广西大学科研基金(X071063)
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
- 相关作者:姜伯乐唐纪良何勇强黄佩芳杨艳更多>>
- 相关机构:广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西大学更多>>
- 发文基金:广西大学科研基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 野油菜黄单胞菌hpa2基因的突变和功能分析被引量:5
- 2008年
- 利用自杀质粒pK18mob诱变野油菜黄单胞菌Xcc8004的hpa2基因,获得整合突变体PK3001。致病性和过敏反应检测发现,hpa2突变体PK3001过敏反应完全丧失,但致病性无明显变化。利用gus报告基因和RT-PCR检测hpa2基因的表达调控,结果表明,hpa2基因在基本培养基上高表达,且受hrpG、hrpX正向调控。
- 姜伯乐蒋国凤黄佩芳杭小红荆龙杨艳何勇强唐纪良
- 关键词:野油菜黄单胞菌
- 含有增强型绿色荧光蛋白报告子的载体系统的构建被引量:1
- 2008年
- 将增强型绿色荧光蛋白基因编码序列克隆到不含启动子的载体pLAFR6上,构建报告质粒pLZY。将野油菜黄单胞菌的已知效应物基因xopXccN启动子和分泌转运信号区序列克隆到pLZY,重组质粒导入野油菜黄单胞菌,阳性克隆细胞在荧光显微镜下呈现绿色荧光。阳性克隆接种萝卜叶片,在共聚焦激光扫描显微镜下检测观察到在植物细胞内发荧光,而含有pLZY的野油菜黄单胞菌对照菌株菌体和植物细胞内都检测不到绿色荧光,证明报告质粒pLZY工作正常。该报告质粒为研究目的基因在不同宿主中的表达和研究植物病原细菌Ⅲ型效应物蛋白的植物亚细胞定位提供了材料。
- 姜伯乐赵宇刘建元苏莉莉刘娇王爱勤周琼李素丽陆凤花蒋建荣唐纪良
- 关键词:增强型绿色荧光蛋白报告质粒效应物亚细胞定位
- 野油菜黄单胞菌分泌组双向电泳样品制备方法的建立被引量:3
- 2010年
- 野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)是十字花科植物黑腐病的病原细菌。我们建立了Xcc的蛋白质组学研究平台,用于分离、鉴定该菌的致病相关蛋白。为了减少胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)对蛋白材料质量的影响,我们构建了EPS缺陷的Xcc8004ΔgumB突变体。本研究以Xcc8004ΔgumB出发菌株,用诱导培养液培养,取细胞上清通过超滤浓缩得到蛋白质粗提物,分别采用丙酮沉淀法、试剂盒纯化法和丙酮沉淀-试剂盒联用法来纯化蛋白质粗提物,通过比较双向电泳的结果优选最佳的样品制备方法。结果证明丙酮沉淀-试剂盒联用法较为理想,所得双向电泳图片清晰,分辨率高。因此,此方法可以用于制备野油菜黄单胞菌分泌组双向电泳样品,并可以满足进一步研究的需要。
- 岑卫健姜伯乐杨超王金子杨丽超何勇强唐纪良
- 关键词:野油菜黄单胞菌双向电泳