国家科技支撑计划(2006BAI11B08-04)
- 作品数：10 被引量：73H指数：5
- 相关作者：吴安国赖小平王春玲曾宝陈建南更多>>
- 相关机构：广州中医药大学南方医科大学广西中医药大学附属瑞康医院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划广东省高等学校自然科学研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黄连厚朴配伍在不同提取工艺中主要成分含量的变化被引量：10
- 2011年
- 目的:比较黄连厚朴不同提取工艺,不同配伍比例主要成分含量的变化。方法:1.黄连厚朴以水和乙醇2种溶剂,采用分提与合提2种提取方法;2.以乙醇为溶剂,黄连厚朴以3∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶3不同配伍比例提取,采用高效液相色谱法,测定小檗碱、厚朴酚、和厚朴酚的含量。结果:①黄连厚朴的乙醇提取工艺的提取率优于水提取,而在水合提工艺中小檗碱的含量下降40%,在醇提工艺中只下降1%,厚朴的含量在合提工艺中均比分提提高了2%左右。②当配伍比例为1:1的时候小檗碱的提取率较高,厚朴比例越低,其提取率越高。结论:黄连厚朴应采取醇合提的工艺,在提取工艺中,应考虑中药化学成分的不同理化性质,采取适宜的提取溶剂和提取方法。
- 吴安国曾宝林乔何百寅陈建南赖小平
- 关键词：黄连厚朴高效液相色谱法
- 和厚朴酚联合青蒿素对CNE-2细胞周期阻滞的作用被引量：3
- 2013年
- 目的:观察和厚朴酚(HNK)联合青蒿素(ART)对人鼻咽癌细胞(CNE-2)细胞周期的调控作用,探讨其可能的机制。方法:CNE-2细胞经胸腺嘧啶核苷(TdR,终浓度为2 mmol.L-1)处理16 h,2次PBS洗脱后用RMPI-1640培养基10 h,再次加入终浓度为2 mmol.L-1的TdR处理16 h,PBS洗脱后收集细胞用于下一步的实验研究。HNK(7.5 mg.L-1),ART(7.5 mg.L-1)单独及联合作用于已同步化的CNE-2细胞24 h,同时设立对照组,流式细胞仪检测细胞周期分布的改变;RT-PCR检测cyclin D1,cyclin E1,p27 mRNA表达。结果:CNE-2细胞经胸腺嘧啶核苷2次处理后,流式细胞仪检测显示,G1,S,G2期细胞比例分别为(72.64±5.01)%,(24.60±4.35)%,(0.00)%,表明细胞处于G1/S交界处。HNK+ART组、HNK组、ART组的G1期细胞比例分别为(90.78±9.49)%,(67.86±1.59)%,(66.77±2.25)%,提示HNK+ART组较HNK组或ART组显著地将CNE-2细胞阻滞在G1期(P<0.05)。RT-PCR检测显示HNK+ART组、HNK组、ART组的cyclin D1mRNA表达分别为(0.237±0.014),(0.328±0.002)及(0.368±0.007);cyclin E1 mRNA的表达各组依次是(0.445±0.027),(0.572±0.005)及(0.542±0.006);p27 mRNA的表达各组分别是(1.069±0.046),(0.543±0.022)及(0.388±0.004),与单药组比较,HNK+ART组显著下调cyclin D1,cyclin E1 mRNA的表达(P<0.05),显著上调p27 mRNA的表达(P<0.05)。结论:HNK+ART应用以协同方式诱导CNE-2细胞阻滞于G1期,这可能与通过下调cyclin D1及cyckin E1的mRNA表达及上调p27 mRNA表达有关。
- 王春玲岳红文晓东
- 关键词：和厚朴酚青蒿素细胞周期
- 大鼠在体肠吸收穿心莲内酯的特征研究被引量：5
- 2010年
- 目的为探讨穿心莲内酯生物利用度低的原因,考察穿心莲内酯肠道吸收特性,肝肠循环和肠道酶代谢特点。方法采用大鼠在体肠灌流模型。运用HPLC法测定肠灌流液、胆汁以及经肠道酶降解后样品中穿心莲内酯的量。结果穿心莲内酯在不同肠段的吸收率,以十二指肠最高,达40%,而在结肠最低,仅有10%。穿心莲内酯在十二指肠灌流液中的生物降解最显著(1 h降解约50%),在回肠、结肠中则几乎无降解反应。穿心莲内酯有胆汁排泄,其排泄量为灌流药物总量的0.76%。结论穿心莲内酯在大鼠肠道的吸收较差,而在十二指肠中吸收表现较好是由于存在较强的肠道酶代谢作用。同时,穿心莲内酯存在明显的肝肠循环。穿心莲内酯生物利用度低的原因与肠吸收差、肠道酶代谢作用强和肝肠循环有关。
