浙江省自然科学基金(399409)
- 作品数:12 被引量:126H指数:7
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- 相关领域:生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 木聚糖酶的特性研究被引量:35
- 2001年
- 对里氏木霉 GXC菌株所产的木聚糖酶特性作了研究 .结果表明 :该酶的最适温度为 55℃ ,最适 p H5.3.p H稳定范围较广 ,热稳定性在 4 0℃以下 .酶的最大反应速度为 52 6μmol/ ( min.mg) ,米氏常数为 3.4 2 mg/ m L.Cu2 +,Zn2 +,Fe2 +和 Fe3+对酶有抑制作用 ,而 Co2 +和 Mn2
- 李卫芬孙建义
- 关键词:饲料添加剂木聚糖酶木霉
- Aspergillus niger FS6中β-1,3-1,4-葡聚糖酶cDNA片段的克隆及序列测定被引量:1
- 2001年
- 通过 RT- PCR方法首次从真菌 Aspergillus niger FS6中扩增和克隆到 β- 1,3- 1,4 -葡聚糖酶 c DNA片段 .序列测定表明 :该片段全长 2 80 bp.经 Clustal W软件进行同源性分析后表明 ,该序列与枯草芽孢杆菌、水解淀粉芽孢杆菌、厌氧真菌、牛链球菌和热纤维梭菌中 β- 1,3- 1,4 -葡聚糖酶基因同源性很高 ,分别为 91% ,90 % ,70 % ,6 7% ,6 5 %
- 李卫芬孙建义许梓荣廖玉华
- 关键词:ASPERGILLUSNIGERΒ-1,3-1,4-葡聚糖酶CDNA片段
- 黑曲霉木聚糖酶和β-葡聚糖酶cDNA片段克隆和序列分析被引量:7
- 2001年
- 孙建义李卫芬顾赛红许梓荣
- 关键词:黑曲霉木聚糖酶Β-葡聚糖酶CDNA片段克隆造纸工业
- 浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)β-1,3-1,4-葡聚糖酶特性及其基因克隆被引量:2
- 2004年
- 对浸麻芽孢杆菌 (Bacillusmacerans)所产的β- 1,3- 1,4 -葡聚糖酶特性进行了分析。结果表明 :该酶的最适温度为5 5℃ ,在 6 0℃以下酶相对稳定。通过 PCR方法扩增和克隆了该酶基因的全长 DNA序列 ,长度为 734bp,其中开放阅读框架长 717bp,编码 2 37个氨基酸。经 Blast分析 ,该序列与已登录的浸麻芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌 (B.polymyxa)的同源性较高 ,分别为 99%和 82 %。
- 李卫芬孙建义许梓荣吕文平
- 关键词:Β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆温度
- 多粘芽孢杆菌β-葡聚糖酶特性及其基因克隆被引量:12
- 2004年
- 对多粘芽孢杆菌所产的β-葡聚糖酶特性进行了分析.结果表明:该酶的最适温度为50℃,在60℃以下酶相对稳定.通过PCR方法扩增和克隆了该酶基因的全长DNA序列,长度为734bp,其中开放阅读框架长714bp,编码238个氨基酸.经Blast分析,该序列与已登陆的多粘芽孢杆菌和浸麻芽孢杆菌的同源性较高,分别为99%和82%.
