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创伤弧菌溶细胞素蓖麻毒素B活性模序的预测、克隆表达和功能鉴定被引量：3: 2013年; 目的研究克隆表达的创伤弧菌溶细胞素（VVC）中的重组蓖麻毒素B（rRicinB）功能模序，明确其功能，进一步阐明创伤弧菌溶细胞素的分子致病机制。方法生物信息学预测VVC中的功能模序，构建pET28a-rRicinB原核表达系统，并通过IPTG诱导表达、三步洗涤、Ni24NTA柱亲和层析法纯化、复性、ELISA检测和激光共聚焦显微镜检测FITC标记的rRicinB与Hela细胞相互作用等。结果通过生物信息学预测到YVC中336～465位氨基酸序列可能存在蓖麻毒素B链的功能模序，克隆表达这段模序后，其相对分子质量为20×103，经ELISA法检测复性后蓖麻毒素抗原性为28．71U／L；Hela细胞经FITC标记的rRicinB作用后其细胞膜表面和胞质均有绿色荧光产生。结论VVC中存在具有类似天然蓖麻毒素B链功能的模序，能与细胞膜表面结合并进入胞质，可能与创伤弧菌溶细胞素膜成孔和细胞毒活性有关。; 王永明谢旦立金疆楼永良; 关键词：创伤弧菌

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浙江省医药卫生科学研究基金(2008A115)