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江苏省自然科学基金(BK2010135)
作品数:
2
被引量:15
H指数:2
相关作者:
黄丹
顾恒
齐蓓
陈旭
任发亮
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相关机构:
中国医学科学院北京协和医学院
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发文基金:
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中波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞自噬对凋亡影响的初步研究
被引量:12
2012年
目的探讨不同剂量中波紫外线(UVB)照射人皮肤成纤维细胞诱导的自噬对细胞凋亡活性的影响。方法人皮肤成纤维细胞来自于23岁健康男性环切术后包皮的原代培养,连续传代培养后取第3~10代的细胞进行实验。通过单丹酰戊二胺(MDC)染色和免疫荧光标记微管相关蛋白1轻链3(LC3)的方法,确定不同剂量3-甲基腺嘌呤(3-MA)对自噬的抑制作用。UVB照射后立即加入0.5mmol/L3-MA孵育细胞4h作为自噬的抑制方法。Hoechst和碘化丙啶(PI)染色结合AnnexinV-异硫氰酸荧光素(FITC)和PI标记细胞后流式细胞仪检测作为细胞凋亡的定性和定量方法。结果0.5mmol/L3-MA能明显抑制人皮肤成纤维细胞自噬活性(饥饿诱导组自噬细胞阳性百分数为63.037%±5.876%,3-MA孵育后下降至34.425%±5.183%)。空白对照组、30、50、100mJ/cm。UVB照射组标记LC3绿色荧光信号逐渐增强,照射后立即对上述4组加入3-MA孵育4h则LC3蛋白表达差异不明显。0.5mmol/L3-MA对细胞活性影响最小。50mJ/cmzUVB照射下加入3-MA孵育较未加3-MA孵育细胞强Hoechst和强PI双染细胞增多;100mJ/cm2UVB照射后加3-MA孵育较未加3-MA孵育细胞强Hoechst和强PI双染细胞减少。AnnexinV—FITC和PI标记细胞后流式细胞仪分析显示,在50mJ/cmzUVB照射下,抑制自噬的细胞中晚期凋亡水平[(10.933±0.839)%]较未抑制细胞[(7.267±0.473)%]上升,两者之间差异具有统计学意义(t=5.20,P〈0.05);而在100mJ/cmzUVB照射下,抑制自噬的细胞中晚期凋亡水平[(7.100±0.781)%]较未抑制细胞[(10.133±0.681)%]下降,两者之间差异具有统计学意义(t=6.29,P〈0.05)。结论50mJ/cm。UVB照射诱导人皮肤成纤维细胞自噬通过抑制凋亡对细胞起到保护作用,而在100mJ/cm。UVB照射下发生的较高水平自噬可能诱导了自噬.I生细�
陈旭
张青松
鞠梅
任发亮
黄丹
齐蓓
陈崑
常宝珠
李新宇
顾恒
关键词:
紫外线
成纤维细胞
自噬
皮肤免疫系统与光致癌
被引量:3
2011年
随着全球环境的剧烈变化,人类生存活动受到紫外线照射的威胁日益加剧,特别是皮肤光致癌已成为迫切需要关注的问题.光致癌(photocarcinogenesis)指由于长期接受紫外线照射而引发皮肤恶性肿瘤,主要包括鳞状细胞癌、基底细胞癌和恶性黑素瘤等.
陈旭
齐蓓
黄丹
顾恒
关键词:
皮肤免疫系统
皮肤恶性肿瘤
鳞状细胞癌
恶性黑素瘤
基底细胞癌
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