安徽高校省级自然科学研究基金(KJ2009A175)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 呼吸道合胞病毒感染巨噬细胞活化Toll样受体3介导的抗病毒作用研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染巨噬细胞(RAW264.7细胞)后,Toll样受体3(TLR3)的水平变化及其介导产生的I型干扰素的抗病毒作用。方法 RSV感染体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,并给予TLR3特异性抗体处理,分别于感染的4、8、12、16和24h后收集各组细胞。以未感染病毒的细胞为对照组。用Trizol提取细胞总RNA,半定量RT-PCR法检测TLR3、干扰素α(IFN-α),干扰素β(IFN-β),RSVF蛋白的mRNA表达量变化。结果 (1)RSV感染RAW264.7细胞后,TLR3、IFN-α、IFN-β、RSVF蛋白的mRNA表达量均升高且有时间依赖性,TLR3mRNA24h表达量是基础表达量的6倍多,IFN-α,IFN-βmRNA24h表达量是基础表达量的4倍多,RSVF蛋白mRNA是基础表达量的近1.8倍。(2)预先给予TLR3抗体处理以抑制TLR3受体后,再行RSV感染,IFN-α和IFN-β的mRNA表达量虽有升高,但较感染组相比均有下降,mRNA表达在12h后显著降低,且IFN-β的mRNA表达量下调更明显。但RSVF基因的mRNA表达在12h后升高有统计学差异,24h升高有显著性差异。结论 RSV感染RAW264.7巨噬细胞后可上调TLR3表达,其活化细胞介导产生的I型干扰素起抗病毒作用,在一定程度上可抑制病毒的增殖水平。
- 史晓佾黄升海
- 关键词：呼吸道合胞病毒TOLL样受体3I型干扰素巨噬细胞
- 呼吸道合胞病毒感染巨噬细胞诱导炎性基因表达的部分机制研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染巨噬细胞时前炎介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的基因表达变化及其调控的相关机制,为研究RSV的致病机制及有效预防和治疗RSV疾病提供新的思路。方法以RSV感染RAW264.7巨噬细胞,并设立不同的感染时间点(1h、4h、8h、16h和24h),同时给予PDTC(核转录因子NF-κB的特异性抑制剂)处理。以紫外线灭活RSV(UV-RSV)来分析有传染性的病毒的感染变化。收集各组细胞,用Western blot法检测细胞核内活性NF-κBp65蛋白的表达,半定量RT-PCR法检测TNF-α和iNOS mRNA表达量。结果RSV感染4h后,细胞核内活性NF-κBp65蛋白、TNF-α和iNOS mRNA表达均明显升高,各指标的变化与正常对照相比,差异均有显著性,并且与RSV感染存在时间依赖关系。当加入PDTC抑制NF-κB的入核活化后,则可显著下调相应时间点的RSV感染升高的TNF-α和iNOS mRNA表达量,使其降低至基线水平。而UV-RSV感染后并不引起NF-κB蛋白、TNF-α和iNOS mRNA的表达量增加(P>0.05)。结论RSV感染巨噬细胞可诱导前炎基因TNF-α和iNOS的大量表达,其表达可能主要依赖NF-κB活化,并且与病毒复制有关。提示在RSV感染的巨噬细胞中,NF-κB活化对TNF-α和iNOS基因表达具有重要的正调控作用。
- 黄升海刘伟史晓佾魏伟
- 关键词：呼吸道合胞病毒炎性介质巨噬细胞核因子ΚB
