国家自然科学基金(31371726) 作品数:15 被引量:88 H指数:6 相关作者: 郑喜群 刘晓兰 周利敏 刘玥 王晓杰 更多>> 相关机构: 齐齐哈尔大学 哈尔滨商业大学 黑龙江八一农垦大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 化学工程 更多>>
玉米蛋白水解物免疫活性的研究 被引量:7 2021年 为拓展玉米蛋白粉在功能食品领域的应用,研究了玉米蛋白双酶水解产物(corn gluten hygrolysate,CGH)的体外脾淋巴细胞增殖活性,以及其对免疫抑制小鼠免疫调节作用及体内抗氧化活性的影响。利用复合蛋白酶和碱性蛋白酶协同作用于玉米蛋白粉制备CGH,进行体外脾淋巴细胞增殖活性测定,初步确定其免疫增强活性,然后构建免疫抑制动物模型。小鼠灌胃CGH,第21天用环磷酰胺诱导免疫抑制,测定细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-2和IL-6)分泌水平,以及抗氧化酶活性和丙二醛含量。结果表明:CGH质量浓度在80~320μg/m L时对体外培养的脾细胞具有促增殖的作用;与模型组相比,高、中、低剂量组[200、100、50 mg/(kg·d)]能显著提高免疫抑制小鼠TNF-α和IFN-γ含量,高、中剂量组能显著提高IL-2含量,高剂量组能显著提高IL-6含量,高、中剂量组显著提高小鼠超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶和过氧化氢酶含量,并且降低了丙二醛含量(P <0. 05)。因此,CGH在体外及体内均具有良好的免疫调节作用,是潜在的免疫调节剂,该研究为玉米蛋白源免疫活性肽在功能食品中的应用奠定了基础。 高健 林巍 刘晓兰 刘晓兰 郑喜群 李冠龙关键词:玉米蛋白粉 酶解物 免疫活性 复合蛋白酶水解玉米谷蛋白产物的抗氧化活性研究 被引量:18 2015年 以玉米谷蛋白为原料,利用复合蛋白酶对其进行限制水解,探讨不同水解时间所获得的谷蛋白酶解物的分子量分布和抗氧化活性。结果表明:不同水解时间获得的酶解物分子量分布差异较大。水解时间为120min的酶解物中,分子量分布为6 511.51-307.32Da的肽段占94.36%,此时获得的酶解物的抗氧化活性最高,其对DPPH自由基、O-2·、·OH的清除率分别为58.86%,82.64%,37.21%;还原力为0.236;与亚铁离子的螯合能力为29.92%。 刘玥 刘晓兰 郑喜群 周利敏关键词:蛋白酶 谷蛋白 抗氧化活性 DNS法测定D-氨基葡萄糖含量方法的研究 被引量:11 2014年 建立了DNS法测定调味品中色素D-氨基葡萄糖含量的方法。研究了反应的测定波长、DNS试剂用量、反应时间、反应温度、反应液体积以及反应产物在5h 内的显色稳定性对测定结果的影响。结果表明:DNS法测定D-氨基葡萄糖含量的最适波长为520 nm,D-氨基葡萄糖浓度在100~300μg/mL时,DNS试剂用量为1.0 mL,沸水浴反应8 min,反应液体积4 mL,反应产物在5 h内显色性质稳定,该方法精密度良好,RSD为0.08%,回收率为98.86%。 刘玥 刘晓兰 周利敏 郑喜群关键词:D-氨基葡萄糖 分析方法 玉米蛋白水解条件对蛋白水解物体外解酒活性的影响 被引量:2 2015年 玉米蛋白粉是玉米湿法生产淀粉的副产物,含蛋白质质量分数62%~71%。玉米蛋白粉疏水性强的特点限制了其在食品行业的应用。但是,玉米蛋白具有特殊的氨基酸组成,且在其多肽链中存在促酒精代谢、抗氧化等功能区,这为其功能性的表现提供了良好的原料优势。