沈阳市科技计划项目(F10-191-8-00)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 相关作者：刘赵阳李珠付佳王丽杨丹更多>>
- 相关机构：沈阳医学院沈阳医学院奉天医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 棉酚通过Akt/β-catenin通路抑制胃癌细胞迁移被引量：7
- 2015年
- 目的探讨棉酚(gossypol)对胃癌细胞迁移能力的影响,并探讨相关机制。方法胃癌细胞经不同浓度棉酚处理后,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测丝/苏氨酸激酶/β-链蛋白(Akt/β-catenin)信号通路活性及相关蛋白细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、E-钙黏蛋白(Ecadherin)和波形蛋白(vimentin)的蛋白表达水平。结果MTT实验显示,棉酚对胃癌细胞具有增殖抑制作用,且随浓度增加而增大;Transwell小室实验显示棉酚对胃癌细胞迁移能力具有抑制作用;棉酚对胃癌细胞迁移能力的抑制率高于增殖抑制率;与对照组相比,棉酚可明显下调胃癌细胞的pAkt、β-catenin、cyclin D1、MMP-2和vimentin蛋白表达水平,明显上调E-cadherin蛋白表达水平。结论棉酚通过下调Akt/β-catenin通路活性抑制胃癌细胞迁移。
- 杨丹王丽李珠刘赵阳刘畅郭丽付佳祁荣王俊平
- 关键词：棉酚胃癌Β-链蛋白细胞周期蛋白D1E-钙黏蛋白波形蛋白
- 抗Ⅳ型胶原荧光抗体的制备及性质研究
- 2015年
- 目的采用异硫氰酸荧光素标识Ⅳ型胶原单克隆抗体,为直接或间接荧光方法检测人体肝脏或血液中Ⅳ型胶原含量奠定基础。方法采用直接透析方法进行荧光素标识,标识后通过Sephadex G25凝胶过滤,除去多余的荧光素和其他杂质,获得标识荧光抗体纯品。经SDS-PAGE和双向免疫扩散凝胶电泳,对标识抗体进行纯度,荧光特性,抗体特异性进行检测鉴定。结果经全自动化学发光荧光图像分析仪检测SDSPAGE电泳结果,激发波490nm,发射波510nm,在150KD处有一条黄绿荧光带,其他处未见条带出现,凝胶图像分析仪检测纯度达96%;免疫琼脂双向扩散电泳结果显示,标识抗体与未标识抗体与抗原之间均有乳白色沉淀线,且沉淀物含量一致,荧光分析仪检测标识抗体与中心孔之间有黄绿色荧光条带。结论采用本研究方法制备的荧光抗体具有纯度高、荧光性好、特异性强等特点,为临床检测人体Ⅳ型胶原含量提供便利。
- 吴鹏王英皎孟丽红高诗博徐军
- 关键词：荧光抗体荧光素FITC
- 胡桃醌对胶质瘤细胞株U-87MG迁移、侵袭能力的抑制作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨肽基脯酰胺顺反异构酶Pin1(peptidyl-prolyl isomerase 1)抑制剂胡桃醌(Juglone)对胶质瘤细胞U-87 MG迁移、侵袭能力的影响并探讨相关机制。方法胶质瘤细胞株U-87 MG经0、0.8、1.6和3.2μmol·L-1胡桃醌处理后,以细胞划痕实验检测细胞迁移能力,transwell小室实验检测细胞侵袭能力,western blot法检测β-链蛋白(β-catenin)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的蛋白表达水平。结果细胞划痕实验结果显示1.6μmol·L-1和3.2μmol·L-1胡桃醌组U-87 MG细胞划痕创面愈合率分别为46.04%±6.25%和30.05%±13.35%,与0μmol·L-1组比较明显下降(P<0.05);transwell小室实验结果显示1.6μmol·L-1和3.2μmol·L-1胡桃醌组穿膜细胞数平均为(103.67±5.69)个和(77.33±7.77)个,与0μmol·L-1组比较明显减少(P<0.05);western blot实验结果显示胡桃醌可显著下调U-87 MG细胞β-catenin、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,作用随浓度增加而增大。结论胡桃醌可通过下调β-catenin及其下游MMP-2、MMP-9和VEGF的蛋白表达而抑制胶质瘤细胞迁移、侵袭能力。
- 杨丹王丽李珠刘赵阳孙燕郭丽付佳祁荣王俊平
- 关键词：胡桃醌胶质瘤Β-链蛋白血管内皮细胞生长因子基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9
- Ⅳ型胶原多克隆抗体的制备及性质研究被引量：2
- 2014年
- 目的通过免疫母鸡制备抗人Ⅳ型胶原多克隆抗体(IgY),为检测人血清Ⅳ型胶原含量提供IgY。方法采用人胎盘来源的Ⅳ型胶原蛋白作为抗原,免疫Leghorn母鸡,采用PEG方法分离纯化鸡卵黄中的抗体,获得抗体粗提物。经Sephadex G100凝胶过滤制备多克隆抗体纯品。使用SDS-PAGE、免疫琼脂双向扩散等方法对提取物的含量、纯度及特异性进行鉴定。结果电泳结果显示,抗体粗提物纯度为81%。抗体纯品仅在70kd和25kd处各有一条带,纯度达到96%;免疫琼脂双向扩散实验结果显示,抗体纯品、粗品及免疫三周后鸡血清均与中心孔的抗原形成抗原抗体复合物的乳白色沉淀线。结论本研究分离纯化方法制备的抗Ⅳ型胶原IgY,具有抗体纯度高、特异性强等特点,为多克隆抗体广泛应用奠定了基础。
- 吴鹏王英娇高诗博徐军
- 关键词：IGY多克隆抗体