- 叶玲刘薇唐斓夏笔军龚耘刘中秋
- 关键词：穿心莲内酯
- 和厚朴酚联合青蒿素对CNE-2细胞增殖和凋亡的作用被引量：5
- 2011年
- 目的:研究和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用在体外能否抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的生长以及对其细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测和厚朴酚、青蒿素单独或联合对细胞生长的抑制作用,以IC50评判抗肿瘤的效果,应用金氏公式进行联合用药的结果分析;DAPI染色观察细胞的凋亡形态,流式细胞仪检测和厚朴酚、青蒿素单独或联合作用对CNE-2凋亡率的影响。结果:和厚朴酚能显著抑制CNE-2细胞的增殖,并呈剂量依赖关系,其半数抑制浓度(IC50)为8.58 mg.L-1;青蒿素对CNE-2细胞生长没有明显的抑制作用,半数抑制浓度(IC50)为62.24 mg.L-1;和厚朴酚与青蒿素联合应用对CNE-2细胞的增殖抑制作用优于各单药组,q>1.15。DAPI染色可观察到和厚朴酚与青蒿素联合组核碎裂、凋亡小体,而单药组则不明显;凋亡分析显示联合用药组作用48 h细胞凋亡率显著高于各单药组。结论:和厚朴酚单独能够杀伤CNE-2细胞,并呈量-效关系,青蒿素单独作用不杀伤CNE-2细胞,两者联合应用对CNE-2细胞具有协同杀伤作用。
- 王春玲赖小平吴安国
- 关键词：和厚朴酚青蒿素凋亡
- 双氢青蒿素在Hank's平衡盐溶液中的溶解性和稳定性变化被引量：2
- 2011年
- 目的考察双氢青蒿素在不同pH、温度、光照环境下,在Hank's平衡盐溶液(Hank's Balanced Salt Solution,HBSS)中的溶解性和稳定性,为其体外吸收与代谢研究提供依据。方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定含量。结果双氢青蒿素在4%甲醇HBSS中有较高的溶解浓度,37℃下,在pH 1,3,5,7.4的HBSS中的溶解浓度大于400μmol/L,pH1,3,5的样品,2 h之内稳定,pH 7.4的样品4 h之内稳定;在碱性HBSS中的稳定性差,容易降解;-20℃下,30 d稳定;避光可以提高其稳定性。结论实验制备的双氢青蒿素HBSS酸性或中性溶液,它们的溶解性和稳定性可以满足体外吸收与代谢研究要求。
- 曾宝吴安国王春玲黄孟秋陈建南赖小平
- 关键词：双氢青蒿素溶解性稳定性反相高效液相色谱
- Caco-2细胞模型的建立及其在中药吸收研究中的应用探讨被引量：23
- 2010年
- 目的建立Caco-2细胞模型并探讨其在中药吸收研究中的应用。方法通过显微镜观察细胞形态学特点、测定跨细胞膜电阻和荧光黄通透量等指标,对Caco-2细胞模型进行评价。结果各项指标的测定值符合要求,本实验建立的Caco-2细胞模型的完整性、紧密性和通透性良好。结论建立的Caco-2细胞模型可用于研究中药化学成分转运的吸收机制;高灵敏度分析仪器可以促进Caco-2细胞模型在中药化学成分吸收研究中最大限度的应用;通过两个或多个中药化学成分相互作用的研究,可以阐明中药配伍和中药复方应用的科学性。
- 曾宝王春玲吴安国李生梅江瑞荣赖小平
- 关键词：CACO-2细胞模型
- 和厚朴酚在缓冲溶液HBSS中的溶解性和稳定性被引量：2
- 2010年
- 目的:考察和厚朴酚在HBSS溶液中的溶解性和稳定性,为和厚朴酚在体内的吸收与代谢研究提供依据。方法:采用RP-HPLC法,分别考察了pH、温度、光照对和厚朴酚溶解性和稳定性的影响。结果:和厚朴酚在甲醇的标准曲线为Y=4 764.5X-10 955(r=0.999),在4～200μmol·L-1与峰面积呈良好的线性关系,检测限为0.2μmol·L-1,精密度和稳定性符合要求。和厚朴酚在含有1%甲醇和0.1%的吐温-80的HBSS中的溶解性较好,和厚朴酚在酸性中的稳定性优于碱性环境,在pH 7.4的HBSS中的稳定性比较理想,光照对和厚朴酚的稳定性没有影响。结论:和厚朴酚在pH 7.4的HBSS中的溶解性和稳定性比较理想,当其达到溶解平衡之后于-20℃储存。
