上海市科学技术委员会科研基金(05ZR14061)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 成骨细胞与骨髓间充质干细胞DNA甲基化差异的实验研究
- 2008年
- 目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)与成骨细胞(OB)在体外传代培养过程中DNA甲基化的差异,并分析BMSCs与OB成骨表型基因甲基化状态与其mRNA表达的相关性。方法采用甲基化特异性-聚合酶链反应(MSP)方法检测BMSCs、OB基因组DNA中骨钙素(OC)、Osterix(OSX)、Runx2等成骨表型和转录基因与抑癌基因p16的甲基化状态,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述成骨表型基因的mRNA表达。同时以茜素红染色法鉴定OB。结果OC、OSX、Runx2基因在体外培养的各代BMSCs中呈高甲基化状态,未检出这些基因的mRNA表达;在OB中,OC、OSX、Runx2基因均呈低甲基化状态,且相应基因mRNA均呈阳性表达。p16在BMSCs和OB中均呈低甲基化状态。BMSCs与OB分别在体外稳定培养5代,各代的成骨表型基因的甲基化状态和mRNA表达量的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论DNA甲基化模式在BMSCs和OB中呈现出细胞特异性差异,且基因甲基化状态可能控制着相应基因的表型表达。在体外稳定培养、传代的条件下,BMSCs和OB均能呈现基因组稳定的特征,未发生明显的DNA甲基化模式的改变,为临床安全应用BMSCs奠定了理论基础。
- 袁石福张伟滨沈宇辉朱雅萍王珺魏立
- 关键词：DNA甲基化表观遗传学基因沉默
