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利用发光细菌进行褐牙鲆中氯霉素残留快速检测的研究被引量：15: 2007年; 从青岛近海分离鉴定出1株鳆发光杆菌(Photobacterium leiognathi)YL,发光性质及其发光规律曲线的测定表明,鳆发光杆菌发光规律稳定,持续发光时间长,发光强度大。各种抗生素的抑菌圈试验得出,鳆发光杆菌YL对氨零素最敏感。在浓度0～1.0μg/L,氯霉素的浓度与鳆发光杆菌的抑制发光率有良好的线性关系。采用乙酸乙酯提取氯霉素的方法可以有效降低它族抗生素的干扰。褐牙鲆加标回收试验中,鳆发光杆菌检测氯霉素残留的方法检出限为0.14μg/kg。; 朱兰兰林洪王静雪王亚群梅册霞; 关键词：氯霉素发光细菌褐牙鲆

用于水产品中氯霉素残留检测的发光细菌的筛选被引量：2: 2008年; 从青岛近海分离鉴定出5株发光细菌,经过16SrDNA 测序及生理生化实验鉴定,分属明亮发光杆菌(DB)、鳆发光杆菌(YL)、哈维弧菌(BA)、灿烂弧菌(GQ)、费氏弧菌(GX)。发光性质及其发光规律曲线的测定表明,鳆发光杆菌和明亮发光杆菌发光规律稳定,持续发光时间长,发光强度大。所得鳆发光杆菌、哈维弧菌、灿烂弧菌、费氏弧菌的发光规律曲线国内未见报道。进行了各菌种的氯霉素抑菌圈实验,发现5株发光细菌对氯霉素都敏感,鳆发光杆菌 YL 最敏感。用发光细菌 YL 检测了南美白对虾中的氯霉素,其前处理方法比水产行标气相色谱法简便省时,乙酸乙酯提取氯霉素可以有效降低它族抗生素的干扰。发光细菌法检测南美白对虾的方法检出限为0.16μg/kg,低于气相色谱的0.30μg/kg。; 朱兰兰王静雪林洪王亚群王晶梅册霞; 关键词：氯霉素发光细菌

发光细菌法检测水产品中氯霉素体系的建立被引量：17: 2009年; 从青岛近海分离的多株发光细菌中筛选出1株对氯霉素敏感的鳆发光杆菌Photobacterium leiognathiYL,接种单菌落快速培养,制备出适宜检测的菌悬液,添加不同浓度的氯霉素溶液,研究氯霉素浓度与细菌发光强度抑制率之间的关系。通过控制菌体起始发光强度、菌液与氯霉素作用时间,建立发光细菌检测水产品中氯霉素体系。结果表明,当菌体的起始发光强度控制在(2.0～4.0)×105、菌液与氯霉素的最佳作用时间为30 min时,氯霉素浓度与细菌发光强度抑制率呈良好的线性关系。该方法的线性范围为0.1～1.0 ng/mL,相关系数R2为0.989,该体系对氯霉素的检测灵敏度可以达到0.1 ng/mL,可以作为水产品中痕量氯霉素残留的1种快速、灵敏的检测方法。在水产品的氯霉素加标回收试验中,鱼肉中添加浓度为0.1～1.0 ng/g时,回收率在40.34%～114.26%之间。; 王亚群王静雪林洪朱兰兰王高燕; 关键词：发光细菌水产品氯霉素

NADH荧光法快速检测细菌总数被引量：8: 2009年; 基于细菌胞内NADH的荧光特性及其在胞内含量稳定的特性,建立一种快速检测细菌总数的新方法。该荧光法的NADH检测限为1nmol/L,NADH含量在10nmol/L～0.2mmol/L间与荧光强度呈良好线性关系(R2=0.9905)。经离心获得菌体细胞,热Tris-HCl法提取胞内NADH,以342nm为激发波长,461nm为发射波长测定提取液荧光强度,1h内可检测到样品1×104CFU/mL菌数。结果表明该方法快速、灵敏、简便、重复性好,可适用于食品卫生与安全、环境检测等领域活细菌数量的定量检测。; 王晶王静雪林洪梅册霞; 关键词：NADH 荧光法细菌总数