利用碱性蛋白酶(Alcalase)和复合蛋白酶(Protamex)对高底物质量浓度(10 g/100 m L)玉米蛋白进行水解,研究水解条件对蛋白水解物的乙醇脱氢酶(ADH)激活率、·OH清除活性和蛋白回收率的影响。结果表明Alcalase水解玉米蛋白的适宜条件为酶解温度65℃,p H 8.0,加酶量2.5%,时间2h,该条件下蛋白水解物的ADH激活率为18.62%,·OH清除率为82.9%,蛋白回收率为25.08%;Protamex水解玉米蛋白的适宜条件为酶解温度55℃,p H 7.0,加酶量2.5%,时间2 h,该条件下玉米蛋白水解物的ADH激活率为9.67%,·OH清除率为82.0%,蛋白回收率为17.63%。Alcalase和Protamex顺序协同水解(酶底比为1.5%+1.5%)所得玉米蛋白水解物的ADH激活率达到19.71%,·OH的清除率达到76.7%,蛋白回收率为52.63%。优化条件下蛋白水解物多肽分子量主要分布在955.0~546.8 Da之间。 彭楠 刘晓兰 王晓杰 薛丹 郑喜群关键词:解酒 酶底比对玉米蛋白水解物抗氧化活性的影响 被引量:5 2015年 为改善玉米蛋白的功能特性,开发其生理活性,采用复合蛋白酶(Protamex)和碱性蛋白酶(Alcalase)对高底物浓度1:10(m/v)玉米蛋白进行协同水解,研究酶底比对蛋白水解物的DPPH自由基清除率、·OH清除活性、Fe2+螯合能力、还原力、水解度(DH)和可溶性蛋白含量的影响。结果表明,在试验范围内,Protamex+Alcalase顺序协同水解玉米蛋白的最适酶底比为:2.0%+2.0%(w/w),此时玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率(82.01±0.62)%,·OH自由基的清除活性为(78.8±0.56)%,Fe2+螯合能力为(43.3±1.20)%,还原力为0.43±0.03,DH为(19.93±0.59)%,可溶性蛋白含量为(63.20±0.04)mg/m L;Alcalase+Protamex顺序协同水解玉米蛋白的最适酶底比为:0.5%+0.5%(w/w),此时玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率(84.99±0.20)%,·OH自由基的清除活性为(89.9±1.63)%,Fe2+螯合能力为(40.95±0.43)%,还原力为0.454±0.01,DH为(9.43±0.70)%,可溶性蛋白含量为(40.54±0.01)mg/m L。因此,酶底比显著影响了玉米蛋白水解物的抗氧化活性。 彭楠 刘晓兰 郑喜群关键词:抗氧化 还原力 TGase催化玉米醇溶蛋白糖基化改性 被引量:18 2014年 利用转谷氨酰胺酶(transglutaminase,TGase)催化玉米醇溶蛋白与氨基葡萄糖盐酸盐(glucosamine hydrochloride,GAH)发生交联反应。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳确认玉米醇溶蛋白与GAH发生交联反应。以玉米醇溶蛋白糖基化修饰产物中GAH导入量为指标,优化糖基化反应条件,并对玉米醇溶蛋白糖基化修饰样品的溶解性进行了表征。结果表明,最适的糖基化反应条件为底物质量浓度5 g/100 m L、TGase添加量50 U/g(以玉米醇溶蛋白计)、玉米醇溶蛋白中酰基供体与GAH中的酰基受体物质的量比1∶6、初始p H 8.0、反应温度44℃、反应时间7 h;此反应条件下,玉米醇溶蛋白中GAH的最大导入量为(11.34±0.21)mg/g(以玉米醇溶蛋白计)。与玉米醇溶蛋白相比,玉米醇溶蛋白交联样品与糖基化修饰样品的溶解性均得到提高,玉米醇溶蛋白糖基化修饰样品的溶解性最高。 