浙江省教育厅科研计划项目(Y20106491)
- 作品数：1 被引量：13H指数：1
- 相关作者：林贤丰邵培刚王辉张建色梅劲更多>>
- 相关机构：温州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅新苗人才计划温州市科技局资助项目浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去细胞全肾生物支架的制备与鉴定被引量：13
- 2012年
- 目的通过灌注加浸泡法制备全肾细胞外基质支架,并对该生物支架进行鉴定。方法健康成年SD大鼠20只,取肾,行肾动脉留置针插管,灌注压3.6mmHg,恒温37℃依次浸泡灌注肝素化PBS溶液、0.05%胰蛋白酶溶液、1%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、1%Trition X-100溶液以及含青、链霉素的PBS溶液。处理后,行DNA定量与定性分析,透射电镜、HE染色及免疫荧光观察残留细胞核成分,进一步丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂(ABS)铸型观察肾内血管分布情况。结果去细胞组DNA含量较对照组下降了97%,琼脂糖凝胶电泳未见明显DNA条带;透射电镜、HE染色及免疫荧光观察去细胞组保留了大量细胞外基质,未见明显细胞核成分残留;铸型标本显示去细胞组血管较稀疏,分支完整、清晰。结论联合酶消化法与去垢剂洗涤法,经灌注加浸泡法处理的全肾,可有效清除肾内所有细胞成分,较好地保留细胞外基质支架和血管网络结构,是一种简单易行且较为理想的制备组织工程肾生物支架的方法。
- 张建色王辉邵培刚林贤丰彭蒙蒙薛向阳梅劲
- 关键词：去细胞细胞外基质血管铸型免疫荧光
