国家自然科学基金(30160010)
- 作品数：12 被引量：75H指数：6
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- 相关机构：宁夏大学西北农林科技大学内蒙古科技大学更多>>
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- 外源蛋白定位马铃薯淀粉粒表达载体的构建被引量：4
- 2009年
- [目的]研究外源蛋白定位马铃薯淀粉粒表达载体的构建,为解决从植物中分离外源蛋白成本高及表达量低的产业化核心问题提供参考。[方法]利用RT-PCR、巢式PCR等分子生物学技术,构建使外源蛋白定位表达于马铃薯淀粉粒的植物表达载体。[结果]克隆获得GBSSI定位表达于马铃薯淀粉粒的编码序列(GC20);通过连接、转化和酶切鉴定筛选出马铃薯块茎专一性启动子GBSSI启动子驱动GC20的植物表达载体。[结论]该研究结果为进一步在马铃薯淀粉粒上筛选外源蛋白奠定了基础。
- 李珺马力通姚新灵
- 关键词：外源蛋白植物生物反应器GBSSI淀粉粒
- 马铃薯反义SSU原核表达载体的构建及其对大肠杆菌糖原合成的影响
- 2007年
- [目的]为了鉴定马铃薯反义SSU的功能。[方法]利用分子生物学技术,构建了马铃薯反义SSUcDNA原核表达载体(pE-aS),通过0.1mol/LIPTG诱导pE-aS在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,测定糖原的相对含量。[结果]经连接、转化和酶切鉴定筛选出重组表达载体pE-aS,而pE-aS转化BL21(DE3)获得重组菌株BL21-aS。经IPTG诱导的BL21-aS糖原含量OD值为0.409,显著低于对照菌株BL21(DE3)和未经IPTG诱导的BL21-aS,而对照菌株BL21(DE3)和未经IPTG诱导的BL21-aS的糖原含量OD值差异不显著。这表明反义SSU在BL21内表达能够抑制glgC编码的AGPase的形成,从而减少其糖原合成量。[结论]该研究为构建马铃薯反义SSU植物转化载体奠定了基础。
- 万巧凤姚新灵丁海麦
- 关键词：AGPASE原核表达载体糖原
- 马铃薯不同基因型直链淀粉含量比较分析被引量：9
- 2004年
- 分离提取了 12 6个马铃薯品种 (系 )基因型的块茎内源淀粉 ,用Hovenkamp HermelinkJ .H .M的方法测定了其直链淀粉含量 ,用ANOVA比较分析了块茎成熟期基因型和品种基因型的直链淀粉含量 ,其基本结论是品种基因型间直链淀粉含量存在极显著差异 ,而成熟期基因型间直链淀粉含量不存在差异 ,该结论为淀粉品质改良提供基本依据和数据。
- 姚新灵丁向真陈彦云容晓娟郭建峰
- 关键词：直链淀粉含量品种基因型马铃薯品种块茎淀粉品质
- SAGP基因克隆及反义表达载体的构建
- 2007年
- 为了研究不同启动子驱动的反义SAGP抑制内源ADP-Glc PPase小亚基编码基因表达的效果,创造适于外源基因表达的突变体,利用RT-PCR方法,由马铃薯块茎cDNA克隆获得ADP-Glc PPase小亚基编码基因(SAGP)的1 821 bp cDNA。核酸数据库检索和序列比对分析表明,已克隆的SAGP基因cDNA推测编码607个氨基酸组成的多肽,其中第312和411的天冬酰氨均突变为丝氨酸。以pCambia为基础,分别构建了CaMV35S和GBSSI块茎启动子驱动的小亚基cDNA反义结构植物表达载体。
- 姚新灵万巧风陈彬李珺丁海麦狄建军郭蔼光
- 关键词：基因克隆启动子
- 马铃薯表观淀粉含量与直链淀粉含量相关性研究被引量：12
