国家自然科学基金(30600202)
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 相关作者：马国诏张镛付庆喜高建新刘克敬更多>>
- 相关机构：山东大学临沂市人民医院山东省立医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Aβ_(1-42)对大鼠基底前脑神经元K_(ATP)通道各亚基蛋白表达的影响被引量：4
- 2007年
- 目的研究β淀粉样蛋白(Aβ1-42)对原代培养基底前脑胆碱能神经元ATP敏感性钾通道(KATP)各亚基蛋白表达的影响,探讨阿尔茨海默病发病的细胞毒性分子机制。方法运用细胞原代培养的方法培养大鼠基底前脑胆碱能神经元并进行鉴定,用2μmmol/L的Aβ1-42对原代培养细胞进行干预,免疫荧光双染及免疫印记观察干预后不同时间(分别为0,24,72 h)细胞KATP通道各亚基Kir6.1、Kir6.2和SUR1、SUR2蛋白表达水平的变化。结果与正常对照组比较,Aβ1-42作用胆碱能神经元24 h后,KATP通道亚基Kir6.1及SUR2蛋白表达显著增多(P<0.05),而亚基Kir6.2及SUR1蛋白表达无明显变化。但Aβ1-42作用时间达72 h后,KATP通道各个亚基蛋白表达均显著升高(P<0.05)。结论Aβ1-42作用胆碱能神经元不同的时间段(24 h和72 h),细胞KATP通道各亚基蛋白表达有不同程度的增加,且增加速度不一致。可能由此改变KATP通道的结构和功能,从而影响Aβ1-42的神经细胞毒性作用。
- 付庆喜马国诏高建新毕爱玲刘克敬张镛郑敏刘振芳
- 关键词：Β淀粉样蛋白基底前脑胆碱能神经元ATP敏感性钾通道
- 阿尔茨海默病免疫机制及免疫治疗研究进展被引量：2
- 2010年
- 阿尔茨海默病（AD）是老年人大脑皮质和海马区神经变性疾病，严重影响老年人的生活质量，给社会和家庭带来极大负担。随着我国社会人口的老龄化，阿尔茨海默病发病率明显升高，而临床上尚缺乏有效的防治药物及措施。
- 马国诏
- 关键词：阿尔茨海默病免疫疗法
- ATP敏感性钾通道在神经系统疾病中的研究进展被引量：2
- 2008年
- ATP敏感性钾通道（ATP-sensitive potassium channel,KATP）属于内向整流钾通道超家族的一种,通道的开闭直接受到胞内ATP／ADP的影响。被认为是一种与细胞代谢状态密切相关的配体门控型离子通道。KATP于1983年由Noma最早发现于心肌细胞，随后在其他细胞类型上发现有该通道的存在，例如胰腺B细胞、神经细胞、骨骼肌、肾脏上皮细胞和平滑肌细胞以及线粒体内膜上也富含KATP，其共同作用是通过感受细胞内ATP／ADP水平直接将细胞代谢状态与电活动相偶联。因此在缺氧缺血、氧化应激、毒物损伤及血糖浓度变化等病理情况下，
- 付庆喜马国诏张镛蒋亮亮王瑞霞李甲龙
- 关键词：ATP敏感性钾通道脑缺血癫痫帕金森病
- 二氮嗪预处理对Aβ_(1-42)作用神经元K_(ATP)各亚基表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨ATP敏感的钾离子(KATP)通道开放药物二氮嗪防治A1-42细胞毒性作用的分子机制。方法采用细胞原代培养的方法,培养大鼠皮层神经元并进行鉴定。将原代培养的细胞随机分为对照组、单纯Aβ1-42干预组、二氮嗪预处理1 h后Aβ1-42干预组、单纯二氮嗪预处理组和单纯Aβ42-1干预组(Aβ1-42反序列对照),各组又分为24、72 h两个亚组。采用免疫荧光双染及免疫印迹法,观察干预后不同培养时间(24、72 h)细胞KATP通道各亚基Kir6.1、Kir6.2、SUR1、SUR2蛋白表达水平的变化。