国家自然科学基金(30500173)
- 作品数：7 被引量：64H指数：3
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- 相关机构：第二军医大学空军总医院上海第二医科大学附属新华医院更多>>
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- 心搏骤停后脑复苏研究的动物模型被引量：8
- 2007年
- 目的建立一种新型简便的心跳骤停后脑复苏研究的动物模型。方法选用清洁级雄性Sprague Dawley(SD)大鼠40只,采用窒息合并冰氯化钾停跳液致大鼠心跳骤停,5 min后开始心肺复苏。记录基本生命体征变化、发生循环停止时间(T_(CA))、自主循环恢复时间(T_(ROSC))、72 h存活率,复苏后不同时间点(3、6、12、24、48、72 h)神经功能评分(NDS),观察复苏后3 h和72 h透射电镜下皮层超微结构改变。结果造模后大鼠迅速发生循环停止,T_(CA)和T_(ROSC)分别为(137.3±10.2)s,(64.4±9.3)s,复苏成功率87.5%,72 h存活率为80%。NDS在复苏后3 h时最低,以后NDS渐趋好转。血浆丙二醛(MDA)水平显著升高,在72 h略有回降,但仍高于造模前(P<0.01)。电镜显示复苏后3 h脑损害最严重,72 h逐渐减轻。结论这一模型操作简单且结果稳定。
- 马宇洁杨兴易林兆奋张雷潘曙明
- 关键词：心跳骤停心肺复苏脑复苏动物模型
- 心肺复苏后大鼠血清神经元特异性烯醇化酶、S100β蛋白对脑损伤诊断的价值被引量：44
- 2006年
- 目的观察大鼠心肺复苏后血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S100β蛋白水平变化,确立CPR后脑损伤具有早期诊断价值的生化指标。方法选择成年雄性Sprague-Dawley大鼠50只,采用窒息合并冰氯化钾停跳液制备大鼠心跳骤停-心肺复苏模型。随机分为5组:对照组即假手术组10只,自主循环恢复(ROSC)后6、12、24、48h组各10只。停跳5min后开始心肺复苏,采用双抗体夹心酶联免疫分析法为对照组及ROSC后6、12、24、48h组进行动态观测血清中NSE、S100β蛋白水平变化。结果在ROSC后6、12、24、48h组的血液中NSE、S100β蛋白水平与对照组比较都有显著升高(P<0.05),但指标升高的时间和幅度并不一致。与对照组比较,血清NSE在24h时点、S100β蛋白在6h时点升高水平差异有极其显著性(P<0.01)。结论血清NSE、S100β蛋白水平可作为评价CPR后脑损伤具有早期诊断价值的指标。
- 马宇洁杨兴易林兆奋张雷
- 关键词：心肺复苏脑损伤神经元特异性烯醇化酶S100Β蛋白
- 心肺复苏后大鼠脑线粒体的能量代谢变化被引量：2
- 2010年
- 马宇洁杨兴易林兆奋缪明永张雷宁波李一粟刘涛刘磊
- 关键词：心肺复苏术能量代谢
- 心肺复苏后大鼠神经细胞Caspase-3表达与细胞凋亡关系的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨心肺复苏后大鼠脑组织Caspase-3表达与细胞凋亡的关系。方法建立窒息联合冰氯化钾致大鼠心脏骤停／心肺复苏（CA／CPR）的动物模型，于各时相点断头留取脑组织，采用免疫组化的方法观察CPR后脑组织Caspase-3蛋白的表达，TUNEL检测神经细胞凋亡。结果对照组脑组织内仅有少量TUNEL阳性细胞；ROSC后3h出现表达阳性细胞，ROSC后6h表达开始增多，ROSC后12h进一步上升（P〈0．05），其后各组均处于高水平表达。Caspase-3表达均在ROSC后24h显著增加，直至ROSC后72h，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01），Speamaa等级相关检验Caspase-3表达与细胞凋亡明显相关（r=0．909）。结论CA／CPR后大鼠脑线粒体Caspase-3蛋白高表达可能是细胞凋亡增加的原因之一。
- 马宇洁杨兴易林兆奋缪明永宁波
- 关键词：半胱天冬蛋白酶-3心脏骤停心肺复苏凋亡
- 大鼠心肺复苏后神经细胞线粒体通透性转换孔变化在细胞色素C释放中的作用被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨大鼠心肺复苏后神经细胞线粒体通透性转换孔（MPTP）变化在细胞色素C释放中的作用及可能机制.方法 以56只成年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠建立窒息加冰氯化钾致心搏骤停/心肺复苏（CA/CPR）动物模型,随机（随机数字法）分为7组,即假手术组、自主循环恢复（ROSC）后3 h,6 h,12 h,24 h,48 h,72 h组,每组8只,分别在各时相点断头处死大鼠,采用差速离心法分离制备大脑皮质内线粒体匀浆.采用分光光度法测定线粒体不同时相MPTP的开放程度,Western blot免疫杂交法检测线粒体细胞色素C释放（CytC）.采用SPSS 11.5 for Windows统计软件分析结果.结果 ROSC后6 h内神经细胞MPTP开放程度保持低水平,6 h以后开始迅速大量开放,12 h开放程度达到最大,24 h开放程度略有缩小,至48 h开放程度再次加大,72 h又明显缩小,与对照组相比较差异均具有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.正常脑组织线粒体CytC蛋白在相对分子质量14 000处出现一强阳性条带,而胞浆蛋白中CytC蛋白含量甚微,呈一弱阳性条带.ROSC后3 h线粒体CytC蛋白未见显著变化,而胞浆成分中开始增多,至ROSC后24 h大部分CytC已释放至胞浆中,此时线粒体条带明显减弱.结论 大鼠CA/CPR并ROSC后神经MPTP的开放程度与CytC释放的量呈明显的相关性,MPFP的开放促使CytC的释放.
