国家自然科学基金(30472261) 作品数:12 被引量:64 H指数:5 相关作者: 曲迅 杨美香 孔北华 郑广娟 郭文菁 更多>> 相关机构: 山东大学 山东中医药大学 山东大学第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
表达谱芯片技术在药物作用机制研究中的应用 被引量:2 2005年 目的探讨表达谱芯片技术在研究药物作用机制中的价值。方法建立荷NuTu-19卵巢癌的大鼠模型及相应对照,用罗勒多糖治疗50天,处死大鼠,以腹水量、腹腔脏器转移程度积分判断各组肿瘤生长及转移情况。提取癌组织总RNA,用RT-PCR逆转录合成cDNA,分别采用Cy3-dUTP、Cy5-dUTP标记对照组和药物组cDNA,与含有2 000点的大鼠基因表达谱芯片杂交,杂交芯片扫描结果用Im aGene 3.0软件分析,计算Cy3、Cy5两种荧光信号的强度比值。结果对照组与药物组之间共有168条差异表达基因,表达差异在3倍以上的基因有65条,均为表达下调基因;表达差异在2倍以上的基因有103条,其中表达上调基因43条,下调基因60条。经归类分析,表达差异基因主要为:①肿瘤转移相关基因;②与免疫应答有关的基因;③与细胞能量代谢有关的酶类;④与药物代谢及敏感性有关酶类的基因;⑤与信号转导以及转录过程有关的基因等。结论罗勒多糖可能通过抑制肿瘤代谢、调节肿瘤转移相关基因的表达等多种作用途径抑制肿瘤的转移,表达谱芯片技术可以快速确定药物作用的可能机制,并为进一步研究提供重要信息,加快药物的研发速度。 邹明瑾 郭文静 杨美香 张丹 张静 闫实 王景芝 邵倩倩 曲迅关键词:基因芯片 中草药 罗勒多糖 卵巢癌 低氧对人外周血单个核细胞迁移活性的影响及其临床意义 2006年 目的探讨低氧对机体外周血单个核细胞(PBM C)迁移的影响及其临床意义。方法分离外周血单个核细胞,采用T ransw e ll小室实验检测常氧和低氧条件下PBM C迁移能力的变化,流式细胞术(FCM)检测常氧和低氧条件下T、B淋巴细胞,NK细胞及单核细胞迁移的变化。结果低氧环境下PBM C的迁移率降低31%。对其细胞亚群的分析结果显示,NK细胞的迁移率降低31.7%,单核细胞的迁移率降低63.1%,T、B淋巴细胞的迁移率无显著变化。结论低氧能显著影响单核细胞及NK细胞的迁移功能;检测低氧条件下PBM C的迁移能力,可为以免疫细胞迁移功能为靶点的炎症等疾病提供新的治疗对策。 宋海波 曲迅 杨美香 杨咏梅 邵倩倩关键词:低氧 外周血单个核细胞 迁移 NK细胞 罗勒多糖对卵巢癌生物学行为的影响及其机制研究 被引量:4 2006年 目的:观察中药罗勒多糖对卵巢癌生物学行为的影响,探讨其抗卵巢癌作用的可能机制。方法:建立荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型,观察罗勒多糖对荷瘤鼠肿瘤生物学行为的影响;抽提肿瘤组织总RNA,逆转录标记cDNA探针,用Cy3-dUTP标记对照组,Cy5-dUTP标记实验组,与表达谱芯片进行杂交,ImaGene3.0软件分析统计。同时取肿瘤组织,进行常规病理学检测。结果:与对照组相比,罗勒多糖治疗组肿瘤的生长及转移行为都受到明显的抑制:肿瘤数量减少,体积减小,腹水量显著减少(P<0.05);腹腔脏器转移程度积分显著降低(P<0.01)。罗勒多糖作用后,卵巢癌的基因表达谱发生了明显变化,应用表达谱芯片共筛选出168条差异表达基因。结论:罗勒多糖通过多个药效靶点抗肿瘤增殖及转移。 郭文菁 马秀明 杨美香 郑广娟 孔北华 曲迅关键词:罗勒多糖 卵巢癌 表达谱芯片 表达谱芯片技术在罗勒多糖抗肿瘤机制研究中的应用 被引量:3 2005年 目的探讨表达谱芯片技术在罗勒多糖抗肿瘤机制研究中的价值与作用。方法建立荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型共20只,10只予罗勒多糖(2.5mg/kg)连续灌胃50d(药物组),另10只予等量生理盐水灌胃50d(对照组)。以腹水量、腹腔脏器转移程度积分判断各组肿瘤生长及转移情况。分别用Cy3-dUTP、Cy5-dUTP标记两组癌组织cDNA,与含有2000点的大鼠基因表达谱芯片杂交。结果对照组与药物组共有168条基因出现差异表达。结论表达谱芯片技术可以快速确定药物作用的可能机制,并为进一步研究提供重要信息。 邹明瑾 郭文静 杨美香 张丹 张静 闫实 曲迅关键词:基因芯片 中草药 罗勒多糖 卵巢肿瘤 乏氧微环境对人外周血来源的树突状细胞迁移活性的影响 被引量:1 2005年 杨美香 曲迅 孔北华 闫实 祁襕 梁璐关键词:树突状细胞 人外周血 乏氧 特异性抗肿瘤免疫应答 恶性表型 低氧环境下罗勒多糖对乳腺癌细胞TIMPs mRNA表达的影响 被引量:7 2006年 目的:探讨低氧对人乳腺癌细胞株MDA-231金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)mRNA表达的影响,以及罗勒多糖(basilpolysaccharide,BP)对TIMPs的作用。方法:分别置MDA-231细胞株于常氧(21%O2、5%CO2)、低氧(1%O2、5%CO2和94%N2)环境中和罗勒多糖(200μg/ml)培养6h,RT-PCR技术检测不同处理组细胞TIMP1、2、3mRNA水平。