国家教育部博士点基金(20060538004) 作品数:11 被引量:111 H指数:9 相关作者: 李志辉 张冬林 杨模华 丁贵杰 唐效蓉 更多>> 相关机构: 中南林业科技大学 贵州大学 湖南省林业科学院 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家科技支撑计划 湖南省教育厅优秀青年基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 建筑科学 更多>>
马尾松嫩茎愈伤组织保持、增殖与不定芽分化培养 被引量:9 2011年 笔者以马尾松嫩茎诱导产生的愈伤组织为材料,针对愈伤组织保持、增殖和分化培养中容易出现褐化死亡的现象,探讨培养基中改变肌醇浓度引起的渗透压变化,调节激素配比和改变培养环境对愈伤组织保持、增殖和丛芽分化的影响。结果表明:(1)改良GD培养基,添加肌醇3.0g/L,能有效地解决在愈伤组织增殖培养中的褐化问题;(2)在DCR培养基中添加KT1.0~2.0mg/L和NAA0.5mg/L能逐渐把增殖培养的马尾松愈伤组织从暗培养过渡到光培养,并保持增殖;(3)DCR培养基中添加KT1.0mg/L和TDZ0.5mg/L可以促进愈伤组织向丛生芽分化,并获得4个丛生芽。本研究结果为马尾松优良基因型快繁中愈伤组织保持、增殖和分化培养提供了研究基础。 杨模华 李志辉 张冬林 黄振 丁贵杰关键词:生物技术 马尾松 不定芽分化 马尾松针叶DNA提取方法研究 被引量:20 2008年 采用3种不同的方法(CTAB法、SDS法和试剂盒法)提取马尾松幼嫩针叶基因组DNA,并分别从取样材料类型、样品的保存、提取液中PVP含量、取样质量、抽提过程中提取程序的改进等方面进行提取马尾松基因组DNA效果的凝胶电泳比较.结果表明:CTAB法适合于在马尾松群体分子生物学研究中基因组DNA的提取:采用低温冷藏法保存的春季抽梢针叶0.2 g,在CTAB的提取液中加入2%的PVP,常规CTAB法提取程序中添加等体积的混合液(V酚∶V氯仿∶V异戊醇=25∶24∶1)并在此前加入1/10体积的10×CTAB,可以有效地提高马尾松基因组DNA的提取质量,获得显带平直、纯度较高的马尾松基因组DNA,OD260/OD280值在1.8左右.这为马尾松群体分子生物学的研究提供了一个经济、简便而有效的DNA提取方法. 杨模华 李志辉 张冬林 唐效蓉 张斌 张党权 刘儒关键词:生物技术 马尾松 改良CTAB法 DNA提取 聚合物改性水泥砂浆性能试验研究 被引量:21 2009年 用苯丙交联型聚合物乳液对普通水泥砂浆进行改性,通过对比试验分析研究了聚合物乳液水泥砂浆的力学性能及耐久性能,并对其改性机理进行了分析探讨。 周志刚 程盛关键词:聚合物水泥砂浆 聚合物乳液 改性机理 马尾松嫩茎愈伤组织诱导与增殖 被引量:6 2009年 以马尾松春梢嫩茎为试验材料,研究了外植体大小及处理方式、培养基类型、激素种类和浓度对马尾松嫩茎愈伤组织诱导和增殖的影响,结果表明:取春季嫩茎为材料,外植体大小以小于2mm的材料随机接种,在改良GD培养基中添加0.30、0.50mg/L的NAA和0.50、2.00mg/L的2,4-D,均有利于马尾松嫩茎愈伤组织的诱导和增殖。2个最适诱导和增殖培养基配方是:改良GD+0.50mg/LNAA+2.00mg/L2,4-D+0.50mg/L6-BA+2.00mg/LKT和改良GD+0.50mg/LNAA+0.50mg/L2,4-D+2.00mg/L6-BA,其中NAA和2,4-D是诱导马尾松嫩茎愈伤组织所必需的植物激素,较高的NAA生长素浓度(O.50mg/L)和适当的2,4-D植物激素浓度(O.50~2.00mg/L)有利于愈伤组织的诱导和增殖。 杨模华 张冬林 李志辉 黄振 张留恩 柴建民 杨黎关键词:马尾松 愈伤组织 增殖 马尾松幼胚体细胞胚胎发生研究 被引量:20 2011年 本论文首次报道了马尾松(Pinus massoniana Lamb.)幼胚体细胞胚胎发生的完整发育过程,并对影响马尾松胚性愈伤组织诱导的因素如球果采种期、球果冷藏处理时间、外植体处理方式等进行了探讨,统计胚性愈伤组织诱导率,进行增殖评价,探讨ABA浓度梯度对马尾松体细胞胚分化成熟的影响,试验数据用SPSS16统计分析软件进行方差分析、差异显著性检验。结果表明:1)2008~2009连续2年内15个采种期得到的幼胚,胚性愈伤组织诱导和增殖有显著性差异,最适宜的马尾松球果采种期是6月下旬至7月下旬,诱导率在9.66%~22.59%之间;2)球果冷藏处理时间,对胚性愈伤组织诱导有显著性差异,其中4℃冷藏球果15d有利于幼胚胚性愈伤组织诱导;3)雌配子体包含幼胚的接种处理方式是可取的;4)胚性愈伤组织经稳定增殖培养后,转入分化成熟培养基,得到体细胞胚状体"爆发式"分化成熟,数量多,质量好。适宜体胚成熟转化的培养基为:成熟LP培养基添加ABA5.0mg·L-1+60.0g·L-1蔗糖,并附加L-谷氨酰胺和水解酪蛋白;5)成熟体细胞胚在无激素萌发型LP培养基上正常萌发,并转化为结构完整的小植株。