卫生部科技专项基金(W201210)
- 作品数：3 被引量：21H指数：2
- 相关作者：蒋晓东刘亮乔云刘毅陈晖更多>>
- 相关机构：连云港市第一人民医院徐州医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰VEGFR-2表达对Calu-1细胞增殖、迁移、侵袭力及放射效应影响被引量：2
- 2015年
- 目的：研究VEGFR？2对肺癌细胞系Calu？1细胞增殖、迁移、侵袭及联合放射后凋亡率影响，并探讨其可能机制。方法 siRNA敲低Calu？1细胞中的VEGFR？2基因，借助实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测VEGFR？2表达水平的变化；将细胞分为对照组、VEGF组、VEGFR？2基因敲低组和基因敲低加VEGF组。利用CCK8法、细胞划痕实验及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力变化，利用蛋白印迹法检测VEGFR？2及下游相关信号通路蛋白表达水平变化；各组细胞联合放射后，检测细胞凋亡。结果 RNA干扰VEGFR？2后Calu？1细胞中VEGFR？2的mRNA水平和蛋白水平均降低（ P＝0．001、0．000）；RNA干扰VEGFR？2后Calu？1细胞的增殖、迁移、侵袭能力均降低（ P＝0．000、0．000、0．031）；RNA干扰VEGFR？2后Calu？1细胞中Akt、ERK 1／2、p38的蛋白磷酸化水平均降低（ P＝0．336、0．986、0．553）；RNA干扰VEGFR？2后联合放射后Calu？1细胞的凋亡率增加（ P＝0．012），RNA干扰VEGFR？2后HIF？1α蛋白表达被抑制（ P＝0．016）。结论 VEGFR？2基因表达敲低后显著抑制了Calu？1细胞的多项生理功能，并提高了放射后细胞凋亡率。
- 刘毅刘亮胡晨曦周莉华乔云王磊刘彬陈晖蒋晓东
- 关键词：血管内皮生长因子受体2
- 内皮抑素对NSCLC细胞系中VEGF受体2表达的影响及其放射增敏效应机制研究被引量：5
- 2015年
- 目的：研究内皮抑素对NSCLC细胞（人肺腺癌A549细胞、人肺鳞癌Calu.1细胞）中VEGF受体2（ VEGFR2）表达影响，并探索其放射增敏效应的可能机制。方法 CCK8法检测内皮抑素对细胞增殖抑制作用，计算24 h的20％药物抑制浓度（ IC20）；采用RT.PCR及蛋白印迹法检测各组VEGFR2、相关信号通路及HIF.1α mRNA与蛋白表达变化；克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性，流式细胞术检测凋亡及周期分布。多样本均数比较采用单因素方差分析，组间比较采用两样本均数t检验。结果经内皮抑素处理后，Calu.1细胞增殖活力明显下降（F＝50.36，P＜0.01），IC20＝296.5μg／ml；VEGFR2和HIF.1αmRNA与蛋白表达水平均受抑制（F＝25.43、10.44，P 值均＜0.05）；同时Akt、ERK 1／2和p38的蛋白磷酸化水平均减低（ F＝2.89、0.24、1.09，P值均＜0.05）；其放射增敏比为1.38；凋亡率、G2＋M期阻滞增加（ F＝44.15、104.24，P值均＜0.01）。此外，与Calu.1细胞相比，内皮抑素对A549细胞放射增敏比为1.09。结论内皮抑素能促进VEGFR2高表达Calu.1细胞凋亡并能增强放射敏感性，对低表达的A549细胞效果有限。
- 刘亮刘毅夏铀铀胡晨曦乔云王磊刘彬陈晖蒋晓东
- 关键词：内皮抑素A549细胞系血管内皮生长因子受体2
- 人非小细胞肺癌VEGFR2和NRP-1表达意义分析被引量：14
- 2014年
- 目的:探讨人非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)组织中VEGFR2和NRP-1的表达情况及临床意义。方法:选取2009-01-01-2012-11-30连云港市第一人民医院手术切除并经病理确诊的NSCLC石蜡包埋标本40例和肺良性组织10例,采用免疫组化方法(IHC)测定VEGFR2、NRP-1表达,运用荧光原位杂交技术(FISH)检测VEGFR2基因(KDR)及NRP-1基因拷贝获益(copy number gains,CNG),最终所获结果结合患者的临床病理资料进行分析。结果:40例NSCLC组织中VEGFR2蛋白高表达率为57.5%,NRP-1蛋白高表达率为55.0%;KDR CNG(+)比率为32.5%,NRP-1CNG(+)的比率为30.0%。VEGFR2蛋白在NSCLC组织中的表达与肺良性病变的阴性表达比较,差异有统计学意义,χ2=10.65,P<0.001;NRP-1蛋白在NSCLC组织中的表达与肺良性病变的阴性表达比较,差异有统计学意义,χ2=9.82,P=0.002,且其表达与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移和肿瘤组织分化程度有关,P<0.05;与患者年龄和病理类型无关,P>0.05。肺癌患者中KDR CNG(+)与肺良性病变KDR CNG(-)比较差异有统计学意义,χ2=4.39,P=0.04;肺癌患者中NRP-1CNG(+)与肺良性病变CNG(-)比较差异有统计学意义,χ2=3.95,P=0.04;且其与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移和肿瘤组织分化程度有关,P<0.05;而与患者年龄和病理类型无关,P>0.05。结论:VEGFR2、NRP-1在NSCLC组织中均有高表达,并且它们在NSCLC发生、发展和转移中有重要意义,对临床判断NSCLC预后和指导临床抗血管生成有一定的价值。
- 丁曼华刘亮刘毅乔云蒋晓东
- 关键词：病理学血管内皮生长因子受体2神经纤毛蛋白-1病理学
