上海市农科院青年科技发展基金(200503)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
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- 相关机构：上海市农业科学院山东农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪细小病毒NS1基因低温诱导表达及间接ELISA方法的建立被引量：3
- 2009年
- 利用PCR技术从猪细小病毒的DNA模板中扩增了NS1的基因片段,将PCR产物克隆至pET32c载体,将构建好的重组质粒pET32c-NS1,转入表达宿主菌BL21中,利用低温诱导表达的方法,避免了包涵体的形成。Western-blot结果显示,表达产物有良好的生物活性。纯化后的重组蛋白作为抗原,包被酶标板,建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被质量浓度为2.5 mg/L、血清最佳稀释度为1∶200。表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂用于检测PPV,且能很好的区别灭活疫苗免疫猪和自然感染猪。
- 臧科伟张春玲邹勇柴家前崔言顺
- 关键词：猪细小病毒NS1基因ELISA
- 猪细小病毒VP2的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：4
- 2008年
- 含有猪细小病毒结果蛋白VP2基因的重组质粒pET32c-VP2,转入表达宿主菌BL21中,通过IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,重组VP2蛋白高效表达,以包涵体形式存在,经变、复性和纯化后,Western blot显示有良好的生物活性。纯化后的重组蛋白作为抗原,包被酶标板,建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原最佳包被浓度为3.1μg/mL;血清最佳稀释度为1∶100,阳性标准初步定为OD待检血清≥0.4且OD待检血清/OD标准阴性值≥2.1。
- 臧科伟张春玲邹勇柴家前崔言顺
- 关键词：猪细小病毒VP2基因ELISA
