国家自然科学基金(30500414)
- 作品数：21 被引量：68H指数：5
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- 白介素-6在关节软骨退变中的表达及意义被引量：2
- 2008年
- 目的研究骨性关节炎（osteoarthritis,OA）软骨组织中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）的基因表达及其在OA发病机制中的意义。方法选取OA患者6例和创伤性截肢患者5例的膝关节关节软骨组织,HE染色、光镜观察OA软骨组织的病理学特征;提取关节软骨组织的总RNA和蛋白质,RT-PCR和Western印迹杂交方法测定软骨组织中IL-6 mRNA和蛋白质的表达。结果OA软骨组织表面粗糙不平,软骨细胞排列紊乱,数目减少,有细胞成簇现象,可见软骨细胞变性、坏死,软骨厚度变薄,基质染色不均匀,有异染性。本研究中OA患者及健康青年人软骨组织中均有IL-6基因转录和翻译水平的表达;与健康青年组比较,OA患者软骨组织内IL-6 mRNA和蛋白质的表达分别升高88%和160%,两组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论IL-6在OA软骨中呈高水平的基因及蛋白表达状态,IL-6基因的差异表达可能是骨关节软骨退变的机制之一。
- 郭磊赵玉岩朱世博张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：骨性关节炎白细胞介素6基因表达
- 维甲酸调控IGF-2基因对软骨细胞促凋亡的作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨维甲酸对软骨细胞凋亡的影响及细胞内IGF-2的表达规律。方法1月龄雄性中国白兔1只,体重约500g。取兔双膝关节股骨髁软骨,采用胰酶消化法体外培养白兔软骨细胞。取第2代软骨细胞,培养液内加入终浓度为1×10-6mol/L的全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)25μL(实验组),作用24h;对照组加入25μLDMEM液作为对照。采用细胞免疫组织化学法观察软骨细胞中Ⅱ型胶原的分泌变化,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率,RT-PCR半定量分析软骨细胞中IGF-2mRNA的表达,Western blot印迹杂交鉴定软骨细胞中IGF-2蛋白质表达。结果实验组ATRA抑制了软骨细胞中Ⅱ型胶原的表达。流式细胞仪检测实验组软骨细胞凋亡率为21%±2%,较对照组(5%±1%)增加了5倍;RT-PCR检测实验组IGF-2mRNA的表达为0.2±0.1,较对照组(0.8±0.2)降低75%;Western blot印迹杂交分析发现,实验组软骨细胞IGF-2的表达为0.3±0.1,较对照组(0.7±0.2)降低了57%;各指标组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论维甲酸可能通过抑制软骨细胞靶基因IGF-2的表达,负性调节软骨细胞分泌和增殖功能,促进软骨细胞凋亡。
- 郭磊赵玉岩张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：维甲酸软骨细胞凋亡IGF-2基因表达
- 维甲酸对软骨细胞的凋亡及其IGFBP-6表达的影响
- 2008年
- 目的探讨维甲酸对软骨细胞凋亡功能的影响及细胞内胰岛素样生长因子结合蛋白6(insulin-like growthfactor binding protein 6,IGFBP-6)的表达规律。方法胰酶消化法体外培养兔的软骨细胞;全反式维甲酸(ATRA)作用软骨细胞株;细胞免疫化学观察软骨细胞中Ⅱ型胶原的合成和分泌变化;流式细胞仪检测软骨细胞株细胞凋亡率;采用RT-PCR半定量分析软骨细胞中IGFBP-6 mRNA的表达;应用Western印迹杂交鉴定软骨细胞中IGFBP-6蛋白质的表达。结果1×10-6mol/L剂量的ATRA作用软骨细胞24 h,ATRA抑制了软骨细胞中Ⅱ型胶原的分泌;1×10-6mol/L剂量的ATRA使软骨细胞凋亡率增加250%,出现明显亚二倍体峰(凋亡细胞峰),差异有统计学意义(P<0.05);ATRA使软骨细胞中IGFBP-6 mRNA和蛋白质的表达分别增加了128%和195%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论维甲酸负性调节软骨细胞分泌功能,促进软骨细胞凋亡;维甲酸可能通过调控靶基因IGFBP-6的基因转录和翻译,发挥对软骨细胞的促凋亡作用。
