福建医科大学科学研究发展基金(XZ04011)
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 相关作者：闫福华赵欣李艳芬陈欣戬钟泉更多>>
- 相关机构：福建医科大学福建医科大学附属口腔医院更多>>
- 发文基金：福建医科大学科学研究发展基金国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 碱性成纤维细胞生长因子基因转染对犬牙龈成纤维细胞的影响被引量：5
- 2009年
- 背景：研究发现，局部应用外源性碱性成纤维细胞生长因子可明显促进体外培养牙龈成纤维绌胞的增殖，口内局部应用可加速牙龈组织伤口的愈合。目的：观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学特性的影响。设计、时间、地点：观察对比体外细胞学实验，于2008-04／09在福建医科大学细胞与发育工程中心及解放军南京军区福州总医院比较医学科完成。材料：Beagle犬4只，12月龄，体质量10-13kg，雄性；含有人全长碱性成纤维细胞生长因子cDNA的plRES2．EGFP．bFGF质粒为自行构建。方法：切取Beagle犬左上颌第2，3，4前磨牙的游离龈，无菌磷酸盐缓冲液冲洗4遍，将组织块剪碎后用2．5g／L的胰酶37℃消化2h，离心后弃上清，加入含体积分数为10％胎牛血清的DMEM，接种于6孔板并覆盖玻片，置丁37℃、体积分数为5％C02的培养箱培养，取对数生长期细胞消化传代。利用脂质体介导法将plRES2．EGFP．bFGF质粒转染Beagle犬牙龈成纤维细胞，以空质粒转染组及未转染组作为对照。主要观察指标：MTT法检测牙龈成纤维细胞增殖状况；AO／EB双染色检测牙龈成纤维细胞凋亡：化学比色法检测牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性。结果：3组细胞均在转染后第3天开始进入对数生长期。MTT检测结果显示，转染后随着时间改变，与空质粒转染组及未转染组相比，实验组牙龈成纤维细胞的增殖能力明显增强（P〈0．05），而空质粒转染组及未转染组差异无显著性意义（P〉0．05）。AO／EB双染色结果显示，实验组牙龈成纤维细胞凋亡率低于空质粒转染组及未转染组（P〈0．05）。转染碱性成纤维细胞生长因子基因后，牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性未见明显改变，与未转染细胞差异无显著性意义。结论：碱性成纤维细胞生长因子基因转染可以加速牙龈
- 陈欣戬闫福华钟泉赵欣江一平
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子基因治疗成纤维细胞
- 人骨形成蛋白-7真核表达质粒的构建及其在骨髓基质细胞的表达被引量：4
- 2007年
- 目的利用基因工程原理构建pIRES2-EGFP-hBMP-7真核表达质粒并检测其在Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)的表达。方法利用DNA重组技术,将hBMP-7片段克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,EcoRⅠ单酶切、PCR及序列分析鉴定获得的重组质粒;脂质体介导的方法转染Beagle犬BMSC;免疫组织化学染色检测hBMP-7基因的表达。结果hBMP-7被定向插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,转染BMSC 24 h后可观察到转染的BMSC表达绿色荧光蛋白,48 h后转染效率达到31%。免疫组织化学染色证实重组pIRES2-EGFP-hBMP-7在BMSC中的表达。结论利用基因工程原理成功构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-hBMP-7,并可在BMSC中表达。
- 李艳芬闫福华江一平骆凯赵欣
- 关键词：骨形态发生蛋白质类真核细胞骨髓细胞
- 碱性成纤维细胞生长因子基因修饰的组织工程化复合物促进牙龈组织再生实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因修饰的组织工程化复合物对牙龈组织缺损再生的影响。方法本研究于2007年7月至2009年1月在福建省高校口腔医学重点实验室进行。利用bFGF基因转染Beagle犬牙龈成纤维细胞(GFs),并将其接种于脱细胞真皮基质(ADM)形成组织工程化复合物,植入Beagle犬的人工牙周组织缺损区,通过对治疗前后牙周指标测量分析,评价该组织工程化复合物对牙龈组织再生的影响。结果实验前后附着丧失差值测定显示GFs与ADM复合物组及转染bFGF基因的GFs复合物组之间无显著性差异,与空白对照组相比均有明显增加(P<0.05)。角化龈宽度差值,6周时转染基因组有明显增加,12周时两实验组均比空白对照组明显增加(P<0.05)。结论复合GFs的ADM可能有助于改善附着丧失的程度及角化龈宽度,而bFGF的作用并不肯定。组织工程技术能有效促进牙龈组织再生。
- 陈欣戬钟泉赵欣骆凯闫福华
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子牙龈成纤维细胞脱细胞真皮基质
