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江苏省自然科学基金(BK2008482)
江苏省自然科学基金(BK2008482)
作品数:
3
被引量:11
H指数:3
相关作者:
顾民
谭若芸
苏卫芳
杨俊伟
张炜
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相关机构:
江苏省人民医院
南京医科大学第二附属医院
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发文基金:
中华医学会临床医学科研专项资金
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相关领域:
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医药卫生
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细胞
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转分化
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细胞转分化
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上皮细胞转分...
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肾病
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肾小管上皮细...
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肾移植
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肾移植术
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生长因子Β
机构
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江苏省人民医...
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南京医科大学...
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谭若芸
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顾民
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张炜
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杨俊伟
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苏卫芳
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殷长军
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刘超
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方奕
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中华肾脏病杂...
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2013
1篇
2012
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2011
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肝细胞生长因子下调Smurf2拮抗肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化
被引量:4
2012年
目的通过观察肝细胞生长因子(HGF)对正常大鼠肾上皮细胞(NRK-52E)转化生长因子p1(TGF—B1)诱导的Smad泛素化调节因子2(Smurf2)表达的影响,探讨HGF拮抗肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化(EMT)的分子机制。方法以NRK。52E细胞为研究对象,给予TGF—B1(5μg/L)处理0~24h;或部分细胞经HGF(20μg/L)预处理30min后,再予TGF-β1(5μg,L)处理1h或48h;另外部分细胞予以Smurf2质粒表达载体或Smurf2siRNA转染24h后,再予HGF处理24h。应用Western印迹及间接免疫荧光染色方法检测Smurf2、SnoN、E钙黏蛋白(E—cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(d—SMA)和纤连蛋白(FN)的表达。结果与对照组相比,TGF—β1处理后迅速上调NRK-52E细胞中Smurf2蛋白表达(P〈0.01);同时显著诱导FN和α—SMA蛋白表达,并下调E-cadherin表达。而予HGF预处理细胞后,可快速抑制TGF—β1诱导的Smurf2表达上调(P〈0.01);并逆转TGF-β1介导的SnoN(P〈0.01)、E-cadherin(P〈0.05)、α-SMA(P〈0.01)和FN(P〈0.01)表达变化。此外,在NRK-52E细胞中过表达Smurf2蛋白可部分抑制HGF诱导的SnoN蛋白上调;而抑制Smurf2表达则可进一步促进HGF诱导的SnoN蛋白表达。结论在肾小管上皮细胞中,HGF可能通过下调Smurf2表达抑制SnoN蛋白发生泛素-蛋白酶体依赖性降解,进而拮抗TGF-β1介导EMT形成。
谭若芸
方奕
苏卫芳
杨俊伟
张炜
顾民
关键词:
肝细胞生长因子
转化生长因子Β1
晚期糖基化终末产物诱导大鼠主动脉平滑肌细胞转分化的研究
被引量:4
2013年
目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)参与肾移植术后动脉粥样硬化形成的机制。方法原代培养SD大鼠主动脉平滑肌细胞;用AGEs或牛血清白蛋白200mg/L作用该细胞不同时程(12h~12d),采用Western blot法和间接免疫荧光法检测eL.平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、特异性核转录斟子(RUNX2)和骨桥蛋白(OPN)的表达。结果第2~5代VSMCs中α-SMA高度表达;在AGEs作用后α-SMA表达量及阳性细胞数进行性减少;RUNX2及OPN表达进行性升高。Western blot检测α-SMA依次为:1.1170±0.1080、1.1820±0.1313、1.1060±0.0738、0.8360±0.0329、0.7430±0.0504、0.5790±0.0718、0.4600±0.1007、0.2230±0.0658、0.1810±0.0427;OPN依次为:0.0320±0.0019、0.0330±0.0010、0.0380±0.0054、0.0470±0.0077、0.0380±0.0232、0.1520±0.0460、0.2220±0.0536、0.4040±0.0290、0.6730±0.0495;RUNX2依次为:0.3640±0.0477、0.3690±0.0133、0.4840±0.0462、0.5290±0.0452、0.8850±0.0788、1.1500±0.1001、1.3460±0.1216,各组间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论AGEs可能通过上调RUNX2表达诱导VSMCs向成骨细胞转分化,进而促进肾移植术后动脉粥样硬化的进展。
刘超
谭若芸
殷长军
顾民
关键词:
肾移植术
晚期糖基化终末产物
转分化
Smurf2在梗阻性肾病小鼠肾小管上皮细胞转分化形成中的作用
被引量:3
2011年
目的:探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在小鼠单侧输尿管梗阻所致肾间质纤维化进展中的作用机制。方法:采用结扎雄性CD-1小鼠单侧输尿管(UUO)的方法建立肾间质纤维化动物模型,设假手术为对照组(Sham组)。术后3、7、14 d处死小鼠。用常规病理染色法观察两组小鼠肾组织形态和肾间质纤维化程度;以免疫蛋白印迹及免疫组织化学染色法检测两组小鼠肾组织中Smurf2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接素(FN)的表达和分布。结果:与Sham组相比,UUO术后7 d小鼠出现部分肾小管扩张、萎缩和肾间质纤维化。同时,UUO术后肾组织中Smurf2、α-SMA和FN表达呈时间依赖性升高,E-cadherin表达则明显下降。并且,Smurf2蛋白主要分布于肾小管上皮细胞核内;α-SMA分布于肾小管上皮细胞和肾间质中;FN则分布于肾间质中。相关回归分析表明:UUO术后小鼠肾组织内Smurf2表达与α-SMA(r=0.765,P<0.001)和FN蛋白水平呈正相关(r=0.773,P<0.001);与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.656,P<0.001)。结论:梗阻性肾病小鼠肾组织中Smurf2可能通过诱导肾小管EMT形成促进肾间质纤维化的进展。
谭若芸
王晓华
苏卫芳
杨俊伟
张炜
顾民
关键词:
SMURF2
梗阻性肾病
肾间质纤维化
肾小管上皮细胞转分化
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