吉林省科技厅科技发展计划项目(20116044)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：王会岩刘敏杨苹李校堃孔祥鑫更多>>
- 相关机构：吉林医药学院吉林农业大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科技发展计划项目吉林省教育厅科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同理化因素对重组人成纤维细胞生长因子21蛋白纯度的影响
- 2015年
- 目的：研究重组人成纤维细胞生长因子21（rhFGF21）在不同保存条件下的稳定性,阐明温度、pH值、缓冲溶液和反复冻融因素对rhFGF21稳定性的影响,进一步完善纯化rhFGF21的工艺。方法：rhFGF21在不同温度（-20℃、4℃和25℃）、不同pH值缓冲液（醋酸-醋酸钠缓冲液pH 4.0和pH 5.0、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液pH 5.0和pH 6.0、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液pH 6.0、pH 6.5和pH 7.0,TrisHCl缓冲液pH 7.5和pH 8.0）中及反复冻融条件下分别保存,采用高效液相色谱法（HPLC）检测rhFGF21纯度,同时观察外观性状。结果：于-20℃和4℃分别保存时,rhFGF21的各项性质在观察期内均无明显变化;25℃时,rhFGF21存放14d纯度由0d时（100.00±0.00）%下降至（15.20±0.14）%（P〈0.01）;在pH 4.0和pH 5.0缓冲液中25℃条件下保存7d,溶液出现浑浊;在pH 5.0和pH 6.0缓冲液中25℃条件下保存7d,溶液出现浑浊;在pH 6.5和pH 8.0磷酸盐和Tris-HCl缓冲液中,溶液澄清透明;rhFGF21原液反复冻融后其纯度变化差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：rhFGF21在低温和pH 6.5－8.0磷酸盐和Tris-HCl缓冲液中溶液较稳定,反复冻融处理对rhFGF21稳定性也有明显影响。
- 王长文刘敏刘磊姜勇张磊李艳王会岩
- 关键词：纯度稳定性
- 成纤维细胞生长因子-21对体外诱导的非酒精性脂肪肝细胞模型脂代谢的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)对体外诱导的非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型脂代谢的影响及其可能的作用机制。方法:采用MTT法筛选医用脂肪乳注射液使用浓度和FGF-21作用浓度,将体外诱导的NAFLD细胞分为对照组、模型组、脱离脂肪乳组和FGF-21治疗组,光学显微镜观察油红O染色情况,全自动生化仪检测NAFLD细胞内甘油三酯(TG)水平,免疫细胞化学方法观察细胞内肉毒碱脂酰转移酶-1(CPT-1)、过氧化氢酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的表达。结果:MTT法筛选出0.1%医用脂肪乳注射液作为建立体外诱导NAFLD细胞模型的最佳诱导浓度,与正常肝细胞株HL7702比较,模型组油红O染色后细胞浆内有大量被染成橘红色的脂滴,细胞内TG水平显著升高(P<0.01),CPT-1蛋白表达减弱,PPARγ和SREBP-1c蛋白表达增加。MTT法筛选出0.5mg.L-1FGF-21作为观察该药物对NAFLD细胞模型影响的作用浓度,与模型组比较,FGF-21处理组细胞内TG水平显著降低(P<0.01),CPT-1蛋白表达增加,PPARγ和SREBP-1c蛋白表达减弱。结论:FGF-21处理能减轻NAFLD细胞中TG蓄积,并使HL7702细胞CPT-1蛋白表达增加,而PPARγ和SREBP-1c蛋白表达减少。
- 刘敏孔祥鑫杨苹陈玉斌李校堃王会岩
- 关键词：非酒精性脂肪肝病
