山东省科技发展计划项目(2011YD18012)
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 相关作者：郁博潘敏陈宏泉苏磊张斌更多>>
- 相关机构：青岛大学第三军医大学新桥医院青岛市市立医院更多>>
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- A375细胞外信号调节激酶通路与核因子κB通路的交互作用初探被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨黑素瘤细胞A375细胞外信号调节激酶（ERK）通路与核因子κB（NF-κB）信号转导通路的交互作用.方法 将培养的A375细胞分为对照组、选择性ERK信号通路抑制剂U0126（10 μmol/L、5 μmol/L）处理组和选择性NF-κB通路抑制剂BMS-345541（10 μmol/L、5μmol/L）处理组,分别提取蛋白质和mRNA,用Western印迹、RT-PCR观察U0126抑制ERK通路后,NF-κB P65、p-IκBα蛋白及NF-κB P65mRNA的表达,观察BMS-345541抑制NF-κB通路后ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达.结果 应用10 μmol/L、5μmol/L U0126抑制ERK通路后,胞核NF-κB P65蛋白表达（分别为0.60±0.04、0.56±0.06）均较对照组（1.54±0.15）减少（P＜0.01）,其表达量与药物浓度无显著相关性（P＞ 0.01）;p-IκBα蛋白的表达（0.90±0.05、0.70±0.02）均较对照组（0.61±0.03）增加（P＜0.01）,两药物浓度组之间的表达量差异有统计学意义（P＜ 0.01）;NF-κB P65 mRNA的表达（0.79±0.05,0.75±0.04）均较对照组（0.86±0.05）减少（P＜0.01）.应用10 μmol/L BMS-345541抑制NF-κB通路后,ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达（0.73±0.07、0.75±0.09、1.51±0.02）较对照组减少（P＜0.01）,BMS-345541浓度为5μmol/L时,ERK1/2 、p-ERK 1/2蛋白和ERK1 mRNA的表达（0.94±0.11、0.99±0.04、1.62±0.03）较对照组的差异无统计学意义（均P＞0.05）.结论 NF-κB通路和ERK通路在黑素瘤A375细胞中存在交互作用.
- 秦绪艳臧运书潘敏袁梦姝郁博吴惠惠
- 关键词：黑色素瘤细胞外信号调节MAP激酶类信号转导
- 芍药苷对黑素细胞生物活性的影响被引量：4
- 2014年
- 目的：检测芍药苷对体外培养正常人表皮黑素细胞增殖活性、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法：建立正常人表皮黑素细胞培养体系，加入不同浓度（5-640μg/mL）芍药苷并作用一定时间后，采用MTT法、体外氧化DOPA反应法、NaOH法等分别测定黑素细胞增殖活性、酪氨酸酶活性及黑素含量的变化。结果：40-160μg/mL芍药苷呈剂量依赖性抑制黑素细胞增殖，与对照组比较差异有统计学意义（ P〈0.05）；5-20μg/mL芍药苷对酪氨酸酶活性呈剂量依赖性促进作用，与对照组比较差异有统计学意义（ P〈0.05）；10-20μg/mL芍药苷对黑素细胞黑素合成起促进作用，与对照组比较差异有统计学意义（ P〈0.05）。结论：芍药苷在较高浓度范围内（40-160μg/mL）对体外培养正常人表皮黑素细胞增殖有剂量依赖性抑制作用；在较低浓度范围内（10-20μg/mL）对其黑素合成有促进作用。
- 徐丽丽郁博姚如永陈宏泉赵秀峰倪少萍
- 关键词：芍药苷黑素细胞酪氨酸酶
- 阻断NF-κB和ERK通路对黑素瘤细胞增殖及凋亡的影响被引量：4
- 2014年
- 目的研究分别或联合阻断核因子κB(NF-κB)和细胞外信号调节激酶ERK两条信号通路对黑素瘤A375细胞增殖及凋亡的影响。方法将培养的黑素瘤细胞A375随机分为对照组、NF-κB通路抑制剂BMS-345541组、ERK通路抑制剂U0126处理组及BMS-345541+U0126处理组,采用噻唑蓝法(MTT)测定各组细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡率;Western blot检测两试剂处理后细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果 BMS-345541和U0126作用后对A375细胞增殖有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖性(P<0.01),作用时间24h时,BMS-345541+U0126处理组的增殖抑制率为(77.27±2.70)%,明显高于BMS-345541组(35.41±1.38)%及U0126组(30.64±2.86)%,且联合作用具有协同性;BMS-345541组、U0126组和BMS-345541+U0126处理组与对照组相比S期分别降低14.20%,18.40%及22.64%,而凋亡率分别提高24.98%,13.96%及38.91%;BMS-345541和U0126均可降低A375细胞中Bcl-2蛋白的表达,二者联合作用后Bcl-2蛋白的表达显著降低。以上差异均有统计学意义(P<0.01)。结论阻断NF-κB和ERK两条信号通路对A375细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用,两者联合具有协同效应。
- 刘宁肖君刚潘敏郁博
- 关键词：NF-KBERK黑素瘤细胞
- 皮肤黑色素瘤细胞中TGF-βRⅠ型和Ⅱ型受体表达的研究被引量：3
- 2015年
- 目的探讨转化生长因子β受体(TGF-βR)Ⅰ、Ⅱ型在皮肤黑色素瘤细胞中的表达情况。方法应用反转录-实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法,对TGF-βRⅠ、Ⅱ型的mRNA及其蛋白在人皮肤黑色素瘤A375细胞和人正常黑素细胞中的表达进行检测。结果 A375细胞中TGF-βRⅠ、Ⅱ型的mRNA和蛋白表达均显著低于正常人黑素细胞。结论在黑色素瘤细胞的TGF-β/Smad信号通路中出现TGF-βR表达的下调,可能是皮肤黑色素瘤发病机制之一。
- 郁博张斌苏磊潘敏陈宏泉
- 关键词：黑色素瘤黑素细胞
- 皮肤黑素瘤细胞3种Smad的表达
- 2015年
- 目的 探讨Smad2、Smad3、Smad4在皮肤黑素瘤细胞中的表达情况。方法 应用反转录-实时荧光定量PCR方法和蛋白印迹方法,分别检测人皮肤黑素瘤A375细胞和人正常黑素细胞中Smad2、Smad3、Smad4的mRNA及蛋白表达。结果 A375细胞中Smad2、Smad3、Smad4的mRNA和蛋白表达均显著低于人正常黑素细胞（t=2.361-4.214,P〈0.01）。结论在黑素瘤细胞的转化生长因子β（TGF-β）/Smad信号通路中Smad2、Smad3、Smad4均出现表达下调,可能参与了皮肤黑素瘤发病。
- 郁博张斌苏磊潘敏臧运书陈宏泉
- 关键词：黑素瘤黑素细胞转化生长因子ΒSMAD蛋白质类