- 马宇洁杨兴易林兆奋缪明永张雷宁波
- 关键词：心肺复苏心搏骤停线粒体通透性转换孔细胞色素C
- 心肺复苏后大鼠脑线粒体通透性转换孔变化在细胞能量代谢障碍中的作用及机制被引量：2
- 2010年
- 目的研究大鼠心跳骤停/心肺复苏后神经细胞线粒体通透性转换孔的变化在能量代谢障碍中的作用及可能机制。方法首先建立窒息联合冰氯化钾致大鼠心跳骤停、心肺复苏的动物模型,断头后提纯大脑皮质组织内线粒体,采用分光光度法测定线粒体MPTP在不同时相的开放程度,应用高效液相法测定脑细胞ATP、ADP和AMP含量。结果心跳骤停/心肺复苏后大鼠神经细胞线粒体功能明显受损,ROSC后神经细胞MPTP持续处于开放状态,开放程度并不是瞬间增至最大,而是具有时间依赖性。ROSC后6h内神经细胞MPTP开放程度保持低水平,6h以后开始迅速大量开放,12h开放程度达到最大,24h开放程度略有缩小,表明线粒体开始收缩,至48h开放程度再次加大,72h又明显缩小,但未达到正常水平(P<0.05或P<0.01)。ROSC后各组ATP含量较对照组均下降(P<0.05或P<0.01),72h较对照组略有升高,但无统计学意义,各组比较线粒体合成ATP能力在CA/CPR并ROSC后呈双相变化即在ROSC后3h和24h分别出现两个合成低谷。结论 CPR后MPTP开放是加重神经细胞能量代谢障碍的主要原因,线粒体能量代谢和氧化磷酸化功能严重受损,导致ATP产生短时内骤降;促使了MPTP的进一步开放。
- 马宇洁杨兴易林兆奋缪明永张雷宁波李一粟刘涛刘磊
- 关键词：心肺复苏线粒体能量代谢障碍
- 大鼠心肺复苏后神经细胞线粒体通透性转换孔的变化被引量：3
- 2008年
- 目的研究大鼠心肺复苏后神经细胞线粒体通透性转换孔(MPTP)的变化规律。方法建立窒息联合冰氯化钾致大鼠心搏骤停、心肺复苏(CA/CPR)的动物模型,断头后提纯大脑皮层组织内线粒体,采用分光光度法测定线粒体MPTP在不同时相的开放程度。结果心肺复苏后大鼠神经细胞线粒体功能明显受损,恢复自主循环(ROSC)后神经细胞MPTP持续处于开放状态,开放程度具有时间依赖性,具体表现为在ROSC后6h以内开放程度保持低水平,6h以后开始迅速大量开放,直至12h开放程度达到最大,但并没有一直维持这一水平,而是在ROSC后24h开放程度略有缩小,表明线粒体开始收缩,至48h开放程度再次加大,72hMPTP明显缩小,但未达到正常水平。结论CA/CPR后大鼠线粒体MPTP出现明显规律性改变,复苏后12h以内可能是改善复苏后脑功能的最佳治疗窗。
- 马宇洁杨兴易林兆奋缪明永张雷宁波李一粟刘涛刘磊
- 关键词：线粒体心搏骤停心肺复苏