- 郭磊赵玉岩朱世博张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：维甲酸软骨细胞基因表达
- CA-P／AZ31B镁合金的生物相溶性研究被引量：12
- 2009年
- 将具有磷酸钙(CA-P)表面涂层的AZ31B镁合金植入家兔的骨骼和肌肉组织间,观察了体内CA-P/AZ31B合金周围骨骼、肌肉组织的炎性反应,以及CA-P/AZ31B合金的微观结构,评价了CA-P/AZ31B合金的细胞毒性作用及溶血性。结果表明,CA-P涂层可有效地延缓AZ31B镁合金降解产物的释放速度,增加合金的表面粗糙度,减轻合金在体内诱导的组织炎性反应,显著降低合金的溶血率。CA-P/AZ31B合金具有良好的生物相容性,有望成为新一代可降解生物医学材料。
- 郭磊刘魁张世亮高晓宇黄晶晶杨柯
- 关键词：镁合金磷酸钙炎性反应
- 二噁英致大鼠先天骨骼发育畸形中软骨细胞的病理学改变被引量：2
- 2008年
- 目的探讨大鼠骨骼发育过程中环境类致畸因子对大鼠骨骼发育的先天性致畸作用。方法应用不同剂量的环境类致畸因子—二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)构建先天性Wistar大鼠骨骼发育畸形动物模型;茜素红染色法制作并观察透明骨骼标本;采用光镜和透射电镜观察胎鼠趾骨骨化中心的软骨细胞病理学变化及细胞超微结构的改变。结果TCDD在5～15μg/kg浓度下诱导了大鼠骨骼发育畸形,畸形包括:内翻足、脊柱裂、腭裂、无尾畸形等,并存在剂量依赖性生物学效应;光镜下可见在畸形胎鼠的肢端骨化中心软骨发生带缩小,软骨细胞变性。透射扫描电镜下见软骨细胞核内粗面内质网扩张,核基质降解,线粒体嵴不规则。结论在高雌激素水平下,TCDD可以诱导大鼠骨骼发育畸形;TCDD可能通过干扰软骨细胞的形态和功能代谢,引起原发性骨化中心的结构紊乱而发挥骨骼致畸效应。
- 郭磊赵玉岩张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：二噁英骨发育软骨细胞
- 下丘脑中增食欲素在大鼠急性低血糖应激中的表达研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究急性葡萄糖水平的下降对大鼠下丘脑组织中增食欲素(Orexin)的调节作用。方法应用单次皮下注射胰岛素并伴(或不伴)禁食的方法,构建急性低血糖大鼠模型。检测外周血中葡萄糖和胰岛素水平的变化规律。采用原位杂交方法鉴定下丘脑组织中Orexin mRNA的定位表达。应用实时定量PCR和Western印迹杂交分析检测下丘脑组织中Orexin mRNA和蛋白质在急性低血糖应激状态下的表达改变。结果下丘脑神经元细胞核中有Orexin mRNA表达。在低血糖伴禁食应激状态下,大鼠下丘脑Orexin mRNA表达明显增加3倍,Orexin的蛋白质表达明显增加2.5倍,差异有统计学意义(P<0.05)。但在低血糖伴进食状态下,Orexin基因表达无明显改变。结论急性血糖的降低将在基因转录和翻译水平增强大鼠下丘脑中Orexin的表达,而摄食行为可以抑制此调控效应。
- 赵玉岩郭磊都健刘国良
- 关键词：增食欲素下丘脑低糖血症进食基因表达
- 二噁英对成骨肉瘤细胞增殖和胰岛素样生长因子2表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨环境类致癌因子二噁英（TCDD）对成骨肉瘤细胞增殖及胰岛素样生长因子2（IGF-2）mRNA和蛋白表达的影响。方法TCDD作用于人成骨肉瘤细胞SaOS-2细胞株24-48h。MTT法检测细胞增殖率;对硝基酚磷酸盐法测定细胞内碱性磷酸酶（ALP）活性;RT-PCR半定量分析细胞IGF-2 mRNA的表达;Western蛋白质印迹法测定细胞IGF-2和丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号通路中p38 MAPK蛋白表达及其磷酸化水平。结果与对照组比较,TCDD 1,10和100nmol·L^-1作用48h,使SaOS-2细胞内ALP活性分别增加38%,95%和142%。TCDD 1,10及100nmol·L^-1作用24h后,SaOS-2细胞存活率分别增加21%,47%和56%,细胞内IGF-2 mRNA和IGF-2蛋白表达均增加。TCDD对SaOS-2细胞内p38 MAPK蛋白表达无明显影响,但明显降低其磷酸化水平。结论TCDD具有促进SaOS-2细胞增殖的作用。TCDD可能通过促进SaOS-2细胞内IGF-2的表达,并抑制MAPK信号通路中转录因子p38 MAPK活性而促进细胞增殖。
