国家自然科学基金(81222009)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：赵晨李俊叶锌铭吴伯乐高和香更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院丽水市人民医院天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雷帕霉素对ARPE19细胞分化的调控作用
- 2015年
- 背景视网膜色素上皮（RPE）细胞移植是多种遗传性视网膜变性疾病治疗的研究方向，但体外培养的RPE细胞系都存在细胞的去分化问题，而研究表明哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的异常激活会导致RPE细胞的去分化状态。因此抑制mTOR信号通路应有助于抑制RPE细胞的去分化状态。目的观察雷帕霉素是否能够抑制mTOR信号通路，调控人RPE细胞系ARPE19细胞的分化。方法将ARPE19细胞接种于12孔板进行培养并分为对照组和雷帕霉素组，分别在培养基中添加DMSO和终浓度400nmol／L的雷帕霉素，分别于细胞培养后24h和48h收集各组细胞，通过免疫荧光法检测各组细胞中闭锁小带1（ZO-1）蛋白的表达，分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组细胞中RPE特异性基因和蛋白的相对表达量。结果免疫荧光检测结果显示，雷帕霉素组细胞培养后24h和48h，细胞中ZO-1表达的荧光强度均明显增强。实时荧光定量PCR结果显示，雷帕霉素组ARPE19细胞处理后24h，RPE细胞特异性基因RPE65、MERKT和LRAT mRNA相对表达量较对照组分别提高了25．97％、29．71％和13．00％，差异均有统计学意义（P=0．04、0．04、0．04）；雷帕霉素组细胞处理后48h，RPE65、LRAT、rLBP1、BEST1、keratin18和MERKT mRNA的相对表达量较对照组分别提高了174．00％、88．00％、56．18％、193．81％、10．83％和35．02％，差异均有统计学意义（P=0．00、0．04、0．U1、0．04、0．04、0．03）。Western blot检测结果显示，雷帕霉素组细胞处理后24h和48h，细胞中Akt／mTOR信号通路相关蛋白p-mTOR、p-P70S6和p—S6表达条带均较对照组均明显减弱；雷帕霉素处理细胞后24h，细胞中RPE特异性蛋白ZO-1蛋白的相对表达量提高40％，差异有统计学意义（P=0．01）；雷帕霉素处理细胞后48h，ZO-1、MERKT、Catenin和LRAT蛋白的相对表达量较对照组分别提
- 蒋超赵晨石厚霞丁思加
- 关键词：雷帕霉素分化
- 手法劈核人工晶状体植入辅助治疗高度近视并发白内障的应用价值研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨小切口手法劈核联合人工晶状体植入治疗高度近视并发白内障的临床效果。方法选择咸阳市中心医院2013年6月至2014年6月收治的高度近视并发白内障患者共108例(114眼)作为研究对象,并按随机数字表法分为2组,观察组55例(58眼)和对照组53例(56眼)。其中,观察组患者采用小切口手法劈核联合人工晶状体植入术进行治疗,而对照组则采用常规超声乳化联合人工晶状体植入术进行治疗。观察并比较2种手术前后患者裸眼视力、最佳矫正视力以及术后并发症发生率等指标的差异。结果 2组患者术前的裸眼视力、最佳矫正视力差异均无统计学意义(P>0.05),但术后均明显改善,观察组术后裸眼视力为(0.69±0.17),显著高于对照组的(0.42±0.13);并且,观察组术后最佳矫正视力≥0.3者51眼(88%),最佳矫正视力≥0.5者39眼(67%),显著高于对照组的43眼(77%)和28眼(50%);观察组术后并发症发生率仅为9%(5/58),明显低于对照组的23%(13/56),2组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论小切口手法劈核联合人工晶状体植入治疗高度近视并发白内障的疗效显著,安全性高,值得在临床上推广使用。
- 姜春辉郭宣妮朱安泰郭利红赵晨
- 关键词：近视白内障
- 一汉族常染色体显性遗传视网膜色素变性家系视紫红质基因检测分析
- 2013年