- 吴安国曾宝王春玲李生梅陈建南赖小平
- 关键词：和厚朴酚溶解性稳定性
- 和厚朴酚联合青蒿素体外抗肿瘤的实验研究被引量：11
- 2011年
- 目的研究和厚朴酚、青蒿素及二者联合应用对人肺腺癌SPC-A-1细胞生长的抑制作用。方法 MTT法测定和厚朴酚、青蒿素单独或联合对细胞生长的抑制作用,以IC50评判抗肿瘤的效果,应用金氏公式进行联合用药分析的结果;流式细胞仪检测和厚朴酚、青蒿素单独或联合作用对SPC-A-1细胞周期分布的影响。结果和厚朴酚能显著抑制SPC-A-1细胞的增殖,并呈剂量依赖关系,其半数抑制浓度(IC50)为8.20μg.mL-1;青蒿素对SPC-A-1细胞生长没有明显的抑制作用,半数抑制浓度(IC50)为53.52μg.mL-1;和厚朴酚与青蒿素联合应用对SPC-A-1细胞的增殖抑制作用优于各单药组,Q>1.15。细胞周期分布显示联合用药组将细胞阻滞于G1期,显著高于各单药组。结论和厚朴酚单独能够杀伤SPC-A-1细胞,并呈量-效关系,青蒿素单独作用不杀伤SPC-A-1细胞,两者青蒿素联合应用对SPC-A-1细胞具有协同作用。
- 王春玲赖小平吴安国
- 关键词：和厚朴酚青蒿素细胞周期
- 和厚朴酚与青蒿素体外抗人胃癌MGC-803细胞的作用研究被引量：4
- 2012年
- 目的考察和厚朴酚、青蒿素抗肿瘤及两者联合用药的效果。方法采用MTT测定和厚朴酚、青蒿素对人胃癌MGC-803细胞、正常肝细胞LO2抑制作用,用IC50评测体外直接抗肿瘤效果,用金氏公式进行联合用药分析。结果 20μg/ml的和厚朴酚对人胃癌MGC-803细胞具有快速而不可逆的杀伤作用;和厚朴酚能抑制人胃癌MGC-803细胞、正常肝细胞LO2的增殖,IC50分别为3.96,8.04μg/ml。青蒿素对其没有明显的抑制作用,IC50分别为64.85、93.92μg/ml。3.5μg/ml的和厚朴酚与12.5,10,7.5μg/ml的青蒿素联合应用对人胃癌MGC-803细胞体外抑制呈相加作用,Q值分别为1.05,1.04,1.12;与30,20,15μg/ml青蒿素联合应用对人胃癌MGC-803细胞体外抑制呈协同作用,Q值分别为1.21,1.31,1.24;2μg/ml和厚朴酚与30,20,15,12.5,10,7.5μg/ml青蒿素联合应用对人胃癌MGC-803细胞体外抑制呈协同作用Q值分别为1.27,1.28,1.32,1.39,1.16,1.25。结论和厚朴酚对MGC-803细胞较强的抑制肿瘤生长的作用;青蒿素对人胃癌MGC-803细胞、正常肝细胞LO2的毒性低,和厚朴酚与青蒿素联合应用对人胃癌MGC-803细胞可产生协同作用或相加作用。
- 王春玲赖小平吴安国
- 关键词：和厚朴酚青霉素抗肿瘤
- HPLC考察和厚朴酚在Caco-2细胞模型的转运特征被引量：11
- 2011年
- 目的:研究和厚朴酚在Caco-2细胞模型中的转运机制。方法:Kromasil 100-5 C18色谱柱(4.5 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(70∶30),检测波长203 nm。以Caco-2细胞模型研究和厚朴酚的双向转运,考察时间、药物浓度、抑制剂、pH、温度对和厚朴酚转运的影响。运用HPLC检测药物浓度,计算其表观渗透系数。结果:和厚朴酚标准曲线为Y=24 044X-3 763.6(r=0.999 8),检测限0.04μmol.L-1。和厚朴酚在Caco-2细胞模型中,从细胞层底端到顶端的转运量小于顶端到底端的转运,在相同浓度条件下和厚朴酚在AP→BP和BP→AP方向的转运量随时间呈增长趋势;维拉帕米可以显著提高和厚朴酚AP→BL的转运量;pH对和厚朴酚在AP→BL方向的转运影响不明显;和厚朴酚在AP→BL和BL→AP方向对温度有依赖性。结论:和厚朴酚在Caco-2细胞模型中的转运主要为被动转运,兼有载体介导的主动转运,同时还受到P-gp糖蛋白的外排作用。
- 曾宝吴安国陈建南赖小平
- 关键词：和厚朴酚CACO-2HPLC表观渗透系数被动转运