Rapid Screening of chloramphenicol in Turbot with photobacterium phosphoreum DB被引量：1: 2009年; A new,simple,rapid microbial assay was put forward for the detection of chloramphenicol(CAP)residues in Turbot muscles using luminescent bacteria DB(Photobacterium phosphoreum)as test organ-ism.By the luminescence inhibition of DB,the concentrations of CAP were determined.CAP spiked inTurbot muscle tissues ranging from 0.5 to 100μg/kg was extracted using ethyl acetate and hexane.Themethod had a good recovery of 93.69% with a minimum detection limit of 0.65μg/kg.It can be per-formed within 30min following simple extraction.The method therefore proved to be advantageous overchromatographic procedures as it was inexpensive,quite sensitive and can be adopted for rapid screeningof CAP in Turbot tissues.; 朱兰兰Wang JingxueLin HongWang YaqunWang JingMei Cexia; 关键词：CHLORAMPHENICOL TURBOT

白毒鹅膏菌液体培养特性及不同生长时期胞外酶活性: 2009年; 用马铃薯葡萄糖琼脂液体培养基培养白毒鹅膏菌,测定培养过程中的pH变化、蛋白质含量2项生理指标与6种胞外酶的活性。结果表明:在整个培养过程中,6种胞外酶均有酶活,但不同酶的活性差异较大,产酶高峰也不尽相同,淀粉酶于第5d达到峰值(198U);羧甲基纤维素酶、微晶纤维素酶和滤纸纤维素酶的酶活变化趋势相近,分别为199、199、198U;愈创木酚氧化酶与邻苯二酚氧化酶的酶活分别在第10d、第11d达到峰值,分别为182、58U。蛋白含量和pH随时间变化,且与酶活力有关。; 吕新萍朱启忠董翠玲; 关键词：白毒鹅膏菌胞外酶

发光细菌DH132的筛选、鉴定及其在氯霉素生物毒性测定中的应用: 2007年; 利用药敏纸片法,从本实验室保存的发光细菌中筛选出一株对氯霉素敏感的细菌DH132。通过生理生化特征鉴定并利用16SrDNA序列分析的方法,鉴定细菌DH132为哈维氏弧菌。通过在细菌培养液中添加不同浓度的氯霉素溶液,研究了氯霉素浓度与细菌发光强度抑制率之间的关系。结果表明,当氯霉素浓度为80ng/mL和160ng/mL时,对细菌发光的抑制率分别达到10%和50%。氯霉素浓度在0~60ng/mL,60~140ng/mL,140ng/mL^200ng/mL和200~1000ng/mL之间,细菌发光抑制率与氯霉素浓度分别具有很好的线性关系。相对应的回归方程分别为y=0.0627x-0.0233;y=0.3599x-18.276;y=0.7527x-70.219;y=0.0195x+75.964,回归曲线R2值分别为0.9805,0.9918,0.9502和0.9731。; 杜宗军林瀚智王静雪池振明吴龙飞; 关键词：氯霉素发光细菌哈维氏弧菌毒性测定

细菌荧光素酶体外发光体系的建立及应用于NADH定量检测被引量：4: 2009年; 【目的】本研究旨在建立鳆发光杆菌(Photobacterium leiognathi)YL荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系,并对荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系应用于NADH的定量检测进行初步探索。【方法】利用从鳆发光杆菌提取并经部分纯化的荧光素酶和FMN-NADH氧化还原酶,通过优化体系中各底物的添加量,实现荧光素酶的体外发光。【结果】荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系为:1mL酶液中添加100μL十二烷醛(27mmol/L)、0.5μLFMN-Na(10mmol/L)、300μLNADH(0.14mmol/L)。NADH与荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体系的发光强度呈良好的线性关系,其线性范围为1.0×10-10～1.0×10-8mol/L。【结论】荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系可以简便、灵敏、快速的定量检测NADH,为其进一步应用于环境检测、食品卫生与安全等领域活细菌数量的检测奠定了基础。; 梅册霞王静雪林洪王晶; 关键词：荧光素酶 NADH

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国家自然科学基金(30500384)