- 2005年
- 测定了48个不同马铃薯品种表观淀粉含量以及块茎中和淀粉中直链淀粉含量,对表观淀粉含量和块茎中直链淀粉含量间,表观淀粉含量和淀粉粒直链淀粉含量间进行了相关分析。结果表明:表观淀粉含量和块茎中直链淀粉含量间相关显著,表观淀粉含量和淀粉粒直链淀粉含量间相关不显著,且中熟和晚熟基因型表观淀粉含量和淀粉粒直链淀粉含量间相关也不显著,这些结论将为淀粉生物合成的理论研究和淀粉品质改良提供基本的表型数据。
- 姚新灵丁向真陈彦云吴林科吴兵吴艳帆郭蔼光
- 关键词：马铃薯直链淀粉含量块茎淀粉粒
- 淀粉分支酶和去分支酶编码基因的功能被引量：20
- 2005年
- 淀粉分支酶(SBE)和淀粉去分支酶(DBE)是直接参与淀粉生物合成的5类酶中的2类关键酶,前者催化α(1-6)糖苷键分支点形成支链淀粉,后者水解葡萄糖苷链中α(1-6)糖苷键。文章概述了已克隆的编码SBE和DBE同种型编码基因及其在体内外的表达特征,并提出DBE多聚体酶的结构和功能将成为淀粉粒起始形成研究中的起点,SBEI和SBEII表达调控是支链淀粉分子改良的途径的看法。
- 姚新灵丁向真陈彦云吴晓玲郭蔼光
- 关键词：淀粉分支酶编码基因支链淀粉分子改良淀粉粒多聚体
- 马铃薯匍匐茎生长不同阶段淀粉酶活力比较研究被引量：1
- 2007年
- 测定匍匐茎内淀粉酶活力是否存在及其变化是鉴定马铃薯匍匐茎内是否有淀粉合成发生的途径之一。本研究以不同成熟期马铃薯品种、不同生长时期匍匐茎为试验材料,测定其淀粉酶活力。数据分析表明:早熟品种匍匐茎较早表现较高淀粉酶的活性,其后随着匍匐茎的生长逐渐平稳或下降,晚熟品种匍匐茎较晚出现淀粉酶的活性,其后随着匍匐茎的生长逐渐升高;就同一成熟期品种而言,从匍匐茎基部至顶端其淀粉酶活力逐渐上升;研究结果表明,匍匐茎生长期间其内部存在淀粉的生物合成,不同成熟期品种匍匐茎生长不同时期和不同部位淀粉酶活力存在差异。
- 姚新灵李卓亚柳金凤贾惠萍丁海麦狄建军
- 关键词：匍匐茎淀粉酶活力马铃薯
- 马铃薯AGPase大小亚基功能研究被引量：6
- 2004年
- 马铃薯 1,6 二磷酸腺苷葡萄糖焦磷酸化酶 (AGPase)是淀粉合成的限速酶 ,该酶有大、小两个亚基形成异源四聚体。总结了迄今为止已克隆的马铃薯AGPase大、小亚基编码基因、小亚基和底物结合位点的识别、以及大亚基异构调控因子结合位点识别的研究结果 ,提出了大小亚基非自然重组是深入研究AGPase的途径 ,建立体内条件下高效可靠代谢调控研究手段是AGPase研究所必需的。
- 姚新灵丁向真吴晓玲郭蔼光
- 关键词：马铃薯淀粉合成焦磷酸化酶限速酶AGP
- 外源蛋白定位马铃薯淀粉粒表达载体的构建被引量：11
- 2009年
- 1材料与方法
1．1材料马铃薯品系：郑1011。受体菌：大肠杆菌BL21。载体质粒pCambia1305—1购自TaKaRa公司；反转录试剂、TaqDNA聚合酶、T4DNA连接酶、限制性内切酶购自TaKaRa公司；DNA回收试剂盒Wizard PCR preps DNA Purification System购自Promega公司。
- 李珺马力通姚新灵
- 关键词：马铃薯蛋白定位TAQDNA聚合酶淀粉粒限制性内切酶
- 不同基因型马铃薯淀粉抗性的比较
- 2007年
- 用小麦淀粉酶和唾液淀粉酶酶解马铃薯淀粉,通过测定淀粉酶解混合物中可溶性糖的体积分数,研究马铃薯3种不同的基因型(早熟、中熟、晚熟)淀粉抗性的大小.结果表明:不同基因型马铃薯淀粉抗性具有极显著差异:早熟品种(NP10)<中熟品种(NP8)<晚熟品种(87-10).
- 姚新灵李志英李珺丁海麦狄建军张卓
- 关键词：马铃薯基因型抗性淀粉
