北京市科委重大项目(H020220010490)
- 作品数：5 被引量：20H指数：2
- 相关作者：周春燕张永珍马东星毛节明赵蕊更多>>
- 相关机构：北京大学北京大学第三医院武警总医院更多>>
- 发文基金：北京市科委重大项目国家教育部“985工程”国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 定向诱导小鼠ES细胞向心肌细胞的分化被引量：7
- 2005年
- 为了提高体外诱导ES细胞向心肌细胞分化的效率 ,对以往的诱导方法加以改进 ,采用直接悬浮培养和 0 8%DMSO诱导 ,建立了简便、高效的定向诱导ES细胞向心肌细胞分化的体系 .诱导第 9d起可见自发性、有节律跳动的类胚体出现 ,第 14d达到高峰 ,约有 70 %的拟胚体产生跳动 .用RT PCR的方法在跳动的拟胚体中检测到心肌细胞特异性标志物的表达 ,采用免疫荧光染色的方法在蛋白水平检测到心肌特异的α辅肌动蛋白 (α actinin)的表达 ,并可见清晰肌小节 ,表明在改进的体外诱导条件下ES细胞可分化为成熟的心肌细胞 .
- 林钊贾竹青马康涛陈苹周春燕
- 关键词：胚胎干细胞细胞分化心肌细胞
- 骨髓单个核细胞移植对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡及bcl-2表达的调节
- 2005年
- 目的 观察骨髓单个核细胞(BM -MNCs)移植对心肌梗死(MI)后恢复期心肌细胞凋亡及心功能的影响,并探讨其可能机制。方法 通过结扎左冠状动脉前降支制成MI模型。2周后第2次开胸在心外膜下梗死区及周边区多点注射BM-MNCs混悬液2 0 0 μl( 5×10 6个细胞)。经超声心动图测定左室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)等指标。采用DNA缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测bcl- 2蛋白在心肌细胞中表达水平。结果 术后4周,移植组EF、FS值均高于对照组(P <0 .0 5 ) ;8周时EF、FS值升高达2 2 .4 %、2 8.1% (P <0 .0 5 )。TUNEL结果显示心肌细胞凋亡指数在移植组明显低于对照组( 4周:0 .0 94 6±0 .0 170vs 0 .1730±0 .0 180 ,P <0 .0 5 ;8周:0 .0 916±0 .0 14 0vs 0 .182 0±0 .0 15 0 ,P <0 .0 5 )。免疫组化结果表明,移植组bcl- 2蛋白表达高于对照组( 4周:12 .6 6±3.37vs 5 .6 8±2 .5 3,P <0 .0 5 ;8周:13.0 80±3.0 87vs 5 .0 2±1.91,P <0 .0 5 )。结论 骨髓单个核细胞移植可抑制MI后心肌细胞凋亡的发生,从而保护心功能,其机制可能与对bcl -
- 马东星刘惠亮张永珍毛节明周春燕
- 关键词：骨髓单个核细胞移植BCL-2表达冠状动脉前降支免疫组化法检测细胞凋亡指数多点注射
- 骨髓细胞移植对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的调节被引量：10
- 2004年
- 目的 观察骨髓单个核细胞 (BM MNCs)移植对心肌梗死 (MI)后恢复期心肌细胞凋亡及心功能的影响 ,并探讨其可能机制。方法 通过结扎左冠状动脉前降支制成MI模型。 2周后第二次开胸在心外膜下梗死区及周边区多点注射BM MNCs混悬液 2 0 0 μl(5× 10 6 个细胞 )。经超声心动图测定左室射血分数 (EF)、短轴缩短率 (FS)等指标。采用DNA缺口末端标记法 (TUNEL)检测心肌细胞凋亡 ,免疫组化法检测Bcl 2、Bax蛋白在心肌细胞中表达水平。结果 术后 4周 ,移植组EF、FS值均高于对照组 (P <0 0 5 ) ;8周时EF、FS值升高达 2 2 4 %、2 8 1% (P <0 0 5 )。TUNEL结果显示心肌细胞凋亡指数在移植组明显低于对照组 (4周 :0 0 94 6± 0 0 17vs 0 173± 0 0 18,P <0 0 5 ;8周 :0 0 916± 0 0 14vs 0 182± 0 0 15 ,P <0 0 5 )。免疫组化结果表明 ,移植组Bcl 2蛋白表达高于对照组 (4周 :12 6 6± 3 37vs 5 6 8± 2 5 3,P <0 0 5 ;8周 :13 0 8± 3 0 87vs 5 0 2± 1 91,P <0 0 5 ) ;Bax蛋白表达则降低 (4周 :11 4 8± 3 134vs 2 0 12± 3 91,P <0 0 5 ;8周 :9 98± 3 0 3vs 2 2 74± 3 12 ,P <0 0 5 )。结论 骨髓单个核细胞移植可抑制MI后心肌细胞凋亡的发生 ,从而保护心功能 ,其机制可能与对Bcl 2、