本研究首次建立了马尾松幼胚体细胞胚胎发生技术平台,为马尾松遗传改良种质创新、缩短育种周期奠定了研究基础。 杨模华 张冬林 李志辉 靳小翠 丁贵杰关键词:森林培育学 马尾松 幼胚 体细胞胚胎发生 胚性愈伤组织 胚状体 马尾松幼胚离体培养器官发生植株再生研究 被引量:10 2011年 以马尾松幼胚为外植体,经丛生芽诱导、增殖和伸长培养、生根诱导,获得了再生植株。对影响马尾松幼胚器官发生植株再生的关键因子,如减轻外植体褐变的处理方式、基本培养基类型、最适诱导培养基激素种类和浓度、增殖培养条件以及生根诱导影响因子(激素、活性炭和蔗糖)等,分别进行了随机区组试验设计。试验数据经SPSS16方差分析,LSD多重比较,结果表明:1)选择WPM培养基,添加抗坏血酸Vc 0.15 g/L,并且每2天转接1次能有效地减轻外植体接种处理初期出现的褐化现象;2)WPM+NAA 0.15 mg/L+6—BA 1.00 mg/L+KT 0.50 mg/L为较好的马尾松幼胚丛芽诱导分化培养基,丛芽诱导率可达98.15%;3)马尾松幼胚丛芽增殖和伸长培养的最适培养基为WPM+NAA 0.15 mg/L,增殖系数可达5.43;4)生根培养中,生根质量最好的培养基组合为WPM+IBA2.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L+Ac 0.50 g/L,且生根培养基中添加的蔗糖浓度以20.0 g/L为宜,生根率达到66.67%。本研究结果可为利用马尾松幼胚建立组培快繁体系奠定研究基础。 杨模华 张冬林 杨艳 丁贵杰 李志辉关键词:森林培育学 马尾松 幼胚 器官发生 植株再生 马尾松幼胚胚性愈伤组织诱导研究 本文以马尾松不同家系、不同采种时期剥取的幼胚为外植体,在1、2、3种不同的激素处理下进行胚性愈伤组织的诱导,统计胚性愈伤组织的诱导率,进行SPSS数据分析。结果表明,以LP为基本培养基,诱导产生胚性愈伤组织诱导率最高的时... 靳小翠 杨模华 李志辉 张冬林 丁贵杰关键词:马尾松 幼胚 胚性愈伤组织诱导 文献传递 马尾松幼苗茎段愈伤组织诱导的研究 被引量:5 2009年 以马尾松优良种子萌发后的幼苗的茎段为实验材料,研究了不同培养基类型、激素种类和激素质量浓度对愈伤组织诱导的影响.结果表明:改良GD培养基为诱导愈伤组织的最佳诱导培养基;改良GD+4 m g.L-12,4-D+2 m g.L-16-BA+500 m g.L-1CH+30 g.L-1蔗糖+8 g.L-1琼脂的组合为愈伤组织最佳增殖配方;暗培养20 d后平均直径能达到8.5 mm.这为马尾松幼苗茎段愈伤组织分化或进行遗传转化奠定了研究基础. 李志辉 黄振 杨模华 张冬林关键词:马尾松 愈伤组织诱导 广西马尾松天然林古蓬和浪水种源群体遗传多样性ISSR分析 被引量:13 2009年 从100个ISSR引物中筛选出10个多态性引物,对广西古蓬和浪水两个种源区的马尾松天然林5个群体共85份样品进行遗传多样性分析,古蓬种源三个群体47份样品共检测到192个位点,其中多态位点数为177个,浪水两个群体共38个样品检测到168个多态位点。对两个种源区的马尾松群体ISSR分析数据采用POPgene32软件进行分析,结果表明:古蓬马尾松天然林群体内,总的多态位点百分率(P)为94.35%,总的Shannon信息指数(I)为0.4278,Nei's基因多样度指数(h)为0.2765;浪水种源马尾松群体内,总的多态位点百分率(P)为94.38%,总的Shannon信息指数(I)为0.5190,Nei's基因多样度指数(h)为0.3510;这表明马尾松天然林群体内遗传多样性水平高,个体间基因多样性变异大。古蓬马尾松群体间的基因分化系数(Gst)为0.0481,浪水的为0.0363,这表明分别有95.19%和96.37%的变异存在于群体内;古蓬3个群体的基因流为9.8877,浪水两个群体的基因流为13.2643,这表明本研究分析中的种源内群体间存在比较高的近亲交配现象,因此有必要加大对马尾松天然林的保护力度,扩大天然林的保护范围。 李志辉 陈艺 张冬林 杨模华 蒋燚 丁贵杰 谭晓风关键词:马尾松 天然林 ISSR 湖南桂阳马尾松种子园遗传多样性的ISSR分析 被引量:12 2010年 本研究从100条ISSR引物中筛选出11条多态性引物,对湖南桂阳马尾松第二代种子园共87份样品进行遗传多样性分析,共扩增得到246个多态位点。采用PAUP4.0软件分析,获得两个主要群体(广西群体和城步群体),在城步群体内,湖南和贵州两省的家系被分开。再对两个主要群体采用POPGEN32软件分析,结果表明:在桂阳第二代种子园内总的多态位点百分率达98.80%,总的Shannon信息指数为0.583 7,Nei's基因多样性指数为0.400 3,2个群体的多态位点百分率分别为93.57%、98.80%,各群体间的基因分化系数为0.036 3,基因流为13.258 6。这表明桂阳第二代马尾松种子园的遗传多样性水平高,个体间的基因多样性变异大,该种子园所采用的建园方式是可取的。 杨玉洁 张冬林 杨模华 李志辉 唐效蓉 丁贵杰 谭晓风关键词:森林培育学 马尾松 种子园 ISSR