中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX1-05-01)
- 作品数：13 被引量：64H指数：5
- 相关作者：陈大元徐营廉莉韩之明文端成更多>>
- 相关机构：中国科学院大连理工大学南京农业大学更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目国家自然科学基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 动物克隆机理研究进展被引量：18
- 2003年
- 目前动物克隆技术的应用因低效和后代生长发育异常等缺陷而受到限制。问题的根源在于对克隆基础的分子机理缺乏了解。为更好地了解该领域当前的进展 ,我们研读了相关的文献 ,包括核移植过程中核质互作、核重编程、线粒体命运、端粒变化以及X染色体失活等机理方面的著述。看来 。
- 杨彩侠陈大元
- 关键词：动物克隆分子机理核重编程重构胚
- 影响哺乳动物体细胞克隆效率因素的研究进展被引量：2
- 2003年
- 动物克隆技术的低效率在很大程度上限制了它的应用.克隆过程的多步骤决定了影响因素的多样性.综述了体细胞核的重编程、供体细胞的选择、受体胞质、活化方法、培养条件等对克隆效率的影响,对这些问题的认识将有利于对克隆机理的研究.
- 毕春明文端成陈大元
- 关键词：哺乳动物体细胞克隆体细胞核重编程供体细胞克隆效率
- 小鼠囊胚内细胞团置换被引量：2
- 2003年
- 运用显微操作和免疫手术法, 对昆明鼠和C57BL/6鼠的囊胚进行内细胞团置换. 以切除内细胞团的昆明鼠胚胎滋养层为受体, 注射免疫手术得到的昆明鼠或C57BL/6鼠的内细胞团, 获得两种重构胚. 一种是由不同昆明鼠个体的滋养层和内细胞团构建的同品系异体重构胚, 共构建192枚. 移植入17只昆明鼠受体后, 生下2只昆明小鼠. 另一种重构胚是由切除内细胞团的昆明鼠胚胎滋养层与C57BL/6鼠胚胎内细胞团构建的异品系重构胚. 对此重构胚的成活率、细胞骨架和细胞数目进行了分析, 说明至少从这3个方面来说, 这种重构胚具有一定的发育潜能. 但将115枚异品系重构胚移植入昆明鼠受体后, 目前还没有后代出生. 说明来自不同个体胚胎的同品系滋养层和内细胞团重组后能够建立细胞连接, 进行信息传递并发育为正常个体, 而异品系重构胚发育能力较低. 这项研究有可能为解决动物克隆中着床率低和胎盘异常等问题提供参考方法.
- 毕春明文端成徐营孙青原陈大元
- 关键词：小鼠重构胚哺乳动物克隆细胞骨架
- 细胞骨架抑制剂、电激活液对兔卵孤雌激活和发育的影响被引量：1
- 2009年
- 应用细胞骨架抑制剂细胞松弛素B和秋水仙素处理兔成熟卵母细胞,然后采用电激活的方法激活兔卵母细胞,观察细胞骨架抑制剂对兔卵母细胞孤雌激活和孤雌发育的影响,结果表明:应用不同的电激活液,即甘露醇、Zimmerman氏和山梨醇对兔卵母细胞的孤雌激活效果无显著性差异(P>0.05);用7.5μg.mL-1细胞松弛素B处理卵母细胞后孤雌激活,其2-细胞胚率(82.2%)和囊胚发育率(43.4%)与对照组(76.4%和51.5%)相比无显著性差异(P>0.05);用1μg.mL-1秋水仙素处理兔卵母细胞,兔卵母细胞孤雌激活后的2-细胞胚率(64.9%)和囊胚发育率(23.8%)明显下降,与对照组相比存在显著性差异(P<0.05);用细胞松弛素B和秋水仙素共同处理的2-细胞胚率(62.5%)和囊胚发育率(30.9%)与秋水仙素单独处理的结果无显著性差异(P>0.05)。因此,秋水仙素对兔卵母细胞的孤雌激活影响比CB更大。通过免疫荧光和激光扫描共聚焦显微镜观察发现,细胞骨架抑制剂处理后,经孤雌激活获得的囊胚中,微丝和微管结构未见异常。
- 徐营雷蕾杨利国陈大元
- 关键词：孤雌激活
- 6-DMAP和胚胎干细胞代数对异种重构卵体外发育的影响(简报)
- 2003年
- 核移植技术已经广泛应用于动物克隆,但是克隆动物的成活率仍然很低[1-3].
