北京市自然科学基金(5062036)
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 相关作者：胡迎春霍艳英吴德昌李刚杨柳更多>>
- 相关机构：军事医学科学院重庆医科大学解放军第307医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 多效生长因子通过JNK信号通路负调控Schlafen2基因表达被引量：2
- 2008年
- 实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉默细胞JNK磷酸化水平的影响;应用Northern印迹分别检测JNK和p38通路特异性抑制剂对Ptn沉默细胞Slfn2基因转录水平的影响.结果发现,Ptn沉默细胞内JNK磷酸化水平高于对照细胞,外源性PTN处理后沉默细胞内JNK磷酸化水平下调;阻断JNK通路呈时间依赖性抑制Ptn沉默细胞中Slfn2基因转录,阻断p38通路对Ptn沉默细胞中Slfn2转录水平没有明显影响.结果提示,Ptn可能通过抑制其下游JNK/MAPK通路来负调控Slfn2的表达.
- 方玲胡迎春杨柳刘梦伊刘昕潘兴斌吴德昌霍艳英
- 关键词：多效生长因子基因沉默
- 永生化人支气管上皮细胞中TGF-β_1对MAPK家族ERK通路的活化效应
- 2007年
- 目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)在永生化人支气管上皮细胞BEP2D信号转导中MAPK家族ERK通路的激活情况及其引起的细胞增殖、凋亡和形态学的改变。方法用Western blot方法检测TGF-β1对ERK的活化特点;用荧光染料染色分析和流式细胞术检测TGF-β1引起ERK活化时细胞的凋亡变化;用细胞克隆形成率分析TGF-β1引起ERK活化时细胞的增殖情况;观察TGF-β1引起ERK活化时细胞的形态改变。结果TGF-β1可在短时间内激活ERK1/2,1h达峰值,然后逐渐减弱;TGF-β1诱导BEP2D细胞凋亡,抑制其增殖,使其体积和间距增大;用U0126抑制ERK通路,能促进TGF-β1对细胞在凋亡、增殖方面的作用,但抑制其对细胞形态的影响。结论TGF-β1诱导的ERK1/2的磷酸化在调节BEP2D细胞的增殖和凋亡间的平衡方面起着重要作用。
- 苟巧宋博强胡迎春吴德昌霍艳英
- 关键词：人支气管上皮细胞转化生长因子Β
- 多效生长因子对基质金属蛋白酶3,10的负调控作用被引量：1
- 2008年
- 目的:研究多效生长因子对基质金属蛋白酶(MMP)3、10的负调控作用。方法:用RT-PCR、Northern印迹比较对照与多效生长因子沉默细胞中MMP3、MMP10的表达;在多效生长因子沉默细胞培养液中加入50 ng/mL多效生长因子,检测MMP3、MMP10的表达。结果:多效生长因子缺失细胞中MMP3、MMP10高表达;而在其中添加多效生长因子之后,MMP3、MMP10的表达基本被完全抑制。结论:多效生长因子对MMP3、MMP10有负调控作用。
- 张博胡迎春杨柳李刚李晓兵吴德昌霍艳英
- 关键词：多效生长因子基质金属蛋白酶负调控
- 过氧化氢以PTEN依赖方式介导细胞凋亡被引量：6
- 2007年
- PTEN是一个重要的抑癌基因.为了调查PTEN在H2O2对细胞凋亡诱导过程中的作用及机制,采用Western印迹方法,检测了在PTEN缺失细胞及对照细胞中H2O2对PI3K/AKT通路的影响;采用AnnexinⅤ-FITC标记结合流式检测H2O2对PTEN缺失细胞及对照细胞凋亡的诱导.结果表明,在PTEN功能正常的对照细胞中,H2O2短时间活化,长时间抑制PI3K/AKT通路,但PTEN缺失后,H2O2对PI3K/AKT通路的介导被阻断;0.1 mmol/L H2O2处理12 h及24 h可以诱导对照细胞的凋亡,但对PTEN缺失细胞没有明显影响.这一结果证明,PTEN通过参与H2O2对PI3K/AKT通路活性的调控影响H2O2介导的凋亡.
