浙江省自然科学基金(Y2010396)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：温良优田丽花叶智鸧潘建义赵辅昆更多>>
- 相关机构：浙江理工大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 副溶血弧菌免疫原性蛋白的鉴定及克隆表达被引量：1
- 2013年
- 运用蛋白质组学及免疫学技术筛选和鉴定副溶血弧菌的外膜蛋白中具有较好免疫原性的外膜蛋白,为防治副溶血弧菌类疾病的亚单位疫苗的研发奠定基础。用灭活的副溶血弧菌免疫ICR小鼠制备抗血清;通过对外膜蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot分析筛选免疫原性蛋白,经MALDI-TOF/TOF-MS质谱分析,对免疫原性蛋白进行鉴定。克隆表达免疫原性蛋白VP0802,并对该蛋白的表达条件进行优化,最后纯化蛋白VP0802,并免疫小鼠获得抗血清,通过Western Blot验证蛋白VP0802的免疫原性。结果:免疫小鼠所得到的抗血清效价为1∶5 000;经免疫印迹分析确定了12种外膜蛋白具有较好免疫原性,其中10种外膜蛋白经质谱分析得到鉴定,分别为LPS-assembly protein,VP0802,Maltoporin,Chitoporin,OmpC,OmpA,OmpU,OmpK,VP1243和VP0966。成功构建免疫原性蛋白VP0802的高表达菌株;该菌株在低温低转速的条件下诱导,目的蛋白仍以包涵体形式存在,在37℃,220r/min,IPTG终浓度为1mmol/L的条件下诱导,目的蛋白表达量较高,纯化得到蛋白VP0802并验证了该蛋白的免疫原性。表明在副溶血弧菌的外膜蛋白中存在多种与免疫原性相关的蛋白,且部分蛋白为首次发现具有免疫原性。
- 田丽花叶智鸧温良优潘建义赵辅昆
- 关键词：副溶血弧菌外膜蛋白免疫原性