结果与对照组比较,单纯A1-42处理24 h组Kir6.1、SUR2显著升高(P<0.05),二氮嗪预处理后Aβ1-42作用细胞24 h组各亚基表达均无明显变化;二氮嗪预处理后Aβ1-42作用细胞72 h组与单纯A1-42处理72 h组KATP通道各亚基表达均明显升高(P<0.05),而二氮嗪预处理后Aβ1-42作用细胞72 h组与单纯A1-42处理72 h组相比Kir6.1、Kir6.2、SUR2表达显著下调(P<0.05)。结论二氮嗪预处理可完全逆转A1-42作用神经元24 h所引起的Kir6.2及SUR1的表达上调,只能部分逆转A1-42作用神经元72 h所引起的Kir6.1、Kir6.2、SUR2的表达增加,可能会维持神经细胞正常生理功能,起到防治A1-42细胞毒性作用。
- 付庆喜马国诏车峰远高乃永高建新张镛
- 关键词：淀粉样Β蛋白细胞毒素类二氮嗪
- 二氮嗪、环孢菌素A拮抗Aβ1-42致胆碱能神经元凋亡的研究被引量：2
- 2009年
- 目的研究ATP敏感性钾离子通道开放剂二氮嗪、环孢菌素A及两者协同对β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)致原代培养基底前脑胆碱能神经元凋亡的影响。方法采用2μmol/L的Aβ1-42对原代培养大鼠胆碱能神经元进行干预,建立阿尔茨海默病(AD)细胞凋亡模型;采用500μmol/L二氮嗪(预处理1 h)、20μmol/L环孢菌素A以及两者协同对其干预,作用不同时间(24、72 h)后置于倒置显微镜下观察细胞形态;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,Wes-tern blot法检测细胞内凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果①Aβ1-42作用胆碱能神经元72 h后,Bcl-2表达量降低(P<0.01),细胞色素C、Caspase-3、Cleaved caspase-3的表达量增加(P<0.01,P<0.001,P<0.01),Bax未见明显变化,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.01),细胞形态发生明显损伤性变化,细胞存活率明显降低(P<0.001);②二氮嗪、环孢菌素A以及两者协同作用24 h后Bcl-2的表达增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01),作用72h能明显增加Bcl-2的表达(P<0.05,P<0.01,P<0.01),并提升Bc-2/Bax比率而抑制细胞色素C、Caspase-3、Cleaved caspase-3表达量(P<0.05,P<0.01,P<0.001),细胞存活率均增高(P<0.01,P<0.001)。结论Aβ1-42作用胆碱能神经元72 h能促使细胞凋亡,二氮嗪与环孢菌素A及两者协同可以明显拮抗Aβ1-42致细胞凋亡作用。
- 蒋亮亮付庆喜王瑞霞马国诏高建新刘克敬张镛
- 关键词：淀粉样Β蛋白二氮嗪环孢菌素胆碱能神经元ATP敏感性钾离子通道
- 二氮嗪对Alzheimer病模型大鼠行为学及其相关凋亡因子的影响被引量：1
- 2010年
- 目的建立β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)致Wistar大鼠阿尔茨海默病(AD)模型,探讨二氮嗪干预后大鼠行为学及其相关凋亡因子表达的变化。方法大鼠双侧侧脑室注射Aβ1-42两周后诱导建立AD模型,部分大鼠同时注射二氮嗪干预。通过Y型迷宫电刺激评价大鼠学习和记忆能力,采用蛋白电泳方法检测大鼠大脑皮层和海马部位神经细胞内凋亡因子(Bcl-2)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平的变化。结果与正常对照组和生理盐水组比较,Aβ1-42组大鼠学习记忆能力下降,大脑皮层和海马部位神经细胞Bcl-2表达量减少,Caspase-3表达量增加(P<0.01)。与Aβ1-42组比较,二氮嗪+Aβ1-42组大鼠学习记忆能力有所提高,神经细胞Bcl-2表达量增加,Caspase-3表达量减少(P<0.05)。结论二氮嗪能提高Aβ1-42组大鼠的学习记忆能力,可能具有抗细胞凋亡的作用。
