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国家自然科学基金(30170682)

作品数:5 被引量:24H指数:3
相关作者:鲍恩东王志亮赵茹茜李玉保裴兰英更多>>
相关机构:南京农业大学农业部动物检疫所中国动物卫生与流行病学中心更多>>
发文基金:国家自然科学基金中德农业科技合作项目博士科研启动基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 5篇期刊文章
  • 2篇会议论文

领域

  • 6篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇蛋白
  • 5篇热休克
  • 5篇热休克蛋白
  • 4篇HSP70
  • 3篇肉鸡
  • 3篇热休克蛋白7...
  • 2篇单克隆
  • 2篇单克隆抗体
  • 2篇单克隆抗体制...
  • 2篇应激
  • 2篇原核表达
  • 2篇原位
  • 2篇原位杂交
  • 2篇转录
  • 2篇免疫
  • 2篇抗体制备
  • 2篇HSPS
  • 1篇心血管
  • 1篇心血管系统
  • 1篇血管

机构

  • 6篇南京农业大学
  • 4篇农业部动物检...
  • 1篇聊城大学
  • 1篇中国动物卫生...

作者

  • 4篇鲍恩东
  • 3篇孙培明
  • 3篇李玉保
  • 3篇赵茹茜
  • 3篇王志亮
  • 2篇吴晓东
  • 2篇刘雨田
  • 1篇赵永刚
  • 1篇裴兰英

传媒

  • 2篇中国农业科学
  • 2篇中国畜牧兽医...
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇南京农业大学...
  • 1篇Agricu...

年份

  • 4篇2008
  • 1篇2007
  • 2篇2006
5 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
运输应激猪HSPs mRNA转录、分布及免疫器官病理性损伤相关性研究被引量:12
2008年
【目的】研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平,探讨其相关性。【方法】利用组织学、原位杂交和本实验室建立的猪HSPs mRNA一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台等方法,研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平的变化。【结果】在长途运输应激初期(1~2h),淋巴结和脾脏出现急性病理性损伤变化,损伤程度较为严重;运输应激4h时,组织的病理性损伤与应激初期相似,但血管的充血程度有所减轻;淋巴结和脾脏中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激持续到10h时,HSP70 mRNA的转录水平升到最高,分别为对照组的9.59和11.46倍;HSP90 mRNA的转录水平在应激初期(1~2h)急剧升高(P<0.01),运输应激2h时,淋巴结和脾脏中HSP90 mRNA的转录水平分别为对照组的59.67和13.03倍,到运输应激持续到6h后,升高不再显著。HSPs mRNA在淋巴结和脾脏细胞中的定位无肉眼可见的随着应激时间的延长而发生相应的变化,但HSP70和HSP90 mRNA之间的定位存在着差异。【结论】运输应激可以导致组织损伤和HSPs mRNA转录水平的变化,但对不同家族的HSPs mRNA转录水平的影响不同;HSP90 mRNA的转录水平与组织损伤有着良好的相关性,有望成为猪运输应激的判定指标之一。
李玉保裴兰英鲍恩东王志亮赵茹茜
关键词:热休克蛋白运输应激
肉鸡HSP70的基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备被引量:3
2008年
【目的】制备高特异性的肉鸡热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)单克隆抗体,研究肉鸡HSP70与热应激损伤的关系。【方法】利用RT-PCR方法扩增肉鸡HSP70mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70具有很好的免疫原性。以纯化的重组肉鸡HSP70免疫Balb/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。【结果】获得2株分泌肉鸡HSP70单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步通过免疫印迹分析筛选出1株高特异性的肉鸡HSP70单克隆抗体,命名为BH70-1。【结论】免疫组织化学结果显示,单克隆抗体BH70-1是一种理想的抗体。
孙培明吴晓东赵永刚刘雨田王志亮鲍恩东
关键词:热休克蛋白70原核表达单克隆抗体制备肉鸡
HSP70及HSP70 mRNA在热应激肉鸡组织中的定位
利用间接法免疫组织化学技术和RNA探针原位杂交技术,研究了HSP70及HSP70 mRNA在热应激6 h处理肉鸡心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊等组织中的分布。结果显示,热应激6 h时HSP70 mRNA主要分...
孙培明刘雨田王清华王志亮鲍恩东
关键词:热休克蛋白70心血管系统原位杂交肉鸡
文献传递
原位杂交法检测hsp mRNA在猪组织细胞中的分布
2008年
根据hsp70和hsp90 mRNA基因序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,利用体外转录系统,制作地高辛标记的RNA探针,建立检测hsps mRNA原位杂交方法。利用自建的原位杂交方法,对hsp70、hsp90 mRNA进行组织细胞定位研究。结果显示:hsp70 mRNA和hsp90 mRNA广泛分布于各组织细胞中,尤其在细胞核中相对集中,在肾小管上皮细胞胞浆中也呈强阳性着色。
李玉保鲍恩东赵茹茜
关键词:原位杂交HSPMRNA体外转录
肉鸡HSP70基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备
利用RT-PCR方法扩增了肉鸡HSP70 mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a(+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70。以纯化的重组肉...
孙培明吴晓东赵永刚刘雨田王志亮鲍恩东
关键词:热休克蛋白70原核表达单克隆抗体免疫印迹肉鸡
文献传递
猪hsp70和hsp90荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:4
2008年
根据hsp70、hsp90和GAPDH基因mRNA序列,设计并合成3对引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,系列稀释作为阳性标准品,用于标准曲线的绘制和样品检测,并用持家蛋白GAPDH基因对样品进行归一化,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并对其扩增效率、敏感性、特异性进行了检测。结果证明,建立的一步法荧光定量RT-PCR技术可以真实地反映反应管中模板的数量,可用于猪hsp70、hsp90和GAPDH基因mRNA水平的检测。
李玉保鲍恩东赵茹茜王志亮
关键词:HSP70HSP90GAPDH荧光定量RT-PCR
Relationship Between Heart Damages and HSPs mRNA in Persistent Heat Stressed Broilers被引量:6
2007年
The relationship between myocardial cell damages and HSPs mRNA transcription in heat stressed broilers was studied using a spectrophotometer, the histopathological technique, and fluorescence quantitative reverse transcription PCR (FQ RT-PCR). The results showed that the activities of creatine kinase (CK) and glutamic-pyruvic transaminase (GPT) were induction during the persistent heat stress. The major lesions of the myocardial fibers were granular degeneration and necrosis. The transcription of constitutive or cognate heat shock protein 70 (HSC70) mRNA was changeable. The transcription of heat shock protein 70 (HSP70) mRNA was increased obviously in the course of persistent heat stress. The results showed that the change of HSC70 mRNA transcription was contrary to the activity of CK, and the level of HSC70 mRNA transcription must be used as a symbol of the myocardial cell damages in the course of persistent heat stress.
SUN Pei-mingLIU Yu-tianZHAO Yong-gangBAO En-dongWANG Zhi-liang
关键词:热休克蛋白热损伤
共1页<1>
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