- 赵玉岩郭磊都健马冬杰田蕾
- 关键词：二噁英细胞增殖骨肉瘤胰岛素样生长因子2信号传导通路
- 骨性关节炎软骨细胞中胰岛素样生长因子Ⅱ表达的研究被引量：15
- 2009年
- 目的研究骨性关节炎(OA)软骨组织中细胞因子-胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的基因表达的变化规律。方法选取OA患者(6例)和创伤性截肢的患者(5例)的膝关节软骨组织,HE染色光镜观察OA软骨组织病理学特征。采用原位杂交方法定位软骨组织中IGF-ⅡmRNA的表达。提取关节软骨组织的总RNA和蛋白质,RT-PCR和Western印迹杂交方法测定软骨组织中IGF-ⅡmRNA和蛋白质的表达。结果OA软骨组织表面粗糙不平,软骨细胞排列紊乱,数目减少,有细胞成簇现象,可见软骨细胞变性、坏死,软骨厚度变薄,基质染色不均匀,有异染性。正常软骨细胞的细胞核与细胞浆中有IGF-ⅡmRNA的表达。与正常成人相比,OA患者软骨组织内IGF-Ⅱ在基因的转录与翻译水平明显降低了75%和63%(P<0.05)。结论细胞因子IGF-Ⅱ在OA软骨细胞中呈低表达状态。IGF-Ⅱ基因的差异表达可能是骨关节软骨退变的发生机制之一。
- 赵玉岩郭磊田蕾高晓宇刘魁
- 关键词：骨性关节炎软骨细胞基因表达
- 二噁英对成骨肉瘤细胞的凋亡及胰岛素样生长因子结合蛋白6表达的影响
- 2008年
- 目的探讨二噁英（TCDD）对调控成骨肉瘤细胞（SaOS-2）凋亡和胰岛素样生长因子结合蛋白6（insulin—like growth factor binding protein 6，IGFBP-6）基因表达的影响。方法应用1×10^9、1×10^-8、1×10^-7mol／L浓度的TCDD作用于SaOS-2细胞株，采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测TCDD对SaOS-2细胞增殖能力的影响，流式细胞仪检测SaOS-2细胞株细胞凋亡率，采用对硝基酚磷酸盐法测定SaOS-2细胞内碱性磷酸酶（ALP）的活力，采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）半定量分析SaOS-2中IGFBP-6 mRNA的表达，采用Western印迹杂交鉴定SaOS-2中IGFBP-6蛋白的表达。结果在1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7mol／LTCDD浓度下SaOS-2的增殖指数分别为18．4±4．5、22．5±3．6、29．4±4．2。SaOS-2 ALP的活力分别为1．12±0．28、1．58±0．14、1．96±0．17U／mg Pro，均高于对照组；且1×10^-7、1×10^-8mol／L组与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；1×10^-7mol／LTCDD浓度组的细胞凋亡率明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。3个不同浓度组的mRNA表达和1×10^-7mol／LTCDD组蛋白的表达均明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论低浓度的TCDD对SaOS-2的凋亡代谢具有拮抗作用。TCDD对SaOS-2内IGFBP-6基因表达的抑制效应，可能是TCDD参与骨肿瘤发生及生长的作用机制之一。
- 郭磊赵玉岩张世亮刘魁高晓宇
- 关键词：致癌物成骨细胞生长调节素类
- 二噁英对大鼠成骨细胞增殖及分泌功能影响
- 2007年
- 目的探讨二噁英（TCDD）对大鼠成骨细胞增殖及分泌功能的调控作用。方法应用1×10^-10～1×10^-8mol/L浓度的二噁英作用原代培养的大鼠颅盖骨成骨细胞24 h;采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测二噁英对成骨细胞增殖能力的影响;采用对硝基酚磷酸盐法测定成骨细胞培养液碱性磷酸酶（ALP）浓度。结果二噁英对大鼠成骨细胞增殖和分泌功能有负性调节作用,与对照组比较,1×10^-8mol/L的二噁英使大鼠成骨细胞增殖能力降低60%,使成骨细胞ALP活性减少58%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论二噁英对大鼠颅盖骨成骨细胞中成骨细胞增殖和分泌功能具有负性调控作用。
- 赵玉红吴丽霞郭磊赵玉岩
- 关键词：二噁英成骨细胞细胞增殖