- 背景视紫红质（RHO）基因是常染色体显性遗传视网膜色素变性（adRP）最常见的致病基因，错误折叠的RHO突变型蛋白积聚在内质网从而引起内质网应激（ERS）是其引起视网膜色素变性（RP）的主要发病机制之一。目的检测一汉族adRP家系的致病突变基因，探讨其遗传学基础。方法对参与研究的所有家系成员进行详细的眼科检查。利用新一代测序技术（NGS）对该家系进行189个遗传性视网膜疾病相关基因的目标区域捕获测序，数据经分析滤过，候选突变进行Sanger测序验证和致病性评估。构建视紫红质一增强型绿色荧光蛋白质粒（RHO—pEGFP），包括RHO-pEGFP-N1野生型和RHO-pEGFP-N1突变型质粒，转染人视网膜色素上皮（RPE）细胞系（ARPEl9）和人肾胚293细胞系（HEK293）培养24h，用细胞免疫荧光法观察野生型和突变型RHO—GFP融合蛋白在细胞内的定位；采用荧光定量PCR（Q—PCR）及Westernblot法检测ERS关键因子X盒结合蛋白-1（XBPl）在细胞中的表达。结果该汉族家系共5代，遗传模式符合常染色体显性遗传，家系中患病者眼底特征为RP。NGS数据经分析过滤后获得惟一可能致病突变RHOP．P53R，Sanger测序验证该错义突变在该家系中呈共分离，现存的11例患者均呈杂合子。野生型RHO—GFP融合蛋白呈绿色荧光，分布于呈红色荧光的内质网及细胞膜，而突变型RHO—GFP融合蛋白仅积聚在内质网。与转染RHO-pEGFP—N1野生型的细胞相比，转染RHOp5-pEGFP—N1突变型的HEK293细胞中XBPl表达上调了（1．28±O．09）倍。表达突变型蛋白的HEK293细胞内XBPlmRNA中被特异性地剪切了26个碱基的内含子，转染突变型蛋白的HEK293细胞中XBPl蛋白水平表达明显高于转染野生型、转染空pEGFP—N1质粒细胞及未转染细胞。结论RHO p．P53R是该家系的致病突变基因，该突变型RHO蛋白不能有效地从内质网向细胞膜转运
- 陈雪娟高翔赵晨赵堪兴
- 关键词：常染色体显性视网膜色素变性视紫红质内质网应激
- 碳酸酐酶Ⅱ基因多态性与原发性开角型青光眼遗传易感性的关系被引量：1
- 2016年
- 目的:分析碳酸酐酶Ⅱ基因多态性与原发性开角型青光眼遗传易感性的关系。方法:选取2012-01/2014-12在丽水市人民医院进行诊治的原发性开角型青光眼患者(观察组)50例与在丽水市人民医院门诊部体检的健康人(对照组)50例进行试验观察,常规肘静脉取血,使用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术测试碳酸酐酶Ⅱ基因多态性的特点。结果:两组患者在和rs10504813位点rs3758078位点的分布符合哈迪-温伯格平衡定律(Hardy-Weinberg equilibrium),且试验结果显示在rs10504813位点中,两组的基因型频率的差异无统计学意义(P>0.05),但在等位基因频率分布之间的差异具有统计学意义(P<0.05);两组在rs3758078位点的基因型频率以及等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者在碳酸酐酶Ⅱ基因多态性进行单倍型分析发现,TAC单倍型携带者出现原发性开角型青光眼的风险较小。结论:碳酸酐酶Ⅱ基因多态性与原发性开角型青光眼的患病风险存在一定的关联,rs3758078位点基因平衡可能是患病风险低的主要原因;TAC单倍型携带者出现原发性开角型青光眼的风险较小。
- 吴安黛叶锌铭高和香李俊赵晨
- 关键词：原发性开角型青光眼遗传易感性
- 曲安奈德联合577nm激光治疗黄斑囊样水肿临床研究被引量：5
- 2014年
- 目的:评价球后注射曲安奈德(triamcinolone acetonide,TA)联合577nm激光黄斑区格栅样光凝治疗黄斑囊样水肿的治疗效果。方法:对58例66眼不同原因导致的黄斑囊样水肿患者,给予球后注射曲安奈德联合577nm激光黄斑部格栅样光凝治疗,观察所有病例激光后第1wk;1,3mo最佳矫正视力、黄斑厚度、眼底及眼压情况。结果:所有66眼中,光相干断层成像技术及眼底荧光造影检查示黄斑囊样水肿均部分或完全消退,54眼(82%)视力好转,12眼视力不变。结论:对于黄斑囊样水肿,球后注射曲安奈德联合577nm激光黄斑部格栅样光凝,治疗效果好,操作简单,并发症少。
- 李俊吴伯乐叶锌铭赵晨
- 关键词：黄斑囊样水肿球后注射曲安奈德格栅样光凝
