吉林省科技发展计划基金(201101112)
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 相关作者：胡静涛王春凤马红霞高云航徐凤宇更多>>
- 相关机构：吉林农业大学吉林大学九江学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 黏质沙雷菌应用研究进展被引量：1
- 2012年
- 普遍存在于自然界的黏质沙雷菌具有广泛用途。无论是基础微生物学研究中应用的模式菌种,还是医药、生物防治领域所用的抗癌、抗细菌、抗真菌等制剂,以及环境修复和化工领域研究中,都有关于黏质沙雷菌的记载。虽然该菌中有些菌株是机会致病菌,但它正在或将来可能带给人类的益处一定是多方面的。
- 徐凤宇么乃全高云航胡静涛马红霞
- 关键词：黏质沙雷菌灵菌红素环境修复
- 吉林白鹅α干扰素在大肠杆菌中的表达及抗病毒活性检测被引量：2
- 2012年
- 用PCR方法扩增了吉林白鹅α干扰素(IFN-α)成熟肽编码序列,将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX-IFN-α,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-α)。SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN-α融合蛋白(rGoIFN-α)的分子量大小约为43ku,能与IFN-α抗血清发生特异性结合反应。重组吉林白鹅α干扰素经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,在鸭胚成纤维细胞上抗鹅细小病毒的活性为3.32×105 U/mg,本试验结果表明,该表达系统能够表达重组鹅α干扰素,且表达的重组鹅α干扰素具有一定的抗病毒活性。
- 李公美李玉梅胡静涛刘可越钱爱东
- 关键词：吉林白鹅Α干扰素鹅细小病毒抗病毒活性
- 牛体内耻垢分枝杆菌噬菌体的分离与保存被引量：3
- 2013年
- 鉴于体外分离噬菌体治疗价值的局限性,本研究从12份副结核血清学检测阳性的牛唾液和鼻黏液中成功分离纯化到不同牛体来源的4株耻垢分枝杆菌烈性噬菌体。电镜观察发现它们均属有尾病毒目,肌尾病毒科。为进一步研究和应用这些噬菌体,以其中一株为受试株,比较了16种保存方法,发现其中8种方法保存效果较好。
- 苏胜兵高云航孟庆峰于录马红霞胡静涛徐凤宇
- 关键词：耻垢分枝杆菌噬菌体纯化
- 吉林白鹅α干扰素基因的原核表达及抗血清的制备被引量：1
- 2012年
- 采用PCR方法扩增了吉林白鹅ɑ干扰素(JL-GoIFN-α)成熟肽编码序列,将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX-IFN-ɑ,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)的感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-ɑ)。SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN-ɑ融合蛋白(rJL-GoIFN-α)的分子量大小约为43 ku,表达量占菌体总蛋白的25%。重组吉林白鹅α干扰素,经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,经过透析复性,得到纯化的目的蛋白,含量可达0.25 mg/mL。将复性蛋白免疫新西兰白兔3次,制备高滴度的鹅IFN-ɑ抗血清。本实验表达和纯化了鹅的IFN-ɑ,并制备了兔抗鹅的IFN-ɑ抗血清,为下一阶段鹅ɑ干扰素重组蛋白的应用奠定了基础。
- 李公美胡静涛李玉梅李茂辉闫金明刘可越钱爱东
- 关键词：吉林白鹅抗血清
- GFP标记的重组新城疫病毒HN基因乳酸菌表达载体的构建及原核表达被引量：4
- 2012年
- 为构建具有示踪特性的新城疫病毒(NDV)HN基因乳酸菌穿梭表达载体,采用PCR方法扩增NDV HN基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因,将两基因克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,转化入表达宿主菌BL21(DE3)后利用IPTG诱导表达。用荧光显微镜检查重组菌的绿色荧光效应,采用SDS-PAGE和Western-blotting检测其在大肠杆菌中的表达情况。结果显示,NDV HN和GFP基因与表达载体pW425et正确重组。荧光显微镜下可见阳性重组菌落的绿色荧光,且该重组菌传代30代次以上,荧光效应依然稳定。SDS-PAGE显示表达出约63ku的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符。Western-blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性血清所识别,具有反应原性。构建了GFP标记的重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体且能在大肠杆菌中表达。
- 胡静涛杨文涛肖冲佟盼盼孟菲王春凤丁壮
- 关键词：新城疫病毒
- 重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2013年
- 为构建新城疫病毒乳酸菌穿梭表达载体,采用RT-PCR方法从新城疫病毒中扩增了HN基因,将其克隆到pMD18-T Simple Vector中。经测序鉴定正确后,定向克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,并转化入表达宿主菌BL21(DE3),利用IPTG诱导表达。采用SDS-PAGE和Western blotting检测重组菌在大肠杆菌中的表达情况。结果表明:NDVHN基因与表达载体pW425et正确重组,且该重组菌传50代次以上,重组质粒依然稳定。SDS-PAGE显示表达出约63 kD的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符。Western blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性抗体所识别,具有反应原性。表明构建了重组NDVHN基因乳酸菌穿梭表达载体。
- 郭衍冰胡静涛于丹曹岩峰王一鸣张旺王春凤
- 关键词：新城疫病毒大肠杆菌