周利敏 刘晓兰 刘玥 郑喜群关键词:玉米醇溶蛋白 转谷氨酰胺酶 糖基化 蛋白质改性 玉米谷蛋白的美拉德糖基化改性 被引量:7 2016年 玉米谷蛋白在中性及偏酸性条件下溶解性差的特点限制了其在食品工业的应用。为了改善其溶解性,在D-氨基半乳糖盐酸盐存在条件下,对玉米谷蛋白进行美拉德糖基化改性。结果表明,在玉米谷蛋白质量浓度30 g/L、蛋白与糖质量比为1:2、反应温度90℃、反应体系pH10和反应时间2 h条件下,玉米谷蛋白的糖基导入量为(439.863±10.700)mg/g玉米谷蛋白。与未糖基化改性的蛋白相比,改性玉米谷蛋白的溶解性非常显著改善,起泡性提高了1.692倍,起泡稳定性降低了42.467%,乳化性提高了86.152%,乳化稳定性基本不变,持水性提高了1.13倍,持油性降低了13.684%。 徐晶 刘晓兰 郑喜群关键词:玉米谷蛋白 理化性质 玉米醇溶蛋白酶解物分子量分布特征分析 被引量:3 2014年 玉米蛋白粉(CGM)是玉米淀粉湿法加工中产量最大、蛋白质含量最高的副产物,其主要组分是玉米醇溶蛋白。因CGM的疏水性氨基酸含量高,其水溶性差,这一特点严重制约了其在食品等行业中的广泛应用。利用Alcalase和Protamex两种内切蛋白酶,分别将玉米醇溶蛋白适度酶解,以改善其水溶性。利用凝胶过滤色谱测定了不同水解度的酶解物中肽分子量分布,细致分析了玉米醇溶蛋白的主要酶解特点。结果表明,Alcalase与Protamex都能有效地改善玉米醇溶蛋白的溶解性;相同的水解度下,Alcalase对玉米醇溶蛋白水解作用更强烈。水解过程中,聚集体形式的玉米醇溶蛋白首先被Alcalase和Protamex酶切作用逐渐展开,随着酶解的进行,酶解物中的肽段分子量分布逐渐减小。依据使用需求,Alcalase与Protamex生物催化玉米醇溶蛋白获得的不同分子量分布的蛋白水解物均可作为基料在食品行业广泛应用。 周利敏 郑喜群 刘晓兰 刘玥关键词:醇溶蛋白 ALCALASE PROTAMEX 酶解特性 分子量分布 壳寡糖酶法糖基化修饰对玉米醇溶蛋白功能性质的影响 被引量:15 2018年 为了提高玉米醇溶蛋白的生物利用率,以微生物转谷氨酰胺酶为催化剂,壳寡糖(分子质量为1 500 Da)作为酰基受体,通过糖基化反应修饰玉米醇溶蛋白,分析糖基化修饰对玉米醇溶蛋白物化性质和抗氧化活性的影响。红外光谱和游离氨基含量的测定结果表明,在转谷氨酰胺酶的催化下,玉米醇溶蛋白与壳寡糖发生了共价结合。与玉米醇溶蛋白和交联玉米醇溶蛋白相比,糖基化玉米醇溶蛋白的表面疏水性显著降低,表明其水溶性显著改善;糖基化玉米醇溶蛋白的抗氧化活性(包括1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除活性,还原力和亚铁离子螯合能力)显著提高,尤其是DPPH自由基清除活性,其EC50值为0.945 mg/m L;糖基化玉米醇溶蛋白的持水性、吸油性、乳化性和Zeta电位的绝对值均显著降低。实验结果可为糖基化玉米醇溶蛋白在食品工业的应用提供参考。 王晓杰 王晓杰 丛万锁 刘晓兰 丛万锁 郑喜群关键词:玉米醇溶蛋白 壳寡糖 转谷氨酰胺酶 物化性质 转谷氨酰胺酶高产突变株的紫外线诱变选育及发酵条件研究 被引量:2 2014年 以茂源链霉菌为出发菌株,对其进行紫外线诱变,通过初筛复筛,选育出性能稳定的高产突变菌株G-17,其酶活力达到0.86U/mL,相对于出发菌株提高了2.4倍。对影响突变菌株G-17摇瓶液态发酵条件进行了研究,确定发酵的最佳条件为:培养基初始pH为7.0,100μg/L CaCl2,接种量10%(V/V),发酵温度30℃,转速200r/min,摇床震荡培养48h;最佳发酵条件下,发酵液中转谷氨酰胺酶活力达到1.27U/mL。 陈佳鹏 刘晓兰 郑喜群 田英华 刘玥关键词:转谷氨酰胺酶 紫外线诱变 发酵条件