南京医科大学科技发展基金(NY04029)
- 作品数：1 被引量：12H指数：1
- 相关作者：翟惠虹张发明季国忠范志宁王学浩更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院南京医科大学第二附属医院江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Smad4基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定被引量：12
- 2006年
- 目的:构建Smad4基因RNAi慢病毒载体.方法:针对已经筛选确定的Smad4基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经MluI和ClaI酶切后的pLVTHM载体[含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LVshSmad4慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用LVshSmad4,pCMVdR8.74和pMD2G3质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果:PCR和测序证实,成功构建Smad4shRNA的慢病毒载体LVshSmad4.包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为5×1010pfu/L.结论:成功构建人Smad4基因RNAi慢病毒载体.
- 季国忠张发明翟惠虹范志宁樊代明王学浩
- 关键词：RNA干扰SMAD4肿瘤慢病毒