- 李甲龙马国诏张镛杜怡峰赵云霞李景新刘克敬
- 关键词：二氮嗪淀粉样Β蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- Aβ_(1~42)诱导K_(ATP)亚基SUR1/Kir6.2蛋白表达的信号转导通路研究
- 2021年
- 目的分析探讨β-淀粉样蛋白_(1~42)(Aβ_(1~42))诱导ATP敏感性钾离子通道(K_(ATP))亚基SUR1/Kir6.2蛋白表达上调的潜在信号转导机制。方法采用免疫细胞化学法鉴定原代培养的大鼠皮质和海马神经元,实验组分别加入0.50μmol/L核因子-κB(NF-κB)抑制剂SN50、2μmol/L p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580或者2μmol/L蛋白激酶C(PKC)抑制剂CTC,于30 min后分别加入2μmol/L Aβ_(1~42),培养72 h后采用Western blotting法检测K_(ATP)亚基SUR1/Kir6.2蛋白的相对表达量。结果(1)NF-κB抑制剂SN50:SN50+Aβ_(1~42)组SUR1/Kir6.2蛋白表达量低于对照组(t=6.237,P=0.010;t=7.136,P=0.004)和Aβ_(1~42)组(t=12.620,P=0.000;t=18.580,P=0.000),SN50组SUR1/Kir6.2蛋白相对表达量低于对照组(t=12.240,P=0.000;t=4.906,P=0.034)、Aβ_(1~42)组(t=18.620,P=0.000;t=16.350,P=0.000)和SN50+Aβ_(1~42)组(t=6.002,P=0.012)。(2)p38 MAPK抑制剂SB203580:SB203580+Aβ_(1~42)组SUR1/Kir6.2蛋白相对表达量低于Aβ_(1~42)组(t=13.010,P=0.000;t=8.506,P=0.001),仅Kir6.2蛋白相对表达量高于对照组(t=7.537,P=0.003);SB203580组SUR1/Kir6.2蛋白相对表达量低于对照组(t=8.089,P=0.002;t=19.380,P=0.000)、Aβ_(1~42)组(t=18.870,P=0.000;t=35.430,P=0.000)和SB203580+Aβ_(1~42)组(t=5.869,P=0.014;t=26.920,P=0.000)。(3)PKC抑制剂CTC:CTC+Aβ_(1~42)组SUR1蛋白相对表达量高于对照组(t=4.756,P=0.040)、但低于Aβ_(1~42)组(t=15.170,P=0.000),CTC组SUR1蛋白相对表达量低于对照组(t=24.000,P=0.000)、Aβ_(1~42)组(t=43.930,P=0.000)和CTC+Aβ_(1~42)组(t=28.760,P=0.000);CTC+Aβ_(1~42)组Kir6.2蛋白相对表达量低于对照组(t=15.000,P=0.000)和Aβ_(1~42)组(t=24.140,P=0.000),CTC组Kir6.2蛋白相对表达量低于对照组(t=9.429,P=0.001)和Aβ_(1~42)组(t=18.570,P=0.000)、但高于CTC+Aβ_(1~42)组(t=5.571,P=0.018)。结论NF-κB、p38 MAPK和PKC信号转导通路参与Aβ_(1~42)上调大鼠皮质和海马神经元K_(ATP)亚基SUR1/Kir6.2蛋白的表达。
- 李艳菊张戈王晓静邢孝民马国诏
- 关键词：钾通道P38丝裂原活化蛋白激酶类印迹法
