上海市科学技术委员会基础研究重点项目(03JC14006)
- 作品数:4 被引量:25H指数:3
- 相关作者:姜远英张军东曹永兵徐铮王彦更多>>
- 相关机构:第二军医大学更多>>
- 发文基金:上海市科学技术委员会基础研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 体外诱导白念珠菌对氟康唑耐药性的研究被引量:7
- 2005年
- 目的:建立白念珠菌耐氟康唑模型,研究白念珠菌耐药前后相关生物学特性变化。方法:体外用氟康唑诱导敏感白念珠菌SC5314和y01.09成为耐药子代SC5314R和y01.09R,利用微量液基稀释法和小鼠体内实验确定耐药表型,通过生长动力学、菌丝和生物膜形成实验观察生物学特性变化。结果:氟康唑对耐药子代SC5314R和y01.09R的MIC80分别为>128μg/mL,64μg/mL。无药培养35代后,MIC80分别为>128μg/mL,16μg/mL。有/无氟康唑环境下,敏感母本和耐药子代倍增时间无显著差异。氟康唑作用下,SC5314和y01.09菌丝形成受到抑制,SC5314R和y01.09R仍有菌丝形成;SC5314R和y01.09R可以形成牢固生物膜,SC5314和y01.09形成松散生物膜。结论:本实验成功诱导对氟康唑产生高度耐药的白念珠菌菌株,其耐药性通过体内外实验获得证实。
- 阎澜张军东曹永兵王彦贾鑫明姜远英
- 关键词:白念珠菌氟康唑
- 白色念珠菌耐药性产生的分子机制被引量:9
- 2004年
- 耐氟康唑的白色念珠菌已成为临床长期用药治疗的一个突出性问题,目前认为白色念珠菌耐药性产 生的分子机制,主要包括麦角甾醇生物合成通路中关键靶酶的变异和高表达、多药耐药蛋白对真菌胞内药物浓度 的影响以及生物被膜的形成等。
- 曹永兵徐铮张军东姜远英
- 关键词:白色念珠菌耐药性分子机制
- SMART技术构建白念珠菌全长cDNA文库被引量:9
- 2004年
- 目的 :为克隆和研究白念珠菌新耐药相关基因 ,应用 SMART(switching m echanism at5′end of RNA transcript)技术 ,快速构建高质量的白念珠菌全长 c DNA文库。方法 :采用 TRIzol试剂提取不同生长期、不同药物刺激的白念珠菌 SC5 314的总 RNA,经 Oligotex试剂盒纯化得到 m RNA。利用含 Sfi B酶切位点的 CDS /3′PCR引物合成 c DNA第 1条链 ,而含Sfi A酶切位点的 SMART寡核苷酸作为 c DNA第 1条链在 m RNA5′端延伸出去的模板。 L D- PCR合成双链 c DNA,经Sfi 酶切和过柱分级分离后 ,与 p BSF质粒进行连接 ,随后转化大肠杆菌 ,构建成全长 c DNA文库。测序验证部分插入 c DNA的全序列 ,计算全长性比例。 结果 :构建好的文库中含有约 1.1× 10 6的重组子 ,重组率为 97.6 % ,插入 c DNA长度为 75 0~30 0 0 bp,且大部分在 1.5 kb以上。测定 6 0个克隆的全序列 ,经生物信息学分析 ,全长性比例在 5 0 %以上。结论 :成功构建了白念珠菌全长 c DNA文库 ,为进一步筛选、克隆白念珠菌耐药相关基因奠定了基础。
- 徐铮曹永兵高平挥张军东曹颖瑛唐榕应康姜远英
- 关键词:全长CDNA文库白念珠菌抗药性SMART
- 白念珠菌基因中断技术研究进展
- 2006年
- 白念珠菌是能感染人体的重要微生物之一。由于白念珠菌的遗传学操作较困难,因此其基因功能的研究主要依赖于酿酒酵母作为模型或替代性表达宿主。近年来,以白念珠菌自身作为宿主的基因中断技术逐渐成为研究其基因功能的主要手段,本文对这一领域的研究进展作一综述。
- 黄杉曹颖瑛姜远英
- 关键词:白念珠菌