- 霍艳英付春玲苟巧胡迎春李刚吴德昌
- 关键词：PTENH2O2AKT凋亡
- Pten基因敲除对过氧化物酶家族表达和活性氧水平的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨Pten基因敲除后对过氧化物酶家族(Peroxiredoxins,Prdxs)水平和活性氧水平的影响。方法:采用Western印迹和化学/荧光发光分析法分别检测了在Pten+/+MEF和Pten-/-MEF细胞中PRDXs的表达和细胞内活性氧水平。结果:Western印迹结果显示,与Pten+/+MEF细胞相比,Pten-/-MEF细胞PRDXⅠ,Ⅱ,Ⅴ,Ⅵ蛋白水平下调,PRDXⅢ不变,PRDXⅣ上调。DCFH探针标记后流式结果显示Pten-/-MEF细胞活性氧荧光值显著高于对照Pten+/+MEF细胞(P<0.05)。结论:Pten基因敲除引起数种PRDXs表达下调,细胞内活性氧水平增高。
- 傅春玲霍艳英胡迎春李刚米粲吴德昌
- 关键词：PTEN活性氧H2O2
- 多效生长因子(Pleiotrophin)基因沉默后的基因表达谱初步分析被引量：9
- 2007年
- 多效生长因子(pleiotrophin,PTN指蛋白,Ptn指基因)是一种可同肝素结合的分泌性的生长/分化因子,具有刺激细胞粘附、迁移、存活、生长和分化等功能.我们前期研究发现,Ptn稳定沉默可以显著降低细胞的生长及成瘤能力.为进一步了解Ptn表达沉默后小鼠基因转录谱的变化,用小鼠表达谱芯片比较了对照及Ptn沉默细胞的基因表达差异.在检测的24000个基因中,Ptn沉默后上调2倍以上的基因有240个,下调2倍以上的基因有129个.值得引起注意的是,在Ptn沉默的MEFs细胞中,同DDK综合症相关的基因家族,schlafen(Slfn)家族的Slfn2、Slfn3、Slfn4以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)家族的Mmp3、Mmp10、Mmp13表达均显著上调;而可促进内皮细胞运动,参与血管发生的基因angiomotin(Amot)表达显著下调.通过研究,获得了一系列Ptn沉默后表达变化的基因信息.
- 霍艳英胡迎春周乔丹杨柳张博李刚吴德昌
- 关键词：多效生长因子基因沉默基质金属蛋白酶
- H2O2及PTEN在肽类生长因子活化Akt激酶中的作用
- 2008年
- 目的研究H2O2、PTEN与肽类生长因子(胰岛素等)在调控Akt激酶活性中的作用及其相互关系。方法Western Blot检测对照小鼠胚胎成纤维细胞PTEN+/+ MEFs和PTEN基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞PTEN-/-MEFs中PTEN蛋白表达的差异。用胰岛素及NADPH氧化酶(NOX)抑制剂——DPI作用PTEN+/+M EFs和PTEN-/-MEFs细胞,Western Blot检测Akt激酶蛋白磷酸化水平的变化。将细胞接种于96孔板,加入胰岛素及DPI,96h后MTT法检测细胞增殖的变化。结果在对照PTEN+/+ MEFs细胞内,加入胰岛素(100mU/ml)15min后Akt激酶磷酸化水平明显上调,加入10μmol/LDPI处理30min后,Akt激酶磷酸化恢复到基础水平,在PTEN-/-MEFs细胞中未观察到上述变化。经胰岛素作用后PTEN+/+ MEFs细胞增殖加快(P<0.05),加入DPI作用后可减缓细胞的增殖(P<0.05),胰岛素和DPI同时作用对其增殖无明显影响(P>0.05);各种处理因素对PTEN-/-MEFs细胞增殖均无明显影响(P均>0.05)。结论肽类生长因子可以通过磷酸化激活Akt激酶,这一过程依赖于H2O2的产生和抑癌基因PTEN的存在。
- 杨柳霍艳英胡迎春付春玲李刚米粲吴德昌
- 关键词：肽类生长因子胰岛素过氧化氢DPIPTEN
