国家自然科学基金(31171315)
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
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- 高效液相色谱-紫外检测器法测定高脂饮食小鼠血清中槲皮素含量
- 2015年
- 目的：建立用高效液相色谱-紫外检测器检测法测定饮食诱导的肥胖小鼠血清中槲皮素含量的方法。方法：色谱柱：Eclipse XDB-C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈-0.2%甲酸溶液（40∶60,V/V）;检测波长：360 nm;柱温：30℃;流速：0.50 m L/min。结果：槲皮素在2.5～40μg/m L质量浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.999 1）,平均回收率为96.0%,相对标准偏差为10.98%（n=5）。结论：该方法具有良好的回收率和重复性。可以对血清中的槲皮素实现简便、快速、准确的检测。
- 边会喜蔡静吴泽宇张弦刘健
- 关键词：高效液相色谱法紫外检测器高脂饮食槲皮素
- 利用FACS定量研究脂肪组织中肥大细胞的数目
- 2017年
- 肥胖会导致脂肪组织中各种免疫细胞数量的失衡,肥大细胞(MCs)在肥胖个体的脂肪组织中数量明显增多,而MCs稳定剂木犀草素(LU)可以降低高脂饮食小鼠附睾脂肪组织(EAT)中MCs的数量,并改善肥胖和胰岛素抵抗的发展。此前的研究是利用甲苯胺蓝染色半定量EAT中MCs数量的变化。甲苯胺蓝染色的特异性和统计精密度都存在一定的欠缺,为了更精确地研究在肥胖过程中脂肪组织中MCs数量的变化,文章建立了高精密度的流式细胞荧光分选(fluorescence activated cell sorting,FACS)技术,并研究了低脂、高脂和高脂补充LU组小鼠EAT中MCs变化情况。FACS分析定量结果显示,MCs在高脂饮食诱导下明显升高,而饮食补充LU可以明显降低MCs的数目。另外,EAT中MC蛋白酶的定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)结果也支持了FACS分析的结果。因此,利用FACS分析脂肪组织中MCs数目的精确变化,为进一步研究MCs在肥胖中的作用机制提供技术支持。
- 张磊刘健
- 体外诱导脂肪组织巨噬细胞极化的模型
- 2017年
- 肥胖进程中,脂肪组织中的巨噬细胞由抗炎性的M2(2型巨噬细胞)逐渐极化成促炎性的M1(1型巨噬细胞),M1分泌的促炎性细胞直接可以导致胰岛素抵抗等肥胖相关代谢综合症。由于体外常用细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的促炎性巨噬细胞来研究脂肪组织中巨噬细胞的极化,但其与脂肪组织中M1的表型相差甚远;另外,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)可以诱导骨髓细胞分化为骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophage,BMDM)。文章发现GM-CSF诱导的巨噬细胞(GM-CSF-induced macrophages,GM-BMM)高表达脂肪组织M1型标志基因CD11c与NOS2和促炎性细胞因子IL6与TNFα;与此相反,M-CSF诱导的骨髓细胞分化的巨噬细胞(M-CSF-induced macrophages,MBMM)高表达脂肪组织M2标志基因CD206和抗炎性细胞因子IL10。因此,GM-BMM和M-BMM更适合用于脂肪组织巨噬细胞极化的体外研究。
- 韩怡静刘健
- HPLC-MS/MS检测小鼠脑部组胺和5-羟色胺被引量：6
- 2018年
- 组胺和5-羟色胺(5-HT)与很多神经相关疾病联系密切,因此研究它们在脑组织中质量比的变化对该类疾病的诊断和治疗具有重要意义。文章通过高效液相色谱串联质谱法检测了小鼠脑组织中组胺质量比和5-羟色胺质量比水平,通过对脑组织样品前处理方法的改进,对检测条件的选择和流动相条件的优化,确定了小鼠脑组织中组胺质量比和5-羟色胺质量比的检测方法。小鼠脑组织中的组胺和5-羟色胺的回收率分别为(83.5±2.4)%和(87.4±5.3)%;检测限均为0.1ng/mL。使用该方法检测野生型C57BL/6J小鼠和肥大细胞缺失小鼠Kit^(W-sh/W-sh)脑组织中组胺质量比和5-羟色胺质量比,结果显示,肥大细胞缺失后小鼠脑组织组胺质量比显著降低,而5-羟色胺质量比没有显著改变。
- 谢天发刘长安刘健
- 关键词：质谱肥大细胞组胺
- 苦瓜降低脂肪组织炎性改善肥胖小鼠糖脂代谢紊乱被引量：4
- 2013年
- 目的:研究苦瓜减肥降糖的炎性相关机理。方法:经12周高脂饮食(45%热量源自脂肪,Research Diets D12451),建立小鼠肥胖和糖尿病模型。在此基础上,将小鼠分为低脂组(10%热量源自脂肪,Research DietsD12450B)、低脂加苦瓜组(苦瓜干粉按质量比5%加入低脂饲料中)、高脂组(同造模时的高脂饲料)、高脂加苦瓜组(苦瓜干粉按质量比5%加入高脂饲料中),以考察6周苦瓜饮食干预的影响。测定小鼠体质量、血糖、血脂等各项代谢指标。利用Real-time PCR和Western blotting,考察炎性细胞浸润、炎性因子表达及相关信号活性的变化情况。结果:通过饮食补充苦瓜6周,高脂加苦瓜组与高脂组小鼠相比体质量下降了6g,血脂水平也显著降低,接近低脂饮食组;脂肪组织巨噬细胞和肥大细胞的特征基因F4/80和mMCP-6的表达减少到高脂对照组的1/4,炎性因子MCP-1、IL-6、TNF-α的表达也显著降低;各项糖脂代谢指标(胰岛素耐受和葡萄糖耐受)明显改善;糖摄入相关信号(AKT、PPARγ及Glut-4)显著增强。
- 鲍斌陈彦光刘健
- 关键词：苦瓜肥胖炎性细胞
- 木犀草素通过蛋白激酶C途径抑制肥胖相关的巨噬细胞极化被引量：6
- 2014年
- 目的:木犀草素(luteolin,LU)是富含于多种植物源食品中的天然黄酮类化合物,实验旨在探讨其对肥胖相关的巨噬细胞极化的影响及机制。方法:将5周龄雄性小鼠分为3组分别给予低脂饮食(low-fat diet,LFD)、高脂饮食(high-fat diet,HFD)和添加0.01%木犀草素的高脂饮食(HFD+0.01%LU),喂养12周后利用免疫组织化学染色检测附睾脂肪组织中巨噬细胞,并利用实时定量荧光聚合酶链式反应分别检测促炎性M1巨噬细胞和抗炎性M2巨噬细胞的标记基因表达情况;体外实验研究木犀草素对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的巨噬细胞系RAW264.7极化的影响,利用蛋白激酶C激活剂佛波酯进行干预后,检测促炎性细胞因子、M1和M2标记基因的mRNA表达情况。结果:木犀草素降低了高脂饮食诱导的脂肪组织巨噬细胞聚集和M1型巨噬细胞标记基因CD11c与Nos2 mRNA的表达;体外木犀草素也抑制了LPS诱导巨噬细胞炎性因子和M1型巨噬细胞标记基因的表达,上调M2型巨噬细胞标记基因的表达,且这些作用依赖于蛋白激酶C途径。结论:木犀草素能够抑制肥胖相关的巨噬细胞极化,并且通过蛋白激酶C途径抑制LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎性因子的表达与极化。
- 张磊鲍斌刘健
- 关键词：木犀草素肥胖巨噬细胞蛋白激酶C
