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河南省科技攻关计划(0623011800)
作品数:
2
被引量:4
H指数:2
相关作者:
范旭
夏平安
刘玉松
崔保安
赵琳
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相关机构:
河南农业大学
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河南省科技攻关计划
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相关领域:
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河南农业大学...
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1篇
2010
1篇
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猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1/06株M基因的原核表达与重组蛋白的复性研究
被引量:2
2009年
采用PCR方法从重组质粒pTG19-T-M扩增得到缺失N端疏水区序列的基因片段tM.将tM与原核表达载体pET-32 a进行连接并转化,重组质粒经鉴定并测序.结果表明,目的基因在大肠杆菌BL21细胞中成功地表达了醉繁殖与呼吸病毒重组蛋白pET-tM,表达量为31%.表达产物经SDS-PAGE分析,得到分子量约为29 kD的重组蛋白且以包涵体形式存在.8 mol.L-1尿素变性溶解包涵体,再用稀释与透析相结合的方法对重组蛋白进行复性.复性蛋白经W estern-b lot检测,结果证明复性蛋白可被PRRSV阳性血清识别用.
刘明莉
张凤华
范旭
赵琳
刘玉松
徐红运
夏平安
崔保安
关键词:
PRRSV
M蛋白
原核表达
猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株的遗传变异分析
被引量:2
2010年
用间接免疫荧光试验和RT-PCR方法,从河南省不同地区送检的疑似猪繁殖与呼吸综合征的病料中分离到16株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),扩增分离株的ORF5基因并进行序列测定、比较分析和绘制进化树.结果表明,16株分离株之间的氨基酸序列同源性为88.1%~99,8%;与欧洲型LV株和美洲型VR-2332株的氨基酸序列同源性分别为54.0%~54.5%和88.1%~99.2%,证明分离的16株病毒均为美洲型.用DNAstar等软件对16株分离株推导的氨基酸序列作进一步比较分析,发现16株分离株ORF5基因编码的gp5蛋白的抗原区、潜在疏水区、跨膜区和N-糖基化位点分布均有差异,与其它美洲型毒株也存在一定程度的差异,说明在河南流行的PRRSV存在明显的遗传差异性.
范旭
李伟娟
刘玉松
徐红运
张凤华
赵琳
段志刚
夏平安
崔保安
关键词:
猪繁殖与呼吸综合征病毒
ORF5基因
克隆
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