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国家自然科学基金(30900053)

作品数:8 被引量:17H指数:2
相关作者:王静杨宇白琳杨志红姚李四更多>>
相关机构:中国检验检疫科学研究院沈阳农业大学吉林出入境检验检疫局更多>>
发文基金:国家自然科学基金质检公益性行业科研专项项目国家质检总局科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 3篇荧光
  • 3篇PCR检测方...
  • 3篇病毒
  • 2篇荧光定量
  • 2篇荧光定量PC...
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇定量PCR检...
  • 1篇原虫
  • 1篇鼠传疾病
  • 1篇疟原虫
  • 1篇葡萄球菌
  • 1篇葡萄球菌感染
  • 1篇球菌
  • 1篇重组抗原
  • 1篇立克次体
  • 1篇裂谷热
  • 1篇螺旋体
  • 1篇酶链反应
  • 1篇免疫层析
  • 1篇免疫层析技术

机构

  • 7篇中国检验检疫...
  • 2篇军事医学科学...
  • 2篇沈阳农业大学
  • 2篇吉林出入境检...
  • 1篇吉林农业大学

作者

  • 6篇杨宇
  • 6篇王静
  • 3篇杨志红
  • 3篇姚李四
  • 3篇白琳
  • 2篇赵彤言
  • 2篇王振东
  • 2篇徐宝梁
  • 2篇王宝麟
  • 2篇邵丽筠
  • 2篇张晓龙
  • 2篇胡健萍
  • 2篇魏莲
  • 1篇姜超
  • 1篇王刚
  • 1篇王旺
  • 1篇刘阳
  • 1篇胡孔新
  • 1篇李长田
  • 1篇浦昀

传媒

  • 3篇中国媒介生物...
  • 2篇寄生虫与医学...
  • 1篇中华实验和临...
  • 1篇中国国境卫生...
  • 1篇Scienc...