- 王鸿郑瑞珍廉莉徐营安利佳陈大元
- 关键词：异种克隆胚胎干细胞6-DMAP核移植动物克隆
- 应用激光扫描共聚焦显微镜FRAP技术研究兔早期胚胎发育中细胞间隙连接介导通讯被引量：4
- 2002年
- 本研究应用激光扫描共聚焦显微镜的光漂白恢复技术(FRAP)分析兔早期胚胎卵裂球之间通过间隙连接介导的细胞通讯(GJIC)。研究结果发现,用强激光分别将4-细胞期胚胎、异裂胚胎和8-细胞期胚胎的一个卵裂球荧光光漂白后,经过15分钟的荧光恢复,4-细胞期胚胎的光漂白恢复率为17.8％,异裂胚胎的光漂白恢复率为23.7％,二者之间没有明显的差异;8-细胞期胚胎的光漂白恢复率为78.2％,与前二者之间存在明显的差异。推测兔早期胚胎卵裂球细胞间隙连接建立的时间在8-细胞阶段,胚胎卵裂球间隙连接通讯可能是兔胚胎正常发育的重要条件。
- 徐营雷蕾刘忠华文端成廉莉朱子玉韩之明杨利国孙青原陈大元
- 关键词：激光扫描共聚焦显微镜早期胚胎发育细胞间通讯
- 不同活化方法对小鼠卵母细胞孤雌发育的影响(简报)被引量：6
- 2002年
- 随着动物克隆技术的不断发展,核移植胚胎的活化成为一个很重要的研究领域,活化的效率直接影响到克隆的成功率。小鼠体细胞克隆研究大多采用卵胞质直接注射供体细胞核的方法构建重构胚,再经SrCl_2活化处理进行体外发育。也有经电融合,SrCl_2活化产仔的报道。已有研究表明单独SrCl_2处理或电刺激均能很好地活化小鼠卵母细胞,那么在小鼠核移植过程中采用的电融合条件是否能激活卵母细胞。
- 雷蕾刘忠华寇朝辉陈大元雷蕾
- 关键词：活化方法小鼠卵母细胞孤雌发育核移植
- 干细胞与中枢神经系统损伤的修复
- 2006年
- 内源性神经干细胞,外源性神经干细胞以及胚胎干细胞具有分化为各种神经细胞的能力,神经细胞的再生在恢复中枢神经系统受损伤的功能时起着关键作用。将近年来神经干细胞和胚胎干细胞对中枢神经系统损伤的修复研究作一综述。
- 王鸿王笑虹郑瑞珍
- 关键词：神经干细胞胚胎干细胞中枢神经系统
- 以胚胎干细胞为核供体能促进异种重构胚的体外发育被引量：14
- 2002年
- 体细胞在异种成熟的去核卵母细胞中能够去分化和重编程,并能发育到囊胚,甚至能全程发育正常出生。为了评价胚胎干细胞作为供核细胞在异种动物克隆中的意义,以小鼠胚胎干细胞（ES）为核供体,兔成熟的去核卵母细胞为受体构建异种重构胚,分析其在体外的发育能力,并以小鼠胚胎成纤维细胞和成年小鼠外耳皮肤的成纤维细胞为对照。通过核移植的方法分别把3种细胞移入成熟的兔去核卵母细胞透明带下,经电融合和激活后,在体外培养,胚胎干细胞作为供核细胞所构建的异种重构胚在体外发育到囊胚的比例为16.1％,明显高于用成年小鼠外耳皮肤成纤维细胞（0％～3.1％,P<0.05）和小鼠胚胎成纤维细胞（2.1％～3.7％,P<0.05）所构建的异种重构胚的体外囊胚发育率.重构囊胚细胞经染色体分析,证实其染色体来源于小鼠胚胎干细胞。以上结果显示,用胚胎干细胞作为供核细胞,比体细胞作为供核细胞所构建的异种重构胚更容易进行重编程,并且胚胎干细胞指导异种克隆胚胎正常发育的能力强于体细胞。
- 王鸿郑瑞珍安利佳徐营徐营廉莉陈大元徐营
- 关键词：核供体体外发育胚胎干细胞成纤维细胞异种核移植异种克隆
- 精子获能与激素调节作用被引量：7
- 2003年
- 精子获能的发现和体外获能的成功是体外受精的基础。有关精子体内和体外获能的实质及获能机制 ,以及存在于雌性生殖道或精浆中的激素包括雌激素、孕酮、催乳素和前列腺素及肽类生长因子如表皮生长因子 ( EGF)、受精促进肽 ( FPP)、白细胞介素 ( IL)等对精子获能的作用已有较多的研究报道 。
- 朱子玉寇朝辉陈大元
- 关键词：精子获能体外受精激素