- hbFGF基因及hBMP-7基因修饰的组织工程化复合物联合应用促进牙槽骨再生动物实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的观察人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)基因及人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因修饰的组织工程化复合物联合应用对牙槽骨缺损再生的影响。方法利用hbFGF基因转染Beagle犬牙龈成纤维细胞(GFs),并将其接种于脱细胞真皮基质(ADM)形成组织工程化复合物,同时以hBMP-7基因转染Beagle犬骨髓基质细胞(BMSCs),将其与胶原膜BME-10X复合,共同植入Beagle犬的人工牙周组织缺损区,通过组织学观察和测量分析,评价其对牙槽骨再生的影响。结果术后6、12周,光镜下观察可见转染GFs复合ADM组和未转染GFs复合ADM组均较单纯BMSCs复合BME-10X组有更多的新生牙槽骨、新生牙周膜和新生牙骨质样组织生长;术后12周各组相对于术后6周的各组有更多的新生牙槽骨、新生牙周膜和新生牙骨质样组织。新生牙骨质与新生牙槽骨测量显示,转染hbFGF的GFs/ADM复合物的联合应用能显著提高hBMP-7基因修饰的组织工程化复合物修复牙周组织缺损的程度。结论转染bFGF的GFs/ADM复合物有助于促进hBMP-7基因修饰的组织工程化复合物对牙周组织缺损的修复。
- 陈欣戬李艳芬钟泉赵欣骆凯闫福华
- 关键词：牙龈成纤维细胞骨形成蛋白-7牙槽骨牙骨质
- bFGF基因转染的牙龈成纤维细胞与脱细胞真皮基质复合物的体外构建被引量：3
- 2010年
- 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因修饰的牙龈成纤维细胞(GFs)与组织工程支架材料脱细胞真皮基质(ADM)复合后的生长、结合情况,为基因治疗与组织工程联合应用于牙周组织缺损再生治疗提供依据。方法将转染bFGF的GFs接种于ADM真皮面,通过荧光显微镜、激光共聚焦扫描显微镜、透射电镜及组织学检查,观察细胞的生长状况及其与支架材料的复合情况。结果基因修饰的牙龈成纤维细胞复合ADM膜后生长良好,24 h细胞已贴附、伸展。透射电镜可见细胞在支架材料中生长,并与支架材料结合紧密。结论转染bFGF基因的的GFs与ADM膜复合物有望应用于牙周组织工程。
- 刘崇武陈欣戬李艳芬闫福华
- 关键词：成纤维细胞生长因子2牙周组织牙龈成纤维细胞基因疗法真皮
- 人碱性成纤维细胞生长因子真核表达质粒的构建及其在犬牙龈成纤维细胞中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:构建pIRES2-EGFP-bFGF真核表达质粒并检测其在Beagle犬牙龈成纤维细胞(GFs)中的表达。方法:双酶切获得bFGF片段并克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,HindⅢ单酶切、序列分析鉴定获得的质粒;脂质体介导转染Beagle犬GFs;免疫组织化学,RT-PCR,ELISA检测bFGF基因的表达。结果:bFGF成功插入真核表达载体pIRES2-EGFP中,转染GFs 12 h后即可观察到转染的GFs表达绿色荧光蛋白,48 h后转染效率达到20%。免疫组织化学,RT-PCR,ELISA证实重组pIRES2-EGFP-bFGF在GFs中的表达。结论:成功构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-bFGF,并可在GFs中表达。
- 陈欣戬李艳芬钟泉赵欣江一平闫福华
- 关键词：碱性成纤维细胞因子真核细胞成纤维细胞
- hBMP-7基因转染的骨髓基质细胞与BME-10X胶原膜复合物的体外构建被引量：2
- 2007年
- 目的:观察人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因转染的骨髓基质细胞(BMSCs)与胶原膜BME-10X复合后,BMSCs在BME-10X上的生长状态。方法:利用脂质体介导法将hBMP-7基因转染Beagle犬BMSCs,传代与胶原膜BME-10X复合,荧光显微镜、扫描电镜、透射电镜观察。结果:转染细胞复合胶原膜后生长良好,24h细胞已贴附、伸展。透射电镜可见细胞与材料表面连接紧密,包膜部分增厚,形成类似半桥粒样结构。结论:hBMP-7基因转染BMSCs在胶原膜BME-10X上生长良好,hBMP-7基因转染的BMSCs与胶原膜复合物有望应用于牙周组织工程。
- 闫福华江俊李艳芬赵欣钟泉骆凯
- 关键词：骨形成蛋白-7骨髓基质细胞胶原膜
- 转染人骨形成蛋白-7基因对骨髓基质细胞体外生物学活性的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:观察hBMP-7基因转染对Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)生物学特性的影响。方法:利用脂质体介导法将hBMP-7基因转染Beagle犬BMSC,观察细胞形态及生长情况,检测碱性磷酸酶、骨钙素及钙化结节等成骨细胞表型。结果:目的基因转染后细胞形态略有变化,增殖能力无明显改变,凋亡率无明显变化,碱性磷酸酶活性明显增高,骨钙素表达增强,钙化结节增大。结论:hBMP-7基因转染可以加速BMSC向成骨细胞表型转化。hBMP-7基因转染的BMSC有望成为牙周组织工程理想的种子细胞。
- 李艳芬闫福华赵欣
- 关键词：骨形成蛋白-7基因治疗骨髓基质细胞
