国家高技术研究发展计划(2002AA224101)
- 作品数：3 被引量：31H指数：2
- 相关作者：郑成超杨予涛张可伟郭兴启杨国栋更多>>
- 相关机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 6个植物MARs序列的ARS功能鉴定与分析被引量：2
- 2003年
- 利用酵母表达系统,对来自烟草和拟南芥的6个植物MARs序列分别进行了ARS功能鉴定.结果表明,在酵母细胞内,TM1和AM4有强的自主复制功能,其活性与来自酵母染色体的ARS相当,其他4个植物MARs序列无ARS活性.为了进一步分析植物MAR序列中ARS的活性区,利用PCR方法对TM1和AM4进行亚克隆,相应的亚克隆分别命名为TM1—1,TM1—2,TM1—3,AM4—1,AM4—2和AM4—3.实验发现,TM1—3和AM4—3不仅具有比完整MARs更高的ARS活性,而且在酵母转化效率、转化稳定性及生长速度方面也优于完整片段.本研究结果为阐明MAR的作用机制与自主复制功能的关系提供了重要线索.
- 李宏杨予涛张可伟郑成超
- 关键词：植物酵母核基质染色体
- 一个光合组织特异表达强启动子的分离及功能分析被引量：23
- 2003年
- 用接头PCR技术克隆了长度为1415bp的PNZIP基因启动子,该启动子具有真核生物启动子的典型特征,引物延伸实验证明转录起始位点位于翻译起始位点上游122bp处。根据PNZIP基因启动子的序列特征,利用PCR技术对该启动子进行了有目的的缺失,将5个长度不同的启动子片段分别与报告基因GUS相连接,构建植物表达载体,转化烟草。荧光定量检测结果表明:5个不同长度的PNZIP启动子均能驱动GUS基因在光合组织中专一表达,它们的活性随着启动子5′端的逐步缺失而不断地下降;在叶片组织中长度为1415bp的PNZIP启动子活性比35S启动子高9倍;PNZIP启动子中存在2个可能与光合组织特异表达有关的新的顺式作用元件,即GAAATA和GATACT,GATACT元件可能决定基因的光合组织特异性表达,而GAAATA可能作为增强子提高基因在光合组织的表达强度。
- 杨予涛杨国栋刘石娟郭兴启郑成超
- 关键词：植物基因工程特异表达强启动子基因表达转基因植物
- 核基质结合序列(MAR)与基因表达调控被引量：6
- 2004年
- 核基质结合序列 (MAR)是能在体外与核基质特异结合的DNA序列 ,广泛存在于染色质Loop结构的边界序列中。随着研究的深入 ,发现MAR序列不仅在染色质折叠中起到重要作用 ,影响邻近内源基因表达 ,而且将MAR序列构建到外源基因表达盒两侧转化动植物时 ,也影响外源基因的表达。因此 ,MAR序列是基因组中一种重要的基因间边界序列 ,为阐明非编码序列在基因表达中的作用和构建真核生物高效表达载体提供了新途径。
- 张可伟王健美郑成超
- 关键词：染色质基因表达转基因沉默
