国家自然科学基金(81172558)
- 作品数：10 被引量：29H指数：3
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- EphA2经p38MAPK通路调控头颈部鳞状细胞癌血管内皮生长因子表达的研究被引量：1
- 2013年
- 目的阐明促红细胞生成素产生肝细胞受体A2（erythropoietin—producing hepatocellular receptor，EphA2）蛋白可经p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen—activated protein kinase，p38MAPK）信号通路调控头颈部鳞状细胞癌血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。方法采用脂质体2000将EphA2蛋白过表达载体pEGFP—N1-EphA2和空白载体pEGFP—N1分别转染头颈鳞状细胞癌Tu686细胞，酶联免疫吸附法检测EphA2蛋白上调后VEGF蛋白的表达，Westernblot法检测p38MAPK信号通路有无激活；进一步利用不同浓度（0、5、10μmol／L）小分子抑制剂SB203580特异性阻断p38MAPK通路，酶联免疫吸附法检测VEGF蛋白的表达改变有无逆转。结果Tu686细胞EphA2蛋白上调后，VEGF蛋白在空白载体组和亲本细胞组中的表达（x±s）分别为（400．99±33．50）pg／ml和（385．30±33．50）pg／ml，而在实验组中的表达显著升高为（535．31±45．71）pg／ml，差异有统计学意义（F=17．091，P〈0．01）；同时，实验组Tu686细胞磷酸化p38MAPK的表达上调。不同浓度（0、5、10p,mol／L）SB203580作用EphA2蛋白过表达的Tu686细胞后，磷酸化p38MAPK的表达则被梯度抑制，且VEGF蛋白的表达逐渐降低，分别为（643．75±52．00）pg／ml、（513．52±54．05）pg／ml、（302．85±13．93）pg／ml，三组间差异有统计学意义（F=45．761，P〈0．01）。结论EphA2蛋白对p38MAPK信号通路具有调控作用，并经该通路影响VEGF蛋白的表达。
- 刘勇谭浩蕾李果余长云粟忠武任舒灵朱刚才邱元正田勇泉张欣
- 关键词：EPHA2鳞状细胞P38丝裂原活化蛋白激酶类血管化血管内皮生长因子A
- EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的表达及相关性研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨沉默促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular re-ceptor,EphA2)与促血管生成因子(VEGF)蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及相关性。方法采用免疫组织化学技术检测EphA2、VEGF蛋白在69例喉鳞癌组织及15例癌旁黏膜组织中的表达,分析二者表达水平与临床病理特征的关系。结果 EphA2和VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的阳性率均高于癌旁黏膜组织(P均<0.05),EphA2蛋白表达尚与肿瘤原发部位相关(P<0.05),且EphA2和VEGF蛋白表达均与喉鳞癌患者的临床分期(P均<0.05)及转移(P均<0.05)密切相关,而二者表达与患者年龄、性别、组织学分级均无明显相关(P均>0.05)。喉鳞癌组织中EphA2及VEGF蛋白表达存在正相关性(P<0.05)。生存分析结果显示EphA2及VEGF蛋白表达水平与患者5年总生存率密切相关(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型进一步显示,淋巴结有无转移及EphA2蛋白表达水平为喉鳞癌患者预后的独立影响因素。结论 EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中表达均上调,提示二者可能存在相互作用,共同在喉鳞癌的发生、发展中起作用。
- 粟忠武刘勇余长云李果任舒灵张欣田勇泉邱元正
- 关键词：促血管生成因子喉肿瘤鳞状细胞
- 高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义被引量：4
