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HPV L1 C-末端保守序列短肽体液免疫学特性被引量：5: 2009年; 目的探讨一段位于HPVL1C-末端、长30个氨基酸残基的保守序列的体液免疫学性质而进行此实验。方法以此序列为基础人工合成短肽,以该短肽免疫小鼠和兔,获得抗血清,通过ELISA,Western Blot及免疫组织化学的方法,分别对含HPV6b,16及18L1的细胞裂解物、重组蛋白或HPV阳性临床标本进行反应。结果抗短肽抗血清能与含HPV6b,16及18L1的细胞裂解物、重组蛋白发生针对HPVL1的反应,能使HPV6和16阳性的临床标本呈现阳性反应,而抗HPV16及抗重组HPV16L1抗血清对此短肽的反应则较弱。结论结果表明由该保守序列短肽诱导的抗血清具有一定的型间交叉反应特征,这一特性可能对研究检测用广谱HPVL1抗体有一定的意义。该序列短肽抗血清对不同型HPVL1反应的差异性及抗血清对多型别HPVL1的反应是否具有中和性,尚需进一步的研究。; 姜波玲肖长义袁太宁叶红王雅琴黎家华黄利鸣; 关键词：HPV 保守序列免疫

HPV L1 C-末端保守氨基酸序列的免疫生物学性质的探讨: 2007年; 目的探讨HPV L1 C-末端保守氨基酸序列的免疫生物学性质。方法以合成HPV L1保守序列短肽、点突变该序列中酰胺化酶作用位点后的短肽以及15个氨基酸残基长的该序列交错合成的4个小肽免疫动物。采用T细胞增殖实验确定各肽是否含有T细胞表位;以ELISA方法确定各肽有无B细胞表位及有效免疫位点。结果不同肽免疫鼠T细胞增殖实验差异无统计学意义(P>0.05),两短肽免疫兔血清中IgG抗体滴度显著强于4个小肽,但兔和鼠分泌物中均未测出抗体IgG。两短肽的免疫血清对相应短肽的反应明显强于交叉反应的强度。原序列短肽的免疫血清对来自于该短肽的N-末端序列短肽的反应略强,而点突变酰胺化酶作用位点后短肽的免疫血清对C-末端序列的短肽反应略强。结论HPV L1保守序列短肽和点突变酰胺化酶作用位点后短肽在诱导体液免疫的能力方面相似,但在交叉免疫反应性及有效免疫位点方面存在差异;两短肽的免疫原性显著强于4个小肽。; 王丽芳肖长义; 关键词：短肽

临床宫颈组织标本HPV16 L1蛋白检测被引量：3: 2010年; 目的检测HPV16阳性宫颈标本L1蛋白的表达,研究宫颈损伤程度与L1蛋白表达的规律。方法应用PCR法对宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CINⅠ～Ⅱ)、原位癌、早期浸润癌及中晚期癌标本进行型别检测,ELISA法及免疫组化法检测HPV16阳性标本中HPV L1蛋白表达。结果 54例宫颈组织中HPV16阳性为46例(85.2%)。随着宫颈损伤加重,HPV16阳性标本的抗原抗体反应逐渐减弱;免疫组化阳性反应仅出现于上皮组织内,反应强度及分布与宫颈损伤程度及癌变组织的分化状态有关。结论 HPV16 L1蛋白的表达同时受宫颈组织损伤程度及宿主细胞分化状态的影响。早期对HPV L1蛋白进行检测,可为宫颈癌的早期预防及临床诊治提供理论指导。; 时艳梅肖长义叶红王雅琴吴江锋; 关键词：人乳头瘤病毒聚合酶链式反应

HPV E2蛋白及其在宫颈癌演变中的作用机制被引量：2: 2009年; 时艳梅陈建玲肖长义叶红; 关键词：E2基因宫颈癌高危型人乳头瘤病毒 DNA结合蛋白病毒基因组

宫颈癌变组织HPV DNA存在状态对病毒蛋白表达影响的研究被引量：3: 2009年; 官颈癌是全世界妇女中最常见的恶性肿瘤之一,是多因素协同作用而引发的疾病,其中人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈癌发病中起重要作用。由于不同宿主间HPV感染的清除能力差别很大,同时HPV基因组DNA在宿主基因组中的生物状态(游离、整合)亦有显著差异,故宫颈损伤程度差异很大,这势必会影响HPV生活周期中早、晚期蛋白的表达。现就影响宫颈癌变的病毒因素及癌变进程中HPV差异性表达的研究近况做一综述。; 时艳梅叶红肖长义; 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌蛋白表达

宫颈上皮细胞识别及内摄HPV机制的研究进展: 2008年; 宫颈癌是威胁我国妇女健康的主要恶性肿瘤,而人乳头瘤病毒与宫颈癌演变密切相关。人乳头瘤病毒吸附、穿入宫颈上皮细胞(宿主细胞)是一个缓慢而复杂的过程。但其感染的初始机制目前仍众说纷纭,不甚明了。对人乳头瘤病毒进入细胞发挥有效感染机制的深入研究,不仅有助于理解、认识病毒的致病性,更重要的是可为抗宫颈癌药物的开发和疫苗的研制提供理论依据。该文列举相关资料,对近期人乳头瘤病毒识别、粘附宫颈上皮细胞、依赖可能转运途径穿膜入胞相关感染机制的研究进展进行了综述。; 时艳梅肖长义叶红; 关键词：人乳头瘤病毒内吞宫颈上皮细胞

HPV L1 C-末端保守序列短肽诱导HPV多型别交叉抗体的初步研究被引量：3: 2007年; 通过对HPV L1序列进行比对,发现HPV L1 C-末端存在长30个氨基酸残基的保守序列短肽;出于检测短肽是否可以诱生HPV多种型别交叉抗体的目的,将该序列短肽加弗氏佐剂用于日本大耳白兔和BALB/c小鼠免疫,然后用ELISA方法检测此免疫动物血清及其分泌物中的IgG抗体滴度,发现此免疫动物体内已诱生出高滴度的血清IgG抗体(>1∶20000);再用ELISA、免疫组织化学和Western blot的方法对此诱生血清抗体与HPV阳性宫颈癌细胞株的反应情况进行检测,发现这些短肽抗血清可与16、18型HPV L1很好地进行反应,其对照组呈现阴性。这一研究结果表明短肽可以诱生HPV多种型别交叉抗体。它对后续研发HPV L1广谱疫苗或检测试剂盒具有重要意义。; 王丽芳肖长义; 关键词：HPV L1

分子生物学技术在HPV分型方面的应用进展被引量：5: 2009年; 大量文献资料显示人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌发生密切相关,而且不同型别致病性有明显差异性,因而对HPV感染的及早发现和正确分型将对宫颈癌防治具有重要临床意义。本文重点综述了分子生物学技术在HPV检测方面的应用,并在综合了国内外有关资料的基础上,系统论述了PCR法、核酸杂交法以及基因芯片技术的优缺点,以期今后能为试验者在选择恰当试验方法时给与相应的参考。; 马卿莲肖长义叶红; 关键词：人乳头瘤病毒基因芯片技术

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湖北省卫生厅科研基金([2006]97JX3B32)