黑龙江省自然科学基金(ZJY0404)
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 相关作者：姜晓峰许勇臣万丽平郭晓英更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 野生型及突变型人白细胞介素13的原核表达及活性分析
- 2006年
- 目的:在大肠杆菌中表达野生型和突变型重组人IL13,经纯化复性获得具有有活性的蛋白。方法:用PCR扩增IL13基因片段,用定点突变PCR获得其突变体(IL13’)基因。将IL13和IL13’基因分别克隆至原核表达载体pET30a(+)中,构建重组体pET30a(+)IL13和pET30a(+)IL13’,分别命名为pETIL13和pETIL13’。以重组体转化E.coliBL21(DE3)在IPTG诱导下进行表达。表达产物用NiNTA层析柱进行纯化。纯化产物用氧化还原谷胱甘肽系统透析复性后,检测其生物学活性。结果:在E.coliBL21(DE3)中表达了IL13/IL13’His6融合蛋白。经SDSPAGE显示,融合蛋白的Mr约17000,经Westernblot证实为人IL13。表达的融合蛋白以包涵体的形式存在,纯化后得到较高纯度的重组蛋白。复性后的包涵体检测具有生物学活性。结论:成功地获得具有生物学活性的野生型和突变型人IL13重组蛋白,为下一步研究奠定了基础。
- 姜晓峰郭晓英万丽平
- 关键词：原核表达活性分析
- 白细胞介素13与其受体间作用机制的探讨被引量：9
- 2005年
- 白细胞介素13(IL13)与其受体间的作用是体现生物学活性的基础,而IL13氨基酸残基突变产生的不同型体能改变这种作用机制,使受体信号增强或减弱,随之生物学活性发生变化,了解这种机制,将为临床上防治IL13相关疾病提供新的策略。
- 许勇臣姜晓峰
- 关键词：白细胞介素13受体蛋白质分子结构