- 2012年
- 目的检测高迁移率族蛋白1（HMGBl）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）组织中的表达，并探讨其表达与喉鳞癌临床病理特征和预后之间的关系。方法采用免疫组织化学技术检测HMGBl蛋白在93例喉鳞癌和15例癌旁黏膜组织中的表达，并分析其表达水平与临床病理特征和预后的关系。结果HMGBl蛋白在喉鳞癌组织中的阳性率（87．1％）显著高于癌旁黏膜中的阳性率（46．7％，P=0．001），且其表达水平与喉鳞癌的T分期（X^2=10．878，P=0．004）、临床分期（X^2=21．115，P〈0．01）、转移（X2=28．298，P〈0．01）及复发（X^2=14．923，P=0．001）密切相关。Kaplan-Meier生存分析显示，HMGBl高表达组、中表达组和低表达组患者的5年无瘤生存率分别为27．8％、43．9％和91．7％，5年总生存率分别为38．9％、68．3％和91．7％，差异均有统计学意义（X^2=13．815，P=0．001；X2=11．912，P=0．003）。单因素及多因素Cox比例风险回归模型分析显示，HMGBI蛋白表达水平和淋巴结转移情况为喉鳞癌患者预后的独立影响因素。结论HMGBl蛋白在喉鳞癌组织中表达显著升高，且其高表达与喉鳞癌患者的预后密切相关。HMGBl可能在喉鳞癌的发生、发展中有重要作用．有可能成为评估喉鳞癌患者预后的重要分子标志物。
- 刘勇谢丛良邱元正田勇泉张欣黄东海周小娟谭平清余长云柒琳李波肖健云
- 关键词：喉肿瘤肿瘤鳞状细胞HMGB1蛋白肿瘤转移
- 高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌组织及血清中的表达及意义
- 2012年
- 目的研究高迁移率族蛋白1（highmobilitygroupbox-1，HMGBl）mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）组织及患者血清中的表达及其临床意义。方法反转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Westernblot分别检测HMGBlmRNA及蛋白在30例喉鳞癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HMGBl蛋白在喉鳞癌患者及正常志愿者血清中的表达。结果RT．PCR结果示HMGBlmRNA（HMGBl／GAPDH）在喉鳞癌组织、癌旁黏膜组织中的相对表达量（x±s）分别为1．25±O．12、0．32±0．04，差异有统计学意义（t=40．27，P〈0．05）；Westernblot结果示HMGBl蛋白（HMGBl／β-actin）在喉鳞癌和癌旁黏膜组织中的相对表达量分别为1．294-0．10、0．34±O．03，两组问差异有统计学意义（t=49．84，P〈0．05）。结果显示HMGBlmRNA和蛋白的表达水平与患者的T分级、临床分期、有无淋巴转移及是否吸烟有关（P值均〈0．05）；而与年龄、性别、是否饮酒及肿瘤病理分级无关（P〉0．05）。ELISA结果显示，喉鳞癌患者及正常志愿者血清中HMGBl质量浓度分别为（24．80±14．08）ng／ml、（23．58±14．69）ng／ml，差异无统计学意义（t=0．37，P〉0．05）。结论HMGBlmRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织，且表达水平与T分级、临床分期及有无淋巴转移有关。
- 郭莹刘勇谭平清李果粟忠武田勇泉邱元正
- 关键词：喉肿瘤
- 放射线照射诱导鼻咽癌细胞上皮-间质转化的作用研究被引量：10
- 2013年
- 目的体外实验探讨放射线照射对鼻咽癌细胞上皮-间质转化的影响。方法采用梯度递增放射线照射筛选构建鼻咽癌CNE-2放疗抵抗细胞（CNE-2withradioresistance，CNE-2-Rs），并通过CCKH8法、克隆形成实验、流式细胞术验证CNE-2-Rs细胞的放疗抵抗性。显微镜下观察照射过程中，CNE-2细胞的形态学改变；Westernblot检测不同照射时期CNE-2细胞上皮细胞标志物钙黏蛋白和间质细胞标志物波形蛋白的表达情况。结果CCK-8结果表明，CNE-2-Rs细胞在同-时间点（第4天）不同照射剂量（4、6、8Gy）以及同-照射剂量（4Gy）不同时间点（2～5d）下的存活率均高于其亲本细胞（P值均〈0．