中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2008M17)
- 作品数：5 被引量：31H指数：4
- 相关作者：张晓玲杨桥惠芸华于慧娟冯兵更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院东海水产研究所哥伦比亚大学第二军医大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项中国博士后科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 微生物发酵产大豆异黄酮苷元的连续超声波提取工艺及其定量分析研究被引量：8
- 2011年
- 选取浅玫瑰链霉菌、红色糖多孢菌及黑曲霉为发酵菌种,采用Plackett-Burman设计及正交试验,对影响微生物发酵法产大豆异黄酮苷元(染料木黄酮、黄豆苷元、黄豆黄素)的连续超声波提取工艺的主要试验因素进行系统优化。以浅玫瑰链霉菌为发酵菌种的实验结果表明:各主要试验因素对3种异黄酮苷元提取率影响程度大小为:抽提溶剂组分、超声波时间、淋洗液体积。而温度、溶剂流速两个因素与提取效率负相关。连续超声波作用时间及抽提溶剂组分为影响异黄酮苷元提取工艺的两个主要影响因素。当两因素的最优值分别为7min及70%时,总异黄酮苷元提取率为(98.7±1.23)%。通过固相萃取(SPE)可有效去除发酵提取液中杂质对HPLC定量分析的干扰,并使3种异黄酮苷元含量浓缩10倍以上,从而使HPLC方法的检测限达到10-3μg/mL,样品总分析时间小于10min,样品回收率为96.2%～103.4%,RSD值小于2.34%。上述结果表明,该方法可满足微生物发酵法产大豆异黄酮苷元的高效提取纯化及快速定量分析。
- 张晓玲惠芸华杨桥
- 关键词：大豆异黄酮苷元固相萃取微生物发酵
- 产贝毒裸甲藻共生海洋细菌ECSYW-28的分离鉴定及产类胡萝卜素生物活性研究被引量：7
- 2010年
- 从产贝毒裸甲藻中分离到一株新的产类胡萝卜素共生细菌,对该菌株进行细菌多相分类学鉴定分析。16S rRNA序列(GenBank登录号GU385809)同源性分析表明:该菌株与其进化关系最近的模式菌株Kocuria rosea DSM20447T的同源性为95.1%(小于确定新种的阈值97%),通过SherlockMIDI脂肪酸鉴定系统确定其细胞壁主要脂肪酸为anteisoC15:0及isoC15:0。综合生理生化、BIOLOG细菌鉴定及分子生物学等特性,将该菌株确定为Kocuria属的一个新种,命名为Kocuria sp.ECSYW-28。γ射线辐照及H2O2处理实验结果表明,该菌株具有较强抗辐射性及抗H2O2能力。液相色谱-质谱联用分析结果表明,其类胡萝卜素组分主要为β-胡萝卜素及未知结构物质B。类胡萝卜素抗氧化能力的ESR波谱分析表明,物质B对超氧阴离子自由基(O-2·)具有显著清除效果。对该菌株中参与类胡萝卜素生物合成的八氢番茄红素合成酶(phytoene synthase,crtB)及八氢番茄红素脱氢酶(phytoene dehydrogenase,crtI)基因进行了PCR特异性扩增及生物信息学比对,证实该菌株中存在类胡萝卜素生物合成的分子遗传基础。
- 张晓玲杨桥吴文惠
- 关键词：抗辐射类胡萝卜素生物合成基因
- 液相色谱-串联质谱法同时测定贝类产品中8种麻痹性贝类毒素被引量：6
- 2013年
- 建立了一种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时测定贝类产品中8种麻痹性贝类毒素的检测方法。样品经乙腈除蛋白后用1%三氯乙酸提取,提取液经正己烷脱脂,固相萃取净化后,采用液相色谱进行分离,以选择反应监测(SRM)正离子模式进行质谱分析,同时对贝类产品中8种麻痹性贝类毒素进行定性、定量分析。该方法对测定的8种麻痹性贝类毒素的定量限为100～450μg/kg。以标准加入法计算回收率,在100～300μg/kg(混标以低浓度组分计算)添加范围内,平均回收率为76.3%～95.6%,相对标准偏差为4.3%～13.2%。
- 冯兵张晓玲于慧娟蔡友琼
- 关键词：麻痹性贝类毒素液相色谱-串联质谱贝类
- 黑色素及谷胱甘肽通过抑制NF-κB途径的激活可有效抑制H_5N_1禽流感病毒感染被引量：8
- 2009年
- 我国是H5N1高致病性禽流感频发区.为筛选天然药物用于H5N1禽流感的防治并研究其抗病毒感染的作用机制,本研究选取黑色素及谷胱甘肽(GSH)为候选药物,通过Hoechst33258荧光染色,观察了禽流感病毒(AIV)感染后的细胞形态变化;细胞凋亡流式细胞术定量分析表明,H5N1AIV感染可诱导宿主狗肾上皮细胞(MDCK)凋亡,而黑色素及GSH对其具有显著抑制作用(P<0.01);当20μg/ml黑色素及10mmol/LGSH共同作用时,抑制率高达89%(P<0.01);采用MTT法检测,黑色素及GSH可增强AIV感染后的宿主细胞存活率;病毒血凝素(Ha)基因的RT-PCR检测结果表明,黑色素及GSH可显著降低AIV在宿主细胞内的增殖(P<0.01);一氧化氮(NO)毛细管电泳(CE)激光诱导荧光检测显示,黑色素及GSH均可显著降低病毒感染诱导宿主细胞内的NO释放量(P<0.05);RT-PCR技术结合ELISA方法,分别分析了病毒感染后宿主细胞的诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)及核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在mRNA和蛋白水平表达的差异.结果表明,黑色素及GSH可抑制病毒感染诱导的iNOS与COX-2的基因及蛋白的表达(P<0.05),并进而抑制NF-κB途径的激活(P<0.01),从而可有效抑制HNAIV感染.
- 张晓玲杨桥代俊顾潮江许振辉焦炳华
- 关键词：H5N1禽流感病毒病毒感染黑色素谷胱甘肽
- 超高效液相色谱荧光法检测贝类中三种高毒性麻痹性贝毒被引量：4
- 2012年
- 建立灵敏可靠的麻痹性贝类毒素(PSP)检测技术是保障我国贝类水产品质量安全的有力手段。本研究选取3-(2-呋喃甲酰基)-喹啉-2-羰醛(FQ)为荧光衍生试剂,利用超高效液相色谱(UPLC)和柱前衍生荧光检测技术,建立了贝类中3种高毒性PSP毒素成分(STX、GTX1及NEO)的检测方法,对影响荧光衍生效率和色谱分离效果的各主要实验因素分别进行了优化。结果表明,在优化后的最佳实验条件下,3种PSP毒素成分线性方程的相关系数(r)均大于0.998,保留时间(tm)及峰面积(PA)的日内及日间精密度RSD值分别小于3.1%和5.6%,当信噪比(S/N)等于3时,检测限范围为7～14μg.kg-1,样品加标回收率为82%～92%,RSD值小于5.2%。该方法灵敏、稳定且可靠,可用于贝类中三种高毒性PSP毒素成分的日常分析检测。
- 张晓玲杨桥惠芸华冯兵马丽艳于慧娟
- 关键词：麻痹性贝毒超高效液相色谱贝类