- 马东星张永珍谢道银赵蕊张萍毛节明周春燕
- 关键词：骨髓细胞移植心肌梗死心肌细胞凋亡BCL-2BAX
- 心肌梗死后延迟骨髓细胞移植对大鼠心肌细胞bcl-2/baxmRNA及蛋白表达的影响被引量：2
- 2005年
- 目的观察心肌梗死(MI)后恢复期延迟的骨髓单个核细胞(BM-MNCs)移植对心肌细胞bcl-2/baxmRNA及蛋白表达的调节作用,并探讨影响凋亡的可能机制。方法通过结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支制成MI模型。2周后第2次开胸,移植组在心外膜下梗死区及周边区多点注射BM-MNCs混悬液200μl(5×106个细胞),对照组予等体积PBS液。TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白在心肌细胞中的表达水平,原位杂交法检测bcl-2、baxmRNA表达变化。结果TUNEL结果显示心肌细胞凋亡指数在移植组明显低于对照组(4周:0·095±0·017vs0·173±0·018,P<0·05;8周:0·0926±0·014vs0·182±0·015,P<0·05)。免疫组化结果表明,移植组Bcl-2蛋白表达高于对照组(4周:12·66±3·37vs5·68±2·53,P<0·05;8周:13·08±3·09vs5·02±1·91,P<0·05),Bax蛋白表达则低于对照组(4周:11·48±3·13vs20·12±3·91,P<0·05;8周:9·98±3·03vs22·74±3·12,P<0·05)。第4、8周(治疗后第2、6周),移植组baxmRNA积分光密度和阳性面积较第2周降低,并低于对照组(P<0·05)。结论延迟至心肌梗死后2周行骨髓单个核细胞移植可抑制心肌细胞凋亡,其机制可能与对bcl-2、bax表达的调节有关。
- 马东星刘惠亮张永珍赵蕊毛节明周春燕
- 关键词：细胞移植心肌梗死
- 人类胎儿骨髓间充质干细胞的白细胞抗原表达特征被引量：1
- 2006年
- 目的：对体外培养不同代数流产胎儿骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，MSCs）的人类白细胞抗原Ⅰ类（human leukocyte antigen，HLA-Ⅰ）和HLA-Ⅱ类抗原表达情况以及经过不同浓度干扰素γ（IFN-γ）作用后HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原的表达变化进行观察，为建立干细胞库进行细胞移植提供体外实验证据。本研究经北京大学医学部伦理委员会批准。方法：胎儿MSCs取自23～24周流产胎儿，体外培养后取第5和第12代的细胞，流式细胞仪分析HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原的表达水平。经过终质量浓度为5μg／L或50μg／L的IFN-γ处理后，于24，48，72，96，120h检测HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原的表达；并用RT-PCR方法定性分析第13代细胞HLA-E和HLA-G的mRNA表达。结果：胎儿骨髓MSC表达HLA-Ⅰ类抗原，几乎不表达HLA-Ⅱ类抗原。IFN-γ可以上调MSCs的HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原。流式细胞分析显示HLA-Ⅰ类抗原阳性细胞占总细胞的比例超过50％，但HLA-Ⅱ类抗原阳性细胞不到10％。经过50μg／L的IFN-γ处理后，第5代细胞HLA-Ⅰ类抗原阳性细胞百分率及荧光强度与未经处理的细胞相比明显增加，且荧光强度随时间延长呈现递增趋势。第12代细胞HLA-Ⅰ类抗原阳性细胞百分率及荧光强度的上调幅度明显低于第5代细胞。相同浓度IFN-γ（50μg／L）作用于第5代和第12代细胞均可上调HLA-Ⅱ类抗原，第5代细胞于48h开始上调（59．9％），第12代细胞于72h开始上调（48．1％）。第12代细胞HLA-Ⅱ类抗原上调幅度低于第5代细胞。不同浓度IFN-γ（5μg/L和50μg／L）处理后，HLA-Ⅰ类抗原和HLA-Ⅱ类抗原阳性细胞百分率均明显增加。RT-PCR结果显示，胎儿骨髓MSCs有HLA-E和HLA-G抗原的mRNA水平表达。结论：胎儿骨髓MSCs可以被IFN-γ诱导上调HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原表达。体外培养传代能减低IFN-γ作用后的抗原上调幅度。胎儿骨髓M
- 陈晓路陈苹贾竹青刘羿男马康涛张永珍周春燕
- 关键词：骨髓细胞间质干细胞HLA抗原干扰素类
