFN-γ mRNA表达和培养上清中IFN-γ分泌量,同时下调上升的IL-4 mRNA表达和培养上清中IL-4分泌量;减轻KLH免疫所致小鼠肺部炎症。结论:CCK-8可调节适应性免疫应答,抑制T细胞尤其是CD4+T细胞活性;抑制Th2功能,提高Th1功能,因此可能在变态反应性疾病的发病和防治中具有一定作用。
- 宋宁李淑瑾丛斌魏春华丛军张风华马春玲倪志宇姚玉霞
- 关键词：胆囊收缩素T淋巴细胞亚群
- 八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导小鼠分泌IL-12的影响及其机制研究被引量：2
- 2008年
- 目的:观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)对脂多糖诱导小鼠分泌IL-12的影响,探讨核因子-κB(NF-κB)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的信号转导作用。方法:雌性BALB/c小鼠经LPS诱导后分别给予CCK及CCK-A、B受体拮抗剂。ELISA法检测小鼠血清及肺、脾组织中IL-12p40、p70的表达;Western blot-ting法检测肺脏、脾脏IκB、p38 MAPK的表达;EMSA法检测肺、脾组织中NF-κB/DNA的结合活性。结果:CCK-8进一步提高了LPS诱导的小鼠血清及肺、脾组织中IL-12p40、p70的表达;抑制IκB磷酸化和NF-κB/DNA结合活性;促进p38 MAPK磷酸化。而CCK-A受体拮抗剂(CR-1409)及CCK-B受体拮抗剂(CR-2945)部分逆转了CCK-8的效应。结论:CCK-8可促进LPS诱导小鼠分泌IL-12,p38 MAPK可能参与了其信号转导机制,而NF-κB途径可能并未参与CCK-8促IL-12分泌这一过程。
- 魏春华李淑瑾丛斌宋宁姚玉霞马春玲倪志宇丛军
- 关键词：胆囊收缩素脂多糖类白细胞介素12
