国家自然科学基金(30772048)
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
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- CD4^+CD25^+调节性T细胞活化对CCR4/CCR5膜表达及功能的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨CD3/CD28抗体包被磁珠刺激活化的小鼠CD4+CD25+调节T细胞(Treg)表面趋化因子受体CCR4/CCR5表达及免疫抑制功能变化。方法采用磁性激活细胞分离器(MACS)纯化C57BL/6小鼠脾细胞中的CD4+CD25+T细胞,采用CD3/CD28抗体包被磁珠与鼠重组白细胞介素2刺激0、2、4 d后,流式细胞仪检测CCR4与CCR5的表达,3H-TdR掺入法检测细胞增殖活性。结果活化的CD4+CD25+T细胞CCR4的表达率明显高于CD4+CD25-T细胞对照组,CCR5的表达率明显低于对照组细胞。CD4+CD25+调节T细胞CCR4、CCR5的表达随活化时间延长持续增强,CD4+CD25-T细胞CCR5表达则逐渐减弱、CCR4表达无显著变化。活化的CD4+CD25+T细胞可明显抑制CD4+CD25-T细胞增殖,当比值为1∶1时抑制率达88.4%。结论 CD3/CD28抗体包被磁珠刺激可以增强CD4+CD25+T细胞膜表面CCR4、CCR5表达;活化CD4+CD25+T细胞免疫抑制功能强于新鲜分离的CD4+CD25+T细胞。
- 张新奇徐述雄刘宏吴雄飞
- 关键词：趋化因子趋化因子受体
- IL-15通过Bcl-xl抑制CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡被引量：5
- 2010年
- 目的探讨IL-15抑制CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)凋亡的作用及机制,为临床应用IL-15提供理论依据。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的Tregs,流式细胞仪检测该细胞纯度。将Tregs细胞培养液中加入Dynabeads CD3/CD28T cell expander,依据是否加入细胞因子分为三组:对照组(不加入任何细胞因子);IL-2组(100U/ml)和IL-15组(50ng/ml)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,3H-TdR掺入法检测细胞因子存在下Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western-blot法检测细胞内Bcl-2、Bcl-xl及p-Bad(ser112)的变化。结果分选后Tregs纯度为95.2%,胞内因子染色Foxp3在Tregs中的表达率为94.2%。IL-2组和IL-15组的细胞凋亡率(即凋亡细胞与细胞总数之比)分别为(11.32±0.43)%和(9.89±5.38)%,二者之间无显著性差异,但均显著低于对照组(87.12±1.43)%,P<0.001。在细胞因子存在的情况下,IL-2组活化的Teff增殖较对照组和IL-15组显著性强,P<0.001;此时Tregs抑制Teff增殖的功能较对照组和IL-15组下降,P<0.001;而在IL-15存在的情况下,IL-15组活化的Teff增殖与对照组比较,无显著性差异,P>0.05,并且IL-15组Tregs对Teff增殖的抑制作用与对照组比较无显著性差异,P>0.05。Western-Blot显示三组TregsBcl-2表达水平相当;但是IL-2组和IL-15组的Bcl-xl和p-Bad(ser112)表达较对照组显著性上调。结论 IL-15能抑制Tregs凋亡,其作用与IL-2相当,其机制可能是通过上调Bcl-xl的表达和Bad(ser112)的磷酸化,而且IL-15存在的情况下,Tregs抑制功能明显比IL-2存在时强。
- 徐述雄李晓伟孙兆林何坚陈丽萍吴雄飞刘宏
- 关键词：白介素15凋亡调节性T细胞
- IL-15诱导CD4^+CD25^- T细胞向CD4^+CD25^+调节性T细胞转化的机制探讨被引量：4
- 2010年
- 目的初步探讨IL-15诱导CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)转化的机制。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的CD4+CD25-T细胞,依据加入细胞因子不同分为4组:对照组、IL-15组、拮抗1组、拮抗2组,其中后3组均于培养的第1天加入IL-15,而拮抗1组和拮抗2组分别于培养第1、3天加入STAT5a封闭性肽。流式细胞仪检测细胞表型变化,3H-TdR掺入法检测IL-15诱导产生的Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western blot法检测细胞内p-STAT5的变化。结果与对照组比较,IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达上调,IL-15诱导生成的Tregs具有较天然Tregs稍弱的免疫抑制功能。Western blot检测结果显示,IL-15组p-STAT5表达较对照组明显上调。加入STAT5a封闭性肽后,拮抗1组和拮抗2组中CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达下调,但拮抗2组[细胞表型分别为(47.9±6.0)%、(20.7±3.4)%]改变较拮抗1组[细胞表型分别为(30.7±8.5)%、(9.2±2.2)%]改变轻微。结论IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞向Tregs转化,其机制可能是上调p-STAT5的表达。
- 徐述雄傅晓岚孙兆林李晓伟陈丽萍刘宏吴雄飞
- 关键词：白介素-15调节性T细胞T细胞
- 供体特异性输血在亲体肾移植的初步分析被引量：1
- 2008年
- 目的探讨供体特异性输血对亲体肾移植患者围手术期并发症和术后人肾存活率的影响。方法将我院2005—2007年收治的52例亲体肾移植患者按是否进行供体特异性输血分为供体输血组和对照组，供体输血组于术前3d采集全血200—400ml，术中用于受者；对照组术中随机使用库存血。对比分析两实验组在肾移植后移植肾的功能（血肌酐测定）、急性排斥反应发生率、移植肾功能延迟恢复（delayedgraftfunction，DGF）发生率。结果供体输血组和对照组在供肾GFR、HLA配型、供者和受者年龄方面无显著差异（P〉0．05）。供体输血组术中输供体全血（334±56．4）ml，随机输注浓缩红细胞（238±105）ml；对照组输注浓缩红细胞（698±243）ml。供体输血组与对照组术后1周血肌酐水平无显著差异（P〉0．05），术后急性排斥反应和DGF发生率低于对照组（分别为3．57％、16．67％）。结论供体特异性输血可明显减少移植术中库存非亲体血使用量，减少术后急性排斥和DGF发生率，有效提高了移植受者围手术期的成功率。
- 刘宏赵洪雯李敛余荣杰吴雄飞
- 关键词：肾移植供体特异性输血亲体肾移植