结果:MDA-231细胞株表达TIMP1、2mRNA,未检测到TIMP3mRNA;低氧环境下MDA-231细胞株TIMP1、2mRNA水平显著上升(P<0.05);罗勒多糖处理后TIMPsmRNA的含量,无论常氧组还是低氧组都有显著改变:常氧环境下罗勒多糖可明显下调MDA-231细胞株中TIMP1、2mRNA的表达(P<0.05),而低氧环境下则显著上调其表达(P<0.05)。结论:罗勒多糖在常氧及低氧环境下对MDA-231细胞TIMP1、2基因表达的影响效应截然相反,提示抗肿瘤药物及生物疗法的体外机制研究设计应充分考虑氧环境的影响。 郭文菁 曲迅 张彬彬 邵倩倩 高文娟 郑广娟 孔北华关键词:低氧 金属蛋白酶组织抑制剂 乳腺癌细胞 罗勒多糖 SELDI技术应用于肿瘤疗效监测的初步研究 被引量:1 2007年 目的应用表面增强的激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术对卵巢癌及喉癌患者治疗前后血清进行疗效相关标志分子的筛选,评价此技术在肿瘤疗效监测方面的可行性。方法应用SELDI-TOF-MS技术分别对20例卵巢癌患者化疗前后及51例喉癌患者手术前后血清蛋白质指纹图谱进行分析,用Biomarker Wiz- ard软件对结果进行统计学分析。结果卵巢癌患者化疗后血清中质荷比(m/z)4 475的蛋白峰(14/20)较化疗前表达增高;喉癌患者术前血清高表达m/z 13 741蛋白峰,术后21例患者该蛋白表达降低,其中11例(11/21)术后m/z 13 741、m/z 5 192和m/z 15 100的蛋白峰表达均较术前显著下降(P<0.01)。结论SELDI-TOF-MS技术能灵敏的检测肿瘤患者手术及化疗前后血清中的差异蛋白峰。该技术的微创、灵敏、微量等特点将可能在肿瘤疗效监测及肿瘤的个体化治疗研究中具有较好的应用前景。 邓碧萍 张辉 贾琳 张秀强 孔北华 曲迅关键词:卵巢肿瘤 喉肿瘤 表面增强激光解吸电离飞行时间质谱 蛋白质组 疗效监测 骨桥蛋白及其信号通路对肿瘤侵袭调控的研究进展 被引量:16 2008年 骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型磷酸化糖蛋白,其分子结构中含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)的受体结合序列。OPN主要通过与其受体整合素和CD44相互作用,参与肿瘤转移的多个过程。近年来,骨桥蛋白及其调控肿瘤侵袭与转移的信号通路倍受关注。OPN通过与整合素ανβ3和CD44结合作用,使多种激酶(PI3K、NIK、PLC、PKC和MAPK)磷酸化激活,从而发挥抑制凋亡和激活多种基质降解蛋白酶(uPA和MMPs)的功能,促进肿瘤细胞转移。 王婷 曲迅 郑广娟 龚继勇关键词:信号传递 肿瘤转移 抗原 CD44 基因芯片技术在研究中药分子作用机制中的应用 被引量:9 2005年 目的:探讨罗勒多糖抑瘤作用和机制以及基因芯片技术在中药分子作用机制研究中的应用。方法:建立荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型及相应对照,观察中药罗勒多糖对荷瘤鼠肿瘤生长及转移行为的影响;同时提取肿瘤组织总RNA,用RT-PCR逆转录合成cDNA,分别用Cy3-dUTP、Cy5-dUTP标记对照组和药物组cDNA,与含有2000点的大鼠基因表达谱芯片杂交,杂交芯片扫描结果用ImaGene3.0软件进行分析统计。结果:对照组与药物组之间共有168条差异表达基因,经归类分析,表达差异基因主要为:①肿瘤转移相关基因;②与免疫应答有关的基因;③与细胞能量代谢有关的酶类;④与药物代谢及敏感性有关酶类的基因;⑤与信号转导以及转录过程有关的基因等。结论:罗勒多糖可能通过多种作用途径抑制肿瘤生长及转移,基因芯片技术可从基因水平解释中药的可能作用机制,并为进一步确切机制的研究提供重要信息。 邹明瑾 杨美香 郭文静 闫实 曲迅关键词:基因芯片 罗勒多糖 卵巢肿瘤 罗勒多糖对荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型的作用研究 被引量:10 2006年 目的:探讨罗勒多糖对荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型的作用。方法:建立荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型,体内观察罗勒多糖对荷瘤大鼠肿瘤生长及转移行为的影响,取大网膜瘤组织,提取总RNA,经逆转录、荧光标记后与R 20 s大鼠表达谱芯片杂交,经Gene P ix Pro 3.0图像处理软件分析。同时取肿瘤组织,进行常规病理学检测。结果:罗勒多糖处理组肿瘤的数量明显少于对照组,肿瘤体积小于、腹水量显著少于对照组(P<0.05);腹腔脏器转移程度积分与对照组有显著差异(P<0.01);同时采用表达谱芯片技术从药物组肿瘤组织中比较筛选出了268条差异表达基因。结论:罗勒多糖可能是一种抗卵巢癌转移的新型中草药,它对卵巢癌显现的独特效果可能是多个药效靶点综合作用的结果,本研究也显示了表达谱芯片技术在药物效应靶点研究中的优势和价值。 郭文菁 曲迅 杨美香 孔北华 闫实 毕正 张丹 郑广娟 张静 夏丽英关键词:卵巢肿瘤