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大豆氨基酸透性酶基因GmAAP2-like 1的克隆及功能初探被引量：2: 2016年; 氨基酸透性酶(amino acid permeases)在植物不同器官的氨基酸转运过程中发挥着重要作用,但迄今为止,大豆中氨基酸透性酶相关的研究甚少。本文利用大豆初生叶水培系统对大豆(Glycine max)品种‘Williams 82’进行缺氮处理后,发现与足氮对照相比,大豆初生叶中Gm AAP2-like 1基因的表达明显上调。对大豆不同器官中Gm AAP2-like 1的转录水平进行RTPCR检测,结果显示该基因在花、叶和茎中的表达量较高而在根和种子中表达量很低。构建Gm AAP2-like 1(无内含子)过表达植物表达载体,在转化农杆菌时发现,该载体转化农杆菌GV3101致死;改进载体构建策略,采用融合PCR方法,在Gm AAP2-like 1的第一个外显子后插入一段内含子序列,改进的载体可以成功转化农杆菌。应用农杆菌介导的花苞浸泡法转化拟南芥,对所获得的转基因拟南芥抗性苗进行基因组PCR和RT-PCR鉴定,共检测到8个Gm AAP2-like 1不同程度表达的转基因拟南芥株系,且其中的内含子都得到了正确的剪切。氨基酸有毒类似物(MSX)处理实验表明:转基因拟南芥对MSX处理比野生型更为敏感,暗示Gm AAP2-like 1具有运输谷氨酸等酸性氨基酸的功能。; 李美美夏铜梅王丹梅圆圆王宁宁; 关键词：大豆缺氮融合PCR

异源表达大豆GmNRT1-like提高拟南芥对低氮的耐受性被引量：2: 2017年; 氮素是植物生长发育所需的重要元素,提高作物对氮素的利用效率可以减少化肥施用量并减轻对环境的污染,因此挖掘新的氮高效(NUE)基因成为了分子育种中的一项重要任务.在大豆中克隆到一个低氮上调表达的硝酸盐运输载体(NRT)家族成员Gm NRT1-like,进行了双元表达载体的构建并转化模式植物拟南芥,并在转基因拟南芥中对该基因功能进行了研究.研究结果表明,在低氮胁迫条件下,转基因植株产生更多的侧根,即其根系更发达.证明异源表达大豆Gm NRT1-like基因提高了拟南芥对低氮的耐受性.; 夏铜梅张敏李美美王丹王宁宁; 关键词：大豆拟南芥低氮胁迫氮高效

AtSARK互作蛋白的筛选与鉴定被引量：1: 2014年; 植物LRR型类受体蛋白激酶在植物生命活动中发挥着重要作用。前期研究发现了一个通过生长素和乙烯的协同作用参与拟南芥叶片衰老过程正调控的类受体蛋白激酶,AtSARK。为深入研究AtSARK蛋白的作用机制,文章采用酵母双杂交系统,以AtSARK胞内域(AtSARK-CD)为诱饵蛋白,对拟南芥均一化cDNA文库进行筛选,得到83个AtSARK的候选互作组分,经过复筛,初步发现AtSARK的互作组分包括14-3-3蛋白、FKBP-型肽脯氨酰顺反异构酶、醛缩酶超家族成员、RING/U-box超家族成员以及WRKY转录因子家族成员。我们对其中一个功能未知的醛缩酶家族基因AtFBA5(AT4G26530)的表达模式进行了分析,并用GST pulldown实验证实了AtSARK-CD与AtFBA5间存在直接的相互作用。AtSARK互作组分的文库筛选及AtFBA5的分离有利于进一步研究AtSARK基因在衰老信号通路中的作用机制。; 肖冬徐欣欣管婧雯王宁宁; 关键词：拟南芥酵母双杂交

叶片衰老过程中的蛋白激酶和蛋白磷酸酶被引量：6: 2014年; 衰老是受遗传程序严格控制的植物个体发育过程中的一个必经阶段,由特殊发育信号通过一定的信号传导路径来启动和控制。研究发现,蛋白激酶和蛋白磷酸酶所介导的可逆磷酸化反应在叶片衰老信号传递和衰老的启动和进程控制过程中发挥了重要作用。本文对近年参与叶片衰老调控的蛋白激酶和蛋白磷酸酶基因的分离鉴定及功能研究进行了综述。; 肖冬崔燕娇王宁宁; 关键词：叶片衰老蛋白激酶蛋白磷酸酶

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教育部科学技术研究重大项目(313032)