年份

  • 2篇2013
  • 5篇2012
  • 1篇2011
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
基孔肯雅病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量:3
2012年
目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,检测基孔肯雅病毒。方法通过序列比对挑选出基孔肯雅病毒基因组中高度保守的序列,在此序列上设计引物及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达21拷贝/μl,通过检测与传播媒介相似的流行性乙型脑炎病毒、黄热病毒、登革热病毒无交叉反应。结论该方法的建立在基孔肯雅热的疾病防控方面有较好的应用前景。
杨宇白琳胡健萍姚李四魏莲杨志红王静
关键词:荧光定量PCR基孔肯雅病毒
多重荧光定量PCR检测鼠感染3种病原体的方法被引量:1
2011年
目的建立多重荧光定量PCR快速检测以鼠为宿主伯氏疏螺旋体、弓形虫和恶性疟原虫的方法,对预防3种病原体引发的疫情具有重要意义。方法通过设计特异性引物和探针,扩增伯氏疏螺旋体23S rRNA基因,弓形虫的B1基因和恶性疟原虫的SSU基因,采用倍比梯度稀释法检测该体系的灵敏度,以另外8种以鼠为宿主的致病菌评价检测体系的特异性;建立了同时感染3种病原体的鼠全血模拟样本检测试验,以验证方法的适用性。结果建立自鼠血液模拟样本中同时检测伯氏疏螺旋体、弓形虫和恶性疟原虫的多重荧光定量PCR方法,检测3种病原体的灵敏度分别为5.5、12.8、17.2拷贝/μl,特异性强。结论建立了多重荧光定量PCR检测伯氏疏螺旋体、弓形虫和恶性疟原虫方法,缩短了检测时间,在疾病防控等方面有很好的应用前景。
吉尚志杨宇王静王振东纪海波
关键词:伯氏疏螺旋体弓形虫恶性疟原虫鼠传疾病
裂谷热病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量:1
2012年
目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于裂谷热病毒的检测。方法通过序列对比在裂谷热病毒L基因保守区设计引物及Taqman探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达37拷贝/μl,通过检测同为蚊媒传播的日本脑炎病毒、黄热病毒、登革病毒、基孔肯亚病毒无交叉反应。结论本方法的建立在国境口岸传染病的防控方面有较好的应用前景。
杨志红李长田杨宇白琳魏莲王静
关键词:荧光定量PCR裂谷热
马尔堡、埃博拉病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立被引量:9
2012年
目的建立一种快速、敏感、特异的双重实时荧光定量PCR方法,可同时检测马尔堡病毒和埃博拉病毒。方法通过序列比对挑选出两种病毒基因组中高度保守的序列,分别设计引物及Taqman探针,两条探针分别标记FAM和Texas Red荧光报告基因,建立双重实时荧光定量PCR反应体系。结果双重荧光定量PCR方法检测两种病毒阳性标准品的灵敏度分别为30.5拷贝/μl和28.6拷贝/μl,通过检测日本脑炎病毒、黄热病毒、登革热病毒无交叉反应,有较好的灵敏度和特异性。结论建立了马尔堡、埃博拉病毒双重荧光定量PCR检测方法,实现了两种病毒同时实时定量检测,在传染病防控领域有较好的应用前景。
杨宇白琳胡孔新杨志红胡健萍王静
关键词:聚合酶链反应
从厩真厉螨中检出与猫立克次体近缘的立克次体核酸片段被引量:1
2012年
本研究用立克次体属特异的gltA和ompB基因扩增引物,从吉林长白县捕获鼠中分拣的534只厩真厉螨中扩得gltA和ompB基因片段。通过基因片段的序列测定、BLAST比对和系统发育分析,显示两个扩增基因与猫立克次体Rickettsia fells同源性最高(99%),证明该地区厩真厉螨携带与猫立克次体近缘的立克次体。
姚李四刘勇先邵丽筠张晓龙杨宇王静徐宝梁王宝麟赵彤言
关键词:RICKETTSIA
贝氏柯克斯体重组抗原P1表达纯化及胶体金免疫层析方法的建立被引量:2
2012年
目的制备贝氏柯克斯体的重组外膜蛋白P1,并建立一种快速检测贝氏柯克斯体抗体的胶体金免疫层析方法。方法利用贝氏柯克斯体主要的表面蛋白P1的良好免疫原性和免疫反应性,对已构建的表达P1抗原的重组工程菌,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导表达P1重组蛋白,通过蛋白纯化、复性、浓缩等过程获得目的蛋白。纯化的P1重组抗原包被硝酸纤维素膜,胶体金标记SPA,建立检测贝氏柯克斯体抗体的免疫层析方法,评价该方法的特异性、灵敏性、稳定性及应用性。结果纯化后获得分子质量(Mr)为52000的目的蛋白,纯度为94%。建立了快速检测贝氏柯克斯体特异性抗体的方法,对阳性参照样本检测,目测灵敏度可达1∶105,采用金标仪半定量检测灵敏度可达116ng/ml;对94份鼠血清和90份健康人血清检测,无阳性检出;对布鲁氏菌、普氏立克次体、军团菌、土拉弗朗西斯菌等传播途径和临床特征相似的病原抗体进行检测,未发生交叉反应。结论利用重组抗原建立的贝氏柯克斯体抗体胶体金免疫层析方法具有较好的敏感性和特异性,可用于传染病快速筛查。
王振东姜超杨宇赵婷婷王旺王静
关键词:贝氏柯克斯体免疫层析技术蛋白纯化
Complete genome sequence of methicillin-sensitive Staphylococcus aureus containing a heterogeneic staphylococcal cassette chromosome element
2013年
Staphylococcus aureus is a common human bacterium that sometimes becomes pathogenic,causing serious infections.A key feature of S.aureus is its ability to acquire resistance to antibiotics.The presence of the staphylococcal cassette chromosome(SCC) element in serotypes of S.aureus has been confirmed using multiplex PCR assays.The SCC element is the only vector known to carry the mecA gene,which encodes methicillin resistance in S.aureus infections.Here,we report the genome sequence of a novel methicillin-sensitive S.aureus(MSSA) strain:SCC-like MSSA463.This strain was originally erroneously serotyped as methicillin-resistant S.aureus in a clinical laboratory using multiplex PCR methods.We sequenced the genome of SCC-like MSSA463 using pyrosequencing techniques and compared it with known genome sequences of other S.aureus isolates.An open reading frame(CZ049;AB037671) was identified downstream of attL and attR inverted repeat sequences.Our results suggest that a lateral gene transfer occurred between S.aureus and other organisms,partially changing S.aureus infectivity.We propose that attL and attR inverted repeats in S.aureus serve as frequent insertion sites for exogenous genes.
LI DeZhiCHU YaNanREN LuFengLI XinGangYUAN LinaKANG YuZHANG WeiYANG YuWANG XuMinBAILLIE J.KennethYU JunGAO ZhanCheng
关键词:多重PCR检测葡萄球菌感染
吉林长白县大林姬鼠中检测到Amur样病毒核酸
2013年
用针对汉坦病毒L(大)片段的特异引物对21份大林姬鼠鼠肺样本进行检测,有2份扩增出特异性条带,经序列测定显示是Amur样病毒,两株病毒存在一个碱基的差异。随后对一株样本的M和S片段进行了全长扩增,结果显示其M片段和H5株同源性最高。S片段和NA33株的同源性最高。根据M片段编码区序列构建的进化树显示,我国和俄罗斯Amur样病毒可归为同一亚型。
姚李四邵丽筠王刚刘阳刘勇先浦昀燕青丽张晓龙张吉徐宝梁王宝麟赵彤言
关键词:大林姬鼠
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