05）；4Gy放射线照射前细胞增殖能力基本-致，放射线照射后CNE-2增殖能力明显低于CNE-2-Rs；CNE-2-Rs细胞放射线处理后，集落形成能力强于亲本细胞（P值均〈0．05）；拟合多靶单击模型和线性二次模型细胞存活曲线，结果表明，平均致死剂量（meanlethaldose，D0）、准阈剂量（quasi—thresholddose，Dq）、2Gy细胞存活分数（survivalfraction，SF2）和平均灭活剂量（meaninactivationdose，MID）增加，α和α/β值减少（P值均〈0．05）；CNE-2-Rs细胞接受4Gy射线后，相对于CNE-2细胞出现s期、G2期细胞比例增多（P值均〈0．05）。CNE-2-Rs细胞在形态上出现呈梭形、伪足伸出和细胞间连接变松散等上皮-间质转化形态学改变。照射总剂量达24Gy后，CNE-2细胞钙黏蛋白表达下调和波形蛋白表达升高（P值均〈0．01）。结论鼻咽癌细胞在放射线照射过程中出现典型的上皮-间质转化形态学及分子标志物改变，提示上皮-间质转化可能在鼻咽癌放疗抵抗中发挥了重要作用。
- 李果刘勇粟忠武任舒灵刘超田勇泉邱元正
- 关键词：上皮间质转化辐射耐受性
- EGCG调控TGF—β1诱导头颈鳞状细胞癌细胞上皮一间质转化的实验研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocaechin-3-gallate，EGCG）对重组人转化生成因子p1（transforming growth factor—β1，TGF-β1）蛋白诱导的头颈鳞癌细胞上皮一问质转化的影响及其分子机制。方法5ng／mlTGF—β1作用于头颈鳞癌Tu686细胞24h后，再加入浓度为20μmo／L的EGCG处理24h，观察其上皮一间质转化的形态学改变；5ng／mlTGF-β1作用24h后，加入不同浓度（0、10、20、30μmol／L）EGCG作用24h，反转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot检测上皮细胞标志物钙黏蛋白（E—cadhefin）、间质细胞标志物波形蛋白（Vimentin）及TGF-β1信号通路抑制性蛋白Smad7的表达；20μmol／LEGCG作用于5ng／mlTGF—β1处理过的Tu686细胞，于不同的时间点（6、12、24h）收集细胞，检测E—cadherin及Vimentin的表达。结果TGF-β1能诱导头颈鳞癌Tu686细胞发生上皮一间质转化形态学及分子水平改变，E—cadherin表达下调、Vimentin的表达增强，TGF-β1信号通路抑制性蛋白Smad7表达下调；EGCG能有效抑制TGF-β1诱导的上皮一问质转化过程，能促进E-cadherin表达上调、Vimentin表达下降及Smad7表达升高。结论EGCG能有效抑制TGF-β1诱导的头颈鳞癌Tu686细胞发生的上皮一间质转化过程，且该抑制作用可能与TGF-β1信号通路中抑制性因子Smad7的表达升高有关。
- 皮雷鸣刘勇余长云蔡耿明黄东海邱元正田勇泉张欣
- 关键词：鳞状细胞
- 泛素在伴颈淋巴结转移的喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义
- 2013年
- 目的:检测伴(N+)和不伴(N-)颈部淋巴结转移的喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中泛素的表达情况,探讨其与LSCC颈部淋巴结转移及其他病理参数的相关性。方法:通过免疫组织化学技术结合中国体视学图像分析系统检测泛素在19例LSCC(N+)与20例LSCC(N-)组织的表达水平并作t检验、方差分析、ROC曲线等统计学分析。结果:泛素在LSCC(N+)与LSCC(N-)中的表达差异有统计学意义(P<0.01);其表达水平与是否伴颈部淋巴结转移有关,与年龄、烟酒嗜好史、临床分期、原发部位等均无关。结论:泛素在LSCC(N+)中的表达明显上调,提示其可能是参与LSCC发生淋巴结转移的重要分子之一。
- 蔡耿明朱刚才刘勇余长云谭浩蕾邱元正张欣黄东海
- 关键词：喉鳞状细胞癌泛素淋巴结转移