- 李卫芬陆平周绪霞
- 关键词:Β-葡聚糖酶基因克隆
- 木霉GXC产β-葡聚糖酶条件和酶学性质被引量:27
- 2001年
- 研究了木霉GXC产 β 葡聚糖酶的条件。结果表明 ,最适产酶碳源为麸皮 ,氮源为硫酸铵 ;产酶的最适条件为 :初始pH为 4 0~ 5 0 ,30℃培养 44h。粗酶液经硫酸铵沉淀、SephadexG 2 5、SephadexG 1 0 0和DEAE SephadexA 50柱层析得到纯β 葡聚糖酶 ,SDS PAGE凝胶电泳显示一条带 ,测得分子量为 35kD。该酶最适反应pH5 0 ,最适反应温度为 60℃ ,在 40℃以下、pH4 0~ 5 0酶活力相对稳定。 5 0mmol L以下的Ca2 +、Zn2 +和Fe2 +,以及 1 0 0mmol L以下的Co2 +对酶活力有激活作用 ;而Cu2 +和Fe3+具有抑制作用。
- 孙建义李卫芬顾赛红
- 关键词:Β-葡聚糖酶木霉产酶条件纯化
- β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株筛选、鉴定及酶基因克隆和序列分析被引量:3
- 2004年
- 目的:筛选和鉴定β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株并对酶基因进行克隆和序列分析。方法:利用透明圈法从食堂锅炉排水口污泥中分离筛选菌株,并采用形态和生理生化特征鉴定菌株。通过PCR方法扩增酶基因,将其克隆于T-载体,用Sanger双脱氧链终止法测定序列。结果:分离筛选的β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株呈长杆状、革兰氏染色可变、兼性厌氧、产芽孢(次端生、孢囊膨大)。生理生化试验结果表明:该菌株与浸麻芽孢杆菌(Bacillusmacerans)最为相近,命名为BacillusspA3。PCR扩增获得的酶基因全长734bp,其中开放阅读框架为717bp,编码238个氨基酸。经Blast分析,该序列与多粘芽孢杆菌(B.polymyxa)和浸麻类芽孢杆菌(B.macer-ans)相似性较高,分别为98%和82%。结论:成功分离了β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株BacillusspA3,酶基因序列与多粘芽孢杆菌和浸麻类芽孢杆菌有较高的同源性。
- 李卫芬孙建义肖竞吕文平
- 关键词:酶基因菌株筛选Β-1,3-1,4-葡聚糖酶麻类生理生化
- 里氏木霉β-葡聚糖酶稳定性研究被引量:21
- 2001年
- 研究了里氏木霉GXCβ -葡聚糖酶的稳定性。结果发现 :β-葡聚糖酶粗酶液的稳定性高于纯酶液 ,两者的耐热温度分别为 70℃和 6 0℃ ,其pH稳定范围都为 3.0~ 5 .0。Cu2 +,Mn2 +和Fe3+对酶有抑制作用 ,Zn2 +和Co2 +有激活作用 ,其他离子Ca2 +,Mg2 +,Fe2 +和K+在不同浓度条件下对β -葡聚糖酶有不同的作用。胰蛋白酶和胃蛋白酶对 β
- 李卫芬孙建义顾赛红
- 关键词:里氏木霉Β-葡聚糖酶稳定性饲用酶制剂
- 浸麻芽孢杆菌-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达被引量:3
- 2005年
- 将含浸麻芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因的重组克隆质粒进行亚克隆,用Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切后,与相同酶切的表达载体pET-30a相连接,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21中表达.蛋白质电泳结果表明在25.0 kD处有表达带,酶活力达60.4 U/mL,为出发菌的30多倍.酶特性研究表明:该酶的最适温度为50℃,最适pH为5.0~7.0;在50℃以下及在不同的pH下(pH 3.0~9.0)处理后较稳定.
- 李卫芬姚江涛胡春霞许梓荣
- 关键词:Β-葡聚糖酶大肠杆菌酶特性
- 体外模拟动物胃肠条件下β-葡聚糖酶稳定性的研究被引量:16
- 2002年
- 本文研究了胃肠条件下里氏木霉GXC的 β -葡聚糖酶稳定性。模拟胃条件表明 ,酶活的降低主要由低pH值引起 ,温度和胃蛋白酶对酶活性无显著影响 ,,而金属离子混合液 (Cu2 + 、Mn2 + 、Zn2 + 和Fe3 + )具有促进作用 ;模拟小肠条件发现 ,温度和胰蛋白酶对β -葡聚糖酶活性无显著影响 ,酶活的降低主要由中性pH值引起 ,微量元素混合液 (Cu2 + 、Mn2 + 、Zn2 + 和Fe3 + )对酶活性具有一定的抑制作用 ,而Ca2 + 能显著激活β -葡聚糖酶。研究结果表明 ,虽然 β -葡聚糖酶在胃内的活性较低 ,但能在小肠中恢复 ,同时也进一步说明了胃蛋白酶和胰蛋白酶对 β
- 孙建义李卫芬顾赛红
- 关键词:Β-葡聚糖酶小肠酶稳定性饲料添加剂