- miRNA-324-3p及其靶基因WNT2B在鼻咽癌组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨miRNA-324-3p及其靶基因WNT2B在鼻咽癌组织中的表达和临床意义。方法:qRTPCR技术检测miRNA-324-3p、WNT2BmRNA的相对表达量,Western blot技术检测WNT2B蛋白在39例鼻咽癌组织及21例鼻咽非肿瘤上皮组织中的表达,分析其表达水平与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果:在鼻咽癌组织中miRNA-324-3p的相对表达量显著下调(P<0.01),WNT2BmRNA和蛋白的相对表达量则显著上调(均P<0.01)。鼻咽癌组织中miRNA-324-3p与WNT2BmRNA及蛋白的表达呈负相关,WNT2BmRNA与蛋白的表达呈正相关(均P<0.05)。miRNA-324-3p、WNT2BmRNA及蛋白的表达均与鼻咽癌患者T分级、临床分期及淋巴结转移密切相关(均P<0.05),而与患者的性别、年龄无明显相关性(均P>0.05)。结论:鼻咽癌组织中miRNA-324-3p的表达下调,WNT2B的表达上调,两者可能存在相互关系,共同介导鼻咽癌的发生、发展。
- 刘超李果刘勇粟忠武任舒灵邓腾波田勇泉邱元正
- 关键词：鼻咽肿瘤基因
- EphA2调控头颈部鳞状细胞癌血管新生及转移的体内实验被引量：3
- 2012年
- 目的 研究EphA2对头颈部鳞状细胞癌（简称鳞癌）血管新生及颈淋巴转移的影响.方法 利用慢病毒介导的短发夹RNA（ short hairpin RNA,shRNA）沉默EphA2在高转移性头颈鳞癌细胞株M2中的表达,嘌呤霉素筛选稳定克隆,反转录PCR及Western blot技术检测EphA2沉默效果；构建头颈鳞癌高转移动物模型,通过HE染色验证其成瘤及颈淋巴转移情况；免疫组织化学技术检测移植瘤微血管密度,Western blot技术检测移植瘤标本中EphA2及血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况.结果 筛选出EphA2基因稳定沉默的M2细胞（定义为M2 EphA2 RNA＋即实验组）,并成功构建头颈鳞癌高转移动物模型,成瘤率达100％.25 d后,实验组移植瘤体积为（430.7±190.0） mm3（x±s,以下同）较对照组的（1179.0 ±289.4） mm3明显减少（t =5.597,P＜0.01）,质量显著减轻（t=-4.560,P＜0.05）,且双侧颈淋巴转移率明显降低（Mann-Whitney U=10.0,P＜0.05）.Western blot 显示实验组移植瘤组织中EphA2及VEGF蛋白表达显著下调,免疫组织化学技术发现实验组瘤体微血管密度为（4.74±0.67）个/视野,显著少于对照组的（14.17±0.59）个/视野（t=26.751,P＜0.01）.结论 EphA2沉默能抑制头颈部鳞癌细胞的生长及转移,并能明显减少头颈部鳞癌组织内的肿瘤新生血管,且该肿瘤新生血管的抑制可能与促血管生成因子VEGF的减少有关.
- 刘勇张欣余长云邱元正黄东海周小娟谭平清肖健云田勇泉
- 关键词：头颈部肿瘤鳞状细胞EPHA2新生血管化病理性
- 星形胶质细胞上调基因1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义被引量：4
- 2013年
- 目的检测星形胶质细胞上涮基因1（AEG-1）在喉鳞状细胞癌（鳞癌）组织中的表达，并探讨其表达与喉鳞癌临床病理特征和预后之间的关系。方法逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定AEG-1mRNA在13对配对喉鳞癌及癌旁黏膜组织中的表达。同时，免疫组织化学技术检测AEG-1蛋白在88例喉鳞癌及15例癌旁黏膜组织中的表达，并统计分析其表达水平与临床病理特征及预后的关系。结果AEG-1蛋白在15例癌旁黏膜组织中仅呈阴性或弱阳性表达；AEG-1mRNA在喉鳞癌组织中的相对表达量较癌旁黏膜显著升高（0．81±0．17比0．23±0．10；t=10．337，P〈0．01）；88例喉鳞癌组织中，AEG-1蛋白的阳性表达率为87．5％（77／88）。且AEG-1蛋白表达水平与喉鳞癌患者T分期（X^2=6．289，P=0．018）、临床分期（X^2=11．049，P〈0．01）、转移（X^2=20．859，P〈0．01）及术后复发（X^2=13．459，P〈0．01）密切相关。生存分析显示AEG-1蛋白高表达组与低表达组患者5年总生存率分别为35．9％与86．4％，差异具有统计学意义（X^2=23．409，P〈0．01）；多因素分析示AEG-1蛋白表达水平为喉鳞癌患者预后的独立影响因素（P=0．016）。结论AEG-1蛋白可能在喉鳞癌的发生、发展中发挥了重要作用，对喉鳞癌患者的预后具有评估价值。
- 刘勇李果粟忠武邱元正张欣余长云周小娟任舒灵黄东海田勇泉
- 关键词：喉肿瘤鳞状细胞肿